بررسی حضور قارچ های مولد آفلاتوکسین در پسته منطقه خراسان (شهرستان های گناباد و فیض آباد) با استفاده از روش مولکولی

هدف از این پژوهش, بررسی رابطه احتمالی بین حضور کپک آسپرژیلوس و ژن های مولد آفلاتوکسین با شمارش کپک و مخمر, شمارش کلی میکرارگانیسم های مزوفیل و درصد رطوبت در پسته خام بود. بدین منظور نمونه برداری از مناطق مختلف کشت پسته درشهرستان های گناباد و فیض آباد انجام شد. در این تحقیق, 30 جدایه قارچی متعلق به جنس آسپرژیلوس شناسایی و به کمک روشهای مبتنی برکشت و با استفاده از محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار خالص سازی شدند. شناسایی جنس آسپرژیلوس با استفاده از واکنش زنجیرهای پلیمراز توسط جفت آغازگر اختصاصی Asp1/Asp2 جهت تکثیر ناحیه 18S rRNA انجام گردید. همچنین ردیابی ژنهای دخیل در مسیر تولید آفلاتوکسین توسط 3 جفت آغازگر APA-450/APA-1482, ver1/ver2 و OMT-208/OMT-1232 صورت گرفت. از میان 30 جدایه قارچی, 12 نمونه حاوی ژن omtA و 4 نمونه حاوی ژن ver1 بودند. در هیچیک از جدایه های قارچی ژن تنظیمی aflR مشاهده نشد. نتایج بدست آمده نشان داد که هرچند بعضی از جدایهها یک یا دو ژن ساختاری دخیل در مسیر بیوسنتز آفلاتوکسین را دارند ولی با توجه به عدم حضور ژن تنظیمی aflR, بصورت بالقوه قادر به تولید آفلاتوکسین نمیباشند. جهت بررسی رابطه احتمالی بین حضور کپک آسپرژیلوس و ژنهای مولد آفلاتوکسین در پسته, ضریب همبستگی محاسبه گردید. نتایج بررسیهای آماری نشان داد که همبستگی بالایی بین حضور کپک آسپرژیلوس و ژنهای ver1 و omtA بر اساس دامنه رطوبت وجود دارد (p<0.05), در حالی که بین حضور کپک آسپرژیلوس و ژن های مذکور در دامنه های مختلف شمارش کپک و مخمر و همچنین شمارش کلی میکروارگانیسم های مزوفیل, رابطه معنی داری وجود ندارد.