이 그림의 표정을 관찰하면 그 미소의 애매성을 살려주고 있는 이유는 눈썹이 없기 때문이다. 눈썹은 슬플 때, 화났을 때, 놀랐을 때 등 심리 상태의 변화에 따라 근육이 부풀거나 수축하며 사람의 정서를 그대로 드러낸다.
그런데 이 그림의 표정에 관심을 갖고 자세히 관찰해보면 그 미소의 애매성을 살려주고 있는 이유가 바로 눈썹이 없기 때문이라는 것을 느끼게 될 것이다. 눈썹은 화났을 때, 슬플 때, 그리고 긴장했을 때 그 밑에 있는 근육의 수축으로 일어서게 된다. 즉 눈썹은 긴장과 불쾌감의 심벌인 것이다. 아마도 이런 것을 파악하고 있었을 레오나르도 다 빈치는 사람들이 이를 감지하지 못하게 일부러 눈썹을 생략해 불쾌감을 아예 없애려 했던 것 같다. 만일 모나리자의 그림에 눈썹을 진하게 그려넣는다면 그 미소는 빛을 발할 수 없게 될 것이다. 눈썹은 양쪽 다 합쳐서 1300개 정도의 털로 구성되며 7~11mm 정도의 길이로 눈 위를 덮듯이 배열되어 그것의 움직임만으로도 마음의 상태를 표현하거나 의사소통이 가능하게 한다. 치과에서는 이를 치료할 때 입을 벌려놓아 환자와 의사의 대화가 불가능하다. 그럴 때 능숙한 치과의사는 환자의 눈썹에 주목하면서 눈썹의 표정으로 그 환자의 의사를 파악하여 치료를 진행한다는 것이다. 눈썹은 쉴 새 없이 움직여 사람의 심리 상태를 노출시키곤 한다. 그래서 도를 닦을 때 수양의 기준을 눈썹에 두어, 비록 어떤 마음의 동요가 있을지라도, ‘눈썹하나 까딱하지 않게’ 해야 한다는 말이 나온 것이다. 이렇듯 얼굴 표정에서 눈썹은 매우 중요한 역할을 한다. 사실 눈썹이 없다면 놀라는 표정은 거의 눈에 띄지 않을 것이다. 눈썹은 심리 상태를 알려주는 작고 활발한 신호기라 할 수 있다.