مقایسه بین روشهای سامانه های دوفازی آبی پلی وینیل پیرولیدین، دی سدیم سولفات و کروماتوگرافی در تخلیص فنیل آلانین دهیدروژناز نوترکیب

فنیل آلانین دهیدروژناز آنزیم مهمی از خانواده آمینو اسید دهیدروژنازها است که به عنوان بیوکاتالیزور در کیت های غربالگری نوزادان و سنتز فنیل آلانین مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این تحقیق دستیابی به روش تخلیص مناسب فنیل آلانین دهیدروژناز نوترکیب Bacillus badius با مقایسه بین تکنیک های کروماتوگرافی و سامانه های دو فازی آبی پلی وینیل پیرولیدین/ دی سدیم سولفات بود. رفتار آنزیم هدف در سامانه های دوفازی آبی پلی وینیل پیرولیدین/ دی سدیم سولفات آزمایش شد و با نتایج به دست آمده از پروتوکل کروماتوگرافی مقایسه گردید. مقایسه روش های کروماتوگرافی و دوفازی نشان داد که سامانه تشکیل شده از 8 درصد پلی وینیل پیرولیدین و 17 درصد دی سدیم سولفات با pH=8.0 و دمای 25 درجه سانتی گراد, مناسب ترین روش برای تخلیص فنیل آلانین دهیدروژناز بود. فعالیت ویژه, فاکتور تخلیص, بازده و بازیافت به ترتیب 1231.42 U/mg, 36.61, 95.5 درصد و 138.9 درصد به دست آمدند. رویهم رفته, ما روش دو فازی را به عنوان یک روش اقتصادی و موثر بمنظور تولید آنزیم فنیل آلانین دهیدوژناز ارایه نمودیم.