تمییز آلل های MHC سگ (DLA-DRB1) با روش تحلیل دقیق دمای شکافت DNA

زمینه مطالعه: نقش مهم مولکو لهای مجتمع عمده پذیرش بافتی ) MHC ( اتصال به پپتی دهای پادگنی و عرضه آ نها به لنفوسی تهای T است. از اینرو تنوع MHC با حساسیت و یا مقاومت در برابر بسیاری از بیمار یهای عفونی و بیماری های خودایمن مرتبط است. یک روش نوین بررسی تنوع ژنتیکی, تحلیل دقیق دمای شکافت DNA ا) HRM-High Resolution Melting ( است که م یتوان آنرا برای بررسی تنوع MHC به کار برد. هدف: تمییز آل لهای MHC سگ ) DLA-DRB1 ( با روش تحلیل دقیق دمای شکافت DNA. روش کار: تعداد 40 نمونه خون از س گهای ارجاعی به بیمارستان دا مهای کوچک دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران جمع آوری گردید. پس از استخراج DNA و افزوده سازی اگزون دوم ژن DLA-DRB1, تحلیل HRM و منحنی ذوب صورت گرفت. برای تطبیق الگوهای HRM با توالی نوکلئوتیدی آلل ها, از روش تعیین توالی مستقیم استفاده شد. نتایج: بر اساس تنوع مشاهده شده در نتایج HRM و منحنی ذوب, 40 نمونه به 8 ژنوتیپ ) A تا H( قابل تقسی مبندی بودند. بیشترین فراوانی مربوط به تیپ 25/00( A %( و سپس تیپ C و E )هر کدام 00 / 15 %( بود. در مجموع 5/ 82 % نمون هها هتروزیگوت و 5/ 17 % نمون هها هوموزیگوت بودند. نتیج هگیری نهایی: مطالعه حاضر اولین مطالع های است که برای تایپیگ آل لهای ژن DLA-DRB1 از تکنیک HRM استفاده شده است. تطبیق نتایج HRM با توالی آلل ها نشان داد که این روش م یتواند برای تفکیک آل لهای DLA-DRB1 به کار رود.