ARTÍCULO	446	57	501	70	609	794	1
CORTO	505	57	544	70	609	794	1
Estandarización	88	99	198	117	609	794	1
de	203	99	220	117	609	794	1
un	224	99	242	117	609	794	1
protocolo	247	99	315	117	609	794	1
para	319	99	351	117	609	794	1
Northern	355	99	419	117	609	794	1
blot	423	99	451	117	609	794	1
no	88	118	106	136	609	794	1
radioactivo	110	118	189	136	609	794	1
usado	193	118	235	136	609	794	1
en	239	118	257	136	609	794	1
la	261	118	273	136	609	794	1
detección	278	118	346	136	609	794	1
de	350	118	367	136	609	794	1
pequeños	372	118	440	136	609	794	1
RNA	444	118	477	136	609	794	1
en	88	137	105	155	609	794	1
células	109	137	157	155	609	794	1
Vero	162	137	195	155	609	794	1
Standardization	88	168	192	185	609	794	1
of	196	168	209	185	609	794	1
Northern	213	167	273	185	609	794	1
blot	277	167	303	185	609	794	1
non-radioactive	307	168	409	185	609	794	1
protocol	413	168	468	185	609	794	1
used	473	168	503	185	609	794	1
in	88	186	100	203	609	794	1
the	105	186	125	203	609	794	1
detection	130	186	191	203	609	794	1
of	195	186	209	203	609	794	1
small	213	186	247	203	609	794	1
RNAs	251	186	288	203	609	794	1
in	292	186	304	203	609	794	1
Vero	308	186	339	203	609	794	1
line	344	186	368	203	609	794	1
cells	372	186	401	203	609	794	1
Natalia	88	216	123	230	609	794	1
Campillo-Pedroza	126	216	210	230	609	794	1
*	210	216	214	224	609	794	1
,	214	216	217	230	609	794	1
Juan	220	216	241	230	609	794	1
Pablo	244	216	271	230	609	794	1
Franco	274	216	306	230	609	794	1
Salazar	309	216	345	230	609	794	1
*	345	216	349	224	609	794	1
,	349	216	352	230	609	794	1
Juan	355	216	376	230	609	794	1
Carlos	379	216	410	230	609	794	1
Gallego-	413	216	452	230	609	794	1
Gómez	455	216	488	230	609	794	1
*	488	216	492	224	609	794	1
DOI:	88	246	107	257	609	794	1
10.15446/rev.colomb.biote.v17n2.48522	110	246	268	257	609	794	1
Palabras	88	390	121	400	609	794	1
clave:	123	390	146	400	609	794	1
1-ethyl-3-(-3-dimethylaminopropyl)	148	389	278	400	609	794	1
carboniimide),	280	389	335	400	609	794	1
Digoxigenina,	337	389	390	400	609	794	1
Northern	392	390	426	400	609	794	1
blot	428	390	443	400	609	794	1
no	445	389	455	400	609	794	1
radioactivo,	457	389	502	400	609	794	1
Sondas	504	389	532	400	609	794	1
LNA,	534	389	553	400	609	794	1
sRNAs.	88	400	115	411	609	794	1
Key	88	527	102	537	609	794	1
words:	106	527	132	537	609	794	1
1-ethyl-3-(-3-dimethylaminopropyl)	136	527	266	537	609	794	1
carboniimide),	270	527	325	537	609	794	1
Digoxigenine,	329	527	382	537	609	794	1
Northern	386	527	420	537	609	794	1
blot	423	527	438	537	609	794	1
non-radioactive,	442	527	503	537	609	794	1
LNA	507	527	524	537	609	794	1
probe,	528	527	553	537	609	794	1
sRNAs.	88	538	115	548	609	794	1
Recibido:	88	560	124	571	609	794	1
enero	126	560	147	571	609	794	1
21	149	560	159	571	609	794	1
de	161	560	170	571	609	794	1
2015	172	560	192	571	609	794	1
Aprobado:	228	560	270	571	609	794	1
octubre	272	560	301	571	609	794	1
23	303	560	313	571	609	794	1
de	315	560	324	571	609	794	1
2015	326	560	346	571	609	794	1
Introducción	65	585	125	597	609	794	1
Los	65	604	80	615	609	794	1
pequeños	82	604	124	615	609	794	1
RNA	127	604	147	615	609	794	1
no	149	604	160	615	609	794	1
codificantes	163	604	214	615	609	794	1
(sRNAs,	216	604	250	615	609	794	1
small	252	604	274	615	609	794	1
non-	276	604	295	615	609	794	1
coding	65	617	94	628	609	794	1
RNAs)	97	617	124	628	609	794	1
son	126	617	141	628	609	794	1
secuencias	144	617	190	628	609	794	1
involucradas	192	617	245	628	609	794	1
en	248	617	259	628	609	794	1
diversas	261	617	295	628	609	794	1
funciones	65	630	106	641	609	794	1
celulares,	109	630	149	641	609	794	1
tanto	152	630	174	641	609	794	1
constitutivas	177	630	229	641	609	794	1
como	232	630	257	641	609	794	1
de	260	630	271	641	609	794	1
regu-	274	630	295	641	609	794	1
lación.	65	643	93	654	609	794	1
Desde	97	643	124	654	609	794	1
el	128	643	135	654	609	794	1
descubrimiento	139	643	205	654	609	794	1
del	209	643	222	654	609	794	1
primer	226	643	254	654	609	794	1
RNA	258	643	278	654	609	794	1
pe-	282	643	295	654	609	794	1
queño,	65	656	95	667	609	794	1
lin-4	98	656	115	667	609	794	1
(Lee	118	656	136	667	609	794	1
et	139	656	147	667	609	794	1
al.,	150	656	162	667	609	794	1
1993;	164	656	189	667	609	794	1
Wightman	192	656	236	667	609	794	1
et	242	656	250	667	609	794	1
al.,	253	656	264	667	609	794	1
1993),	267	656	295	667	609	794	1
*	65	693	69	702	609	794	1
la	323	587	330	598	609	794	1
lista	333	587	350	598	609	794	1
de	353	587	364	598	609	794	1
pequeños	367	587	409	598	609	794	1
RNAs	412	587	436	598	609	794	1
no	440	587	451	598	609	794	1
codificantes	454	587	505	598	609	794	1
ha	508	587	518	598	609	794	1
aumen-	521	587	553	598	609	794	1
tado,	323	598	345	610	609	794	1
reportándose	347	598	404	610	609	794	1
la	407	598	414	610	609	794	1
participación	417	598	472	610	609	794	1
de	475	598	485	610	609	794	1
alguno	488	598	517	610	609	794	1
de	520	598	531	610	609	794	1
ellos	534	598	553	610	609	794	1
en	323	610	334	621	609	794	1
procesos	339	610	377	621	609	794	1
biológicos	382	610	426	621	609	794	1
como	431	610	455	621	609	794	1
corte	460	610	482	621	609	794	1
y	488	610	492	621	609	794	1
empalme	497	610	537	621	609	794	1
de	542	610	553	621	609	794	1
exones,	323	621	356	633	609	794	1
traducción	362	621	407	633	609	794	1
genética,	414	621	452	633	609	794	1
desarrollo,	458	621	502	633	609	794	1
diferencia-	509	621	553	633	609	794	1
ción,	323	633	344	644	609	794	1
muerte	347	633	377	644	609	794	1
celular,	380	633	410	644	609	794	1
control	413	633	443	644	609	794	1
metabólico,	446	633	496	644	609	794	1
defensa	499	633	532	644	609	794	1
anti-	535	633	553	644	609	794	1
viral,	323	644	343	655	609	794	1
regulación	346	644	390	655	609	794	1
de	394	644	404	655	609	794	1
expresión	407	644	449	655	609	794	1
genética	452	644	488	655	609	794	1
transcripcional	491	644	553	655	609	794	1
y	323	656	328	667	609	794	1
post-transcripcional	332	656	415	667	609	794	1
(Gomes	419	656	453	667	609	794	1
et	457	656	465	667	609	794	1
al.,	469	656	480	667	609	794	1
2013;	484	656	509	667	609	794	1
van	513	656	529	667	609	794	1
Wol-	533	656	553	667	609	794	1
Grupo	88	693	110	702	609	794	1
de	113	693	121	702	609	794	1
Medicina	125	693	156	702	609	794	1
Molecular	159	693	193	702	609	794	1
y	197	693	200	702	609	794	1
de	203	693	211	702	609	794	1
Translación.	215	693	256	702	609	794	1
Faculta	259	693	284	702	609	794	1
de	287	693	295	702	609	794	1
Medicina.	299	693	332	702	609	794	1
Universidad	336	693	375	702	609	794	1
de	379	693	387	702	609	794	1
Antioquia,	390	693	425	702	609	794	1
Colombia.	429	693	464	702	609	794	1
naticampillo@gmail.com,	468	693	553	702	609	794	1
jp.salazar04@gmail.com,	88	702	171	711	609	794	1
juanc.gallegomez@gmail.com.	173	702	274	711	609	794	1
Estandarización	66	730	126	741	609	794	1
de	128	730	137	741	609	794	1
un	139	730	149	741	609	794	1
protocolo	151	730	188	741	609	794	1
blot	242	731	255	741	609	794	1
2015	255	734	275	744	609	794	1
no	257	730	267	741	609	794	1
radioactivo	269	730	311	741	609	794	1
Rev.	65	734	81	744	609	794	1
Colomb.	83	734	115	744	609	794	1
Biotecnol.	118	734	156	744	609	794	1
Vol.	158	734	172	744	609	794	1
XVII	175	734	189	744	609	794	1
para	191	730	208	741	609	794	1
No.	192	734	205	744	609	794	1
2	208	734	212	744	609	794	1
Northern	210	731	240	741	609	794	1
Diciembre	215	734	253	744	609	794	1
123-128	279	734	319	744	609	794	1
123	538	729	554	741	609	794	1
123	541	733	557	745	609	794	1
fswinkel	57	57	91	68	609	794	2
&	94	57	101	68	609	794	2
Ketting,	104	57	137	68	609	794	2
2010;	140	57	165	68	609	794	2
Winter	168	57	197	68	609	794	2
et	201	57	208	68	609	794	2
al.,	212	57	223	68	609	794	2
2009).	227	57	254	68	609	794	2
La	258	57	267	68	609	794	2
fun-	271	57	286	68	609	794	2
ción	57	68	75	79	609	794	2
para	78	68	97	79	609	794	2
muchos	100	68	133	79	609	794	2
de	137	68	147	79	609	794	2
estos	150	68	172	79	609	794	2
sRNAs	175	68	203	79	609	794	2
aún	206	68	222	79	609	794	2
se	225	68	234	79	609	794	2
desconoce,	238	68	286	79	609	794	2
por	57	79	71	91	609	794	2
lo	75	79	83	91	609	794	2
cual	86	79	104	91	609	794	2
el	107	79	114	91	609	794	2
interés	118	79	146	91	609	794	2
y	150	79	154	91	609	794	2
la	158	79	165	91	609	794	2
necesidad	169	79	211	91	609	794	2
de	215	79	226	91	609	794	2
su	229	79	238	91	609	794	2
detección,	242	79	286	91	609	794	2
caracterización	57	90	121	102	609	794	2
y	124	90	129	102	609	794	2
validación	132	90	175	102	609	794	2
funcional	177	90	216	102	609	794	2
continúan.	219	90	264	102	609	794	2
un	315	57	325	68	609	794	2
RNA	329	58	347	68	609	794	2
pequeño,	350	57	390	68	609	794	2
así	394	57	405	68	609	794	2
como	408	57	432	68	609	794	2
la	435	57	443	68	609	794	2
explicación	446	57	494	68	609	794	2
y	497	57	502	68	609	794	2
discusión	505	57	544	68	609	794	2
de	315	68	325	79	609	794	2
los	331	68	343	79	609	794	2
fundamentos	348	68	403	79	609	794	2
teóricos	409	68	443	79	609	794	2
de	448	68	459	79	609	794	2
las	464	68	475	79	609	794	2
modificaciones	480	68	544	79	609	794	2
planteadas	315	79	360	90	609	794	2
son	363	79	378	90	609	794	2
el	381	79	388	90	609	794	2
objetivo	391	79	426	90	609	794	2
de	428	79	439	90	609	794	2
este	442	79	459	90	609	794	2
trabajo.	462	79	494	90	609	794	2
Las	57	107	70	118	609	794	2
metodologías	74	107	132	118	609	794	2
utilizadas	136	107	175	118	609	794	2
para	179	107	198	118	609	794	2
la	202	107	209	118	609	794	2
detección	213	107	256	118	609	794	2
de	260	107	270	118	609	794	2
los	274	107	286	118	609	794	2
sRNAs,	57	118	87	129	609	794	2
enfrentan	91	118	132	129	609	794	2
grandes	136	118	169	129	609	794	2
desafíos	173	118	207	129	609	794	2
impuestos	211	118	254	129	609	794	2
por	258	118	273	129	609	794	2
su	277	118	286	129	609	794	2
tamaño	57	129	89	140	609	794	2
(≤200	93	129	118	140	609	794	2
nucleótidos)	122	129	174	140	609	794	2
y	179	129	183	140	609	794	2
el	187	129	195	140	609	794	2
bajo	199	129	217	140	609	794	2
nivel	221	129	241	140	609	794	2
de	245	129	256	140	609	794	2
expre-	260	129	286	140	609	794	2
sión	57	140	74	151	609	794	2
de	77	140	88	151	609	794	2
los	91	140	103	151	609	794	2
pequeños	106	140	148	151	609	794	2
RNAs,	151	140	177	151	609	794	2
que	180	140	196	151	609	794	2
en	199	140	210	151	609	794	2
algunos	213	140	246	151	609	794	2
casos	249	140	272	151	609	794	2
no	275	140	286	151	609	794	2
supera	57	151	85	163	609	794	2
el	88	151	96	163	609	794	2
umbral	99	151	129	163	609	794	2
de	132	151	143	163	609	794	2
detección	146	151	188	163	609	794	2
de	191	151	202	163	609	794	2
las	206	151	217	163	609	794	2
técnicas	220	151	254	163	609	794	2
usadas	258	151	286	163	609	794	2
hasta	57	162	79	174	609	794	2
el	82	162	90	174	609	794	2
momento.	93	162	137	174	609	794	2
Por	140	162	155	174	609	794	2
las	158	162	169	174	609	794	2
limitaciones	173	162	223	174	609	794	2
anteriormente	226	162	286	174	609	794	2
mencionadas,	57	173	115	185	609	794	2
los	119	173	131	185	609	794	2
métodos	135	173	172	185	609	794	2
más	176	173	193	185	609	794	2
utilizados	196	173	237	185	609	794	2
para	240	173	259	185	609	794	2
la	263	173	270	185	609	794	2
de-	273	173	286	185	609	794	2
tección	57	184	88	196	609	794	2
de	90	184	101	196	609	794	2
sRNAs	103	184	131	196	609	794	2
(RT-qPCR	134	184	174	196	609	794	2
y	176	184	181	196	609	794	2
Northern	183	184	221	196	609	794	2
blot)	223	184	243	196	609	794	2
deben	245	184	272	196	609	794	2
ser	274	184	286	196	609	794	2
constantemente	57	195	125	207	609	794	2
optimizados	128	195	180	207	609	794	2
para	183	195	202	207	609	794	2
mejorar	205	195	238	207	609	794	2
la	241	195	248	207	609	794	2
sensibili-	251	195	286	207	609	794	2
dad,	57	206	75	218	609	794	2
especificidad	78	206	133	218	609	794	2
de	136	206	147	218	609	794	2
detección	149	206	191	218	609	794	2
y	194	206	199	218	609	794	2
cuantificación.	202	206	263	218	609	794	2
Materiales	315	103	364	116	609	794	2
y	368	103	372	116	609	794	2
Métodos	376	103	418	116	609	794	2
El	57	223	64	235	609	794	2
Northern	66	223	104	235	609	794	2
blot	106	223	122	235	609	794	2
es	125	223	134	235	609	794	2
una	136	223	152	235	609	794	2
metodología	154	223	208	235	609	794	2
directa	210	223	239	235	609	794	2
que	241	223	257	235	609	794	2
permi-	260	223	286	235	609	794	2
te	57	234	65	246	609	794	2
la	68	234	75	246	609	794	2
detección	77	234	119	246	609	794	2
de	122	234	133	246	609	794	2
los	136	234	148	246	609	794	2
pequeños	150	234	192	246	609	794	2
RNAs,	195	234	222	246	609	794	2
sus	224	234	238	246	609	794	2
secuencias	240	234	286	246	609	794	2
precursoras	57	245	106	257	609	794	2
o	109	245	115	257	609	794	2
intermediarias,	118	245	180	257	609	794	2
evaluar	183	245	214	257	609	794	2
sus	217	245	230	257	609	794	2
propiedades	234	245	286	257	609	794	2
de	57	256	67	268	609	794	2
expresión	71	256	113	268	609	794	2
y	117	256	121	268	609	794	2
determinar	125	256	171	268	609	794	2
su	175	256	185	268	609	794	2
tamaño	189	256	221	268	609	794	2
Wang	225	256	250	268	609	794	2
&	254	256	261	268	609	794	2
Yang	265	256	286	268	609	794	2
(2010)	57	267	85	279	609	794	2
razón	90	267	114	279	609	794	2
por	118	267	133	279	609	794	2
la	138	267	145	279	609	794	2
cual	150	267	167	279	609	794	2
sigue	172	267	194	279	609	794	2
siendo	198	267	226	279	609	794	2
ampliamente	231	267	286	279	609	794	2
usado.	57	279	85	290	609	794	2
El	89	279	96	290	609	794	2
proceso	100	279	134	290	609	794	2
general	138	279	169	290	609	794	2
del	173	279	186	290	609	794	2
Northern	190	279	228	290	609	794	2
blot	232	279	248	290	609	794	2
consiste	252	279	286	290	609	794	2
en	57	290	67	301	609	794	2
extraer	71	290	101	301	609	794	2
RNA	105	290	125	301	609	794	2
total,	129	290	150	301	609	794	2
separarlo	154	290	193	301	609	794	2
por	198	290	212	301	609	794	2
tamaño	216	290	248	301	609	794	2
median-	253	290	286	301	609	794	2
te	57	301	65	312	609	794	2
electroforesis	69	301	125	312	609	794	2
y	130	301	134	312	609	794	2
transferir	139	301	176	312	609	794	2
e	180	301	185	312	609	794	2
inmovilizar	190	301	236	312	609	794	2
en	240	301	251	312	609	794	2
una	255	301	271	312	609	794	2
su-	275	301	286	312	609	794	2
perficie	57	312	88	323	609	794	2
sólida	92	312	117	323	609	794	2
(membrana).	121	312	176	323	609	794	2
La	180	312	190	323	609	794	2
sonda	194	312	219	323	609	794	2
con	224	312	240	323	609	794	2
secuencia	244	312	286	323	609	794	2
complementaria	57	323	126	334	609	794	2
al	130	323	137	334	609	794	2
RNA	141	323	162	334	609	794	2
de	166	323	177	334	609	794	2
interés,	181	323	212	334	609	794	2
es	216	323	225	334	609	794	2
marcada	229	323	266	334	609	794	2
con	270	323	286	334	609	794	2
métodos	57	334	94	345	609	794	2
radioactivos	98	334	149	345	609	794	2
o	153	334	159	345	609	794	2
no	163	334	174	345	609	794	2
radioactivos,	178	334	232	345	609	794	2
luego	236	334	259	345	609	794	2
se	263	334	272	345	609	794	2
in-	276	334	286	345	609	794	2
corpora	57	345	90	356	609	794	2
en	94	345	104	356	609	794	2
la	108	345	115	356	609	794	2
membrana	118	345	164	356	609	794	2
que	168	345	184	356	609	794	2
contiene	187	345	224	356	609	794	2
el	228	345	235	356	609	794	2
RNA	239	345	259	356	609	794	2
inmo-	262	345	286	356	609	794	2
vilizado	57	356	89	367	609	794	2
y	93	356	98	367	609	794	2
finalmente	102	356	147	367	609	794	2
la	151	356	158	367	609	794	2
hibridación	162	356	209	367	609	794	2
con	213	356	229	367	609	794	2
la	233	356	240	367	609	794	2
secuencia	244	356	286	367	609	794	2
complementaria	57	367	126	378	609	794	2
es	128	367	138	378	609	794	2
detectada.	140	367	185	378	609	794	2
Para	57	384	75	395	609	794	2
la	80	384	87	395	609	794	2
metodología	91	384	144	395	609	794	2
Northern	149	384	186	395	609	794	2
blot	191	384	207	395	609	794	2
se	211	384	220	395	609	794	2
han	224	384	240	395	609	794	2
publicado	244	384	286	395	609	794	2
diferentes	57	395	98	406	609	794	2
protocolos	102	395	147	406	609	794	2
que	150	395	167	406	609	794	2
varían	170	395	195	406	609	794	2
principalmente	199	395	262	406	609	794	2
en	265	395	276	406	609	794	2
el	279	395	286	406	609	794	2
diseño	57	406	85	417	609	794	2
y	88	406	93	417	609	794	2
marcaje	96	406	129	417	609	794	2
de	132	406	143	417	609	794	2
la	146	406	153	417	609	794	2
sonda,	156	406	184	417	609	794	2
donde	187	406	215	417	609	794	2
comúnmente	218	406	274	417	609	794	2
se	277	406	286	417	609	794	2
utilizan	57	417	87	428	609	794	2
sondas	91	417	120	428	609	794	2
de	124	417	135	428	609	794	2
DNA	139	417	161	428	609	794	2
marcadas	164	417	205	428	609	794	2
con	209	417	225	428	609	794	2
fósforo	229	417	259	428	609	794	2
radio-	262	417	286	428	609	794	2
activo	57	428	82	439	609	794	2
(	86	428	89	439	609	794	2
32	89	428	96	435	609	794	2
P)	96	428	104	439	609	794	2
(Gurman	109	428	147	439	609	794	2
S	151	428	156	439	609	794	2
Pall	160	428	175	439	609	794	2
&	179	428	186	439	609	794	2
Hamilton,	190	428	232	439	609	794	2
2008;	236	428	260	439	609	794	2
Vára-	265	428	286	439	609	794	2
llyay	57	439	76	450	609	794	2
et	79	439	87	450	609	794	2
al.,	90	439	101	450	609	794	2
2008).	105	439	132	450	609	794	2
Un	135	439	148	450	609	794	2
nuevo	152	439	178	450	609	794	2
protocolo	181	439	223	450	609	794	2
para	226	439	245	450	609	794	2
Northern	248	439	286	450	609	794	2
blot	57	450	73	461	609	794	2
no	79	450	90	461	609	794	2
radiactivo	96	450	138	461	609	794	2
denominado	143	450	197	461	609	794	2
LED	203	451	219	461	609	794	2
(LNA-EDC-DIG)	224	451	284	461	609	794	2
,	284	450	286	461	609	794	2
fue	57	461	70	473	609	794	2
reportado	74	461	116	473	609	794	2
Kim	120	461	136	473	609	794	2
et	140	461	148	473	609	794	2
al.	151	461	161	473	609	794	2
(2010),	164	461	195	473	609	794	2
integra	199	461	228	473	609	794	2
tres	232	461	247	473	609	794	2
metodo-	251	461	286	473	609	794	2
logías	57	472	81	484	609	794	2
desarrolladas	85	472	140	484	609	794	2
separadamente,	144	472	212	484	609	794	2
que	215	472	232	484	609	794	2
modifican	236	472	278	484	609	794	2
a	281	472	286	484	609	794	2
su	57	483	66	495	609	794	2
vez	69	483	84	495	609	794	2
tres	88	483	103	495	609	794	2
aspectos	107	483	144	495	609	794	2
del	147	483	160	495	609	794	2
proceso	163	483	198	495	609	794	2
determinantes	201	483	262	495	609	794	2
de	265	483	276	495	609	794	2
la	279	483	286	495	609	794	2
especificidad	57	494	112	506	609	794	2
y	115	494	120	506	609	794	2
sensibilidad	123	494	172	506	609	794	2
del	175	494	188	506	609	794	2
Northern	191	494	229	506	609	794	2
blot.	232	494	251	506	609	794	2
Las	254	494	267	506	609	794	2
mo-	270	494	286	506	609	794	2
dificaciones	57	505	107	517	609	794	2
consisten	111	505	151	517	609	794	2
básicamente	155	505	209	517	609	794	2
en	213	505	224	517	609	794	2
remplazar	228	505	271	517	609	794	2
las	275	505	286	517	609	794	2
sondas	57	516	86	528	609	794	2
de	90	516	101	528	609	794	2
oligonucleótidos	104	516	175	528	609	794	2
de	178	516	189	528	609	794	2
DNA	193	517	213	528	609	794	2
,	213	516	215	528	609	794	2
por	219	516	233	528	609	794	2
sondas	237	516	266	528	609	794	2
que	270	516	286	528	609	794	2
contienen	57	528	99	539	609	794	2
ácidos	103	528	131	539	609	794	2
nucleicos	135	528	175	539	609	794	2
bloqueados	179	528	229	539	609	794	2
o	233	528	239	539	609	794	2
no	243	528	254	539	609	794	2
accesi-	258	528	286	539	609	794	2
bles	57	539	74	550	609	794	2
(Locked	76	539	110	550	609	794	2
Nucleic	113	539	145	550	609	794	2
Acid,	148	539	169	550	609	794	2
LNA	172	540	189	550	609	794	2
).	189	539	194	550	609	794	2
La	197	539	207	550	609	794	2
inmovilización	209	539	271	550	609	794	2
del	273	539	286	550	609	794	2
RNA	57	551	75	561	609	794	2
en	78	550	89	561	609	794	2
la	92	550	99	561	609	794	2
membrana,	103	550	151	561	609	794	2
que	154	550	171	561	609	794	2
normalmente	174	550	231	561	609	794	2
se	234	550	243	561	609	794	2
hace	247	550	267	561	609	794	2
con	270	550	286	561	609	794	2
luz	57	561	69	572	609	794	2
ultravioleta	72	561	119	572	609	794	2
(	122	561	125	572	609	794	2
UV	125	562	137	572	609	794	2
),	137	561	143	572	609	794	2
es	145	561	154	572	609	794	2
remplazado	157	561	208	572	609	794	2
por	210	561	225	572	609	794	2
el	228	561	235	572	609	794	2
uso	238	561	253	572	609	794	2
de	256	561	266	572	609	794	2
EDC	269	562	286	572	609	794	2
(1-Ethyl-3-(-3-dimethylaminopropyl)	57	572	204	583	609	794	2
carboniimide)).	222	572	286	583	609	794	2
Adicionalmente,	57	583	126	594	609	794	2
el	130	583	137	594	609	794	2
uso	141	583	156	594	609	794	2
de	160	583	170	594	609	794	2
radioisótopos	174	583	232	594	609	794	2
(	235	583	238	594	609	794	2
32	238	583	245	590	609	794	2
P),	245	583	256	594	609	794	2
el	260	583	267	594	609	794	2
mé-	271	583	286	594	609	794	2
todo	57	594	77	605	609	794	2
más	79	594	96	605	609	794	2
común	99	594	129	605	609	794	2
de	131	594	142	605	609	794	2
marcaje	145	594	178	605	609	794	2
de	181	594	192	605	609	794	2
sondas,	194	594	226	605	609	794	2
con	229	594	245	605	609	794	2
el	247	594	255	605	609	794	2
cual	257	594	275	605	609	794	2
se	277	594	286	605	609	794	2
deben	57	605	84	616	609	794	2
asumir	87	605	115	616	609	794	2
todos	118	605	142	616	609	794	2
los	145	605	157	616	609	794	2
riegos	160	605	185	616	609	794	2
de	188	605	199	616	609	794	2
la	202	605	209	616	609	794	2
radioactividad,	212	605	274	616	609	794	2
es	277	605	286	616	609	794	2
sustituido	57	616	97	627	609	794	2
por	100	616	115	627	609	794	2
el	117	616	125	627	609	794	2
uso	127	616	143	627	609	794	2
de	145	616	156	627	609	794	2
Digoxigenina	159	616	215	627	609	794	2
(	218	616	221	627	609	794	2
DG	221	617	235	627	609	794	2
).	235	616	240	627	609	794	2
Este	57	633	74	644	609	794	2
nuevo	77	633	104	644	609	794	2
protocolo	107	633	149	644	609	794	2
aumenta	152	633	189	644	609	794	2
la	193	633	200	644	609	794	2
sensibilidad	203	633	253	644	609	794	2
y	256	633	261	644	609	794	2
espe-	264	633	286	644	609	794	2
cificidad	57	644	92	655	609	794	2
en	95	644	106	655	609	794	2
la	109	644	116	655	609	794	2
detección	119	644	161	655	609	794	2
de	164	644	175	655	609	794	2
pequeños	178	644	220	655	609	794	2
RNAs	223	644	247	655	609	794	2
por	250	644	265	655	609	794	2
Nor-	268	644	286	655	609	794	2
thern	57	655	78	666	609	794	2
blot,	81	655	100	666	609	794	2
por	103	655	118	666	609	794	2
lo	121	655	128	666	609	794	2
que	131	655	148	666	609	794	2
su	151	655	160	666	609	794	2
uso	163	655	178	666	609	794	2
e	181	655	186	666	609	794	2
implementación	189	655	258	666	609	794	2
en	261	655	271	666	609	794	2
los	274	655	286	666	609	794	2
estudios	57	666	92	677	609	794	2
de	94	666	105	677	609	794	2
detección,	108	666	152	677	609	794	2
caracterización	154	666	219	677	609	794	2
y	222	666	226	677	609	794	2
funcionalidad	229	666	286	677	609	794	2
de	57	677	67	688	609	794	2
nuevos	70	677	100	688	609	794	2
sRNAs	103	677	131	688	609	794	2
será	133	677	151	688	609	794	2
de	153	677	164	688	609	794	2
gran	166	677	185	688	609	794	2
utilidad.	188	677	221	688	609	794	2
Por	224	677	238	688	609	794	2
lo	241	677	248	688	609	794	2
anterior,	251	677	286	688	609	794	2
la	57	688	64	699	609	794	2
descripción	67	688	116	699	609	794	2
de	119	688	130	699	609	794	2
la	133	688	140	699	609	794	2
implementación	143	688	211	699	609	794	2
y	214	688	219	699	609	794	2
modificaciones	222	688	286	699	609	794	2
realizadas	57	699	99	711	609	794	2
de	101	699	112	711	609	794	2
este	115	699	132	711	609	794	2
protocolo	135	699	177	711	609	794	2
usado	179	699	205	711	609	794	2
en	208	699	218	711	609	794	2
la	221	699	228	711	609	794	2
detección	231	699	273	711	609	794	2
de	276	699	286	711	609	794	2
124	57	729	73	741	609	794	2
Extracción	315	129	364	143	609	794	2
de	367	129	378	143	609	794	2
RNA	381	129	405	143	609	794	2
total	408	129	430	143	609	794	2
a	433	129	439	143	609	794	2
partir	442	129	469	143	609	794	2
de	472	129	483	143	609	794	2
células	486	130	515	143	609	794	2
Vero	518	130	538	143	609	794	2
Todas	315	147	340	159	609	794	2
las	347	147	358	159	609	794	2
extracciones	365	147	418	159	609	794	2
de	425	147	436	159	609	794	2
RNA	443	148	461	159	609	794	2
total	468	147	487	159	609	794	2
se	494	147	503	159	609	794	2
hicieron	510	147	544	159	609	794	2
con	315	158	331	170	609	794	2
TRI-reagent	336	158	384	170	609	794	2
(Sigma™),	389	158	432	170	609	794	2
de	437	158	448	170	609	794	2
manera	453	158	485	170	609	794	2
breve	490	158	514	170	609	794	2
4x10	520	158	541	170	609	794	2
6	541	159	544	165	609	794	2
células	315	169	343	181	609	794	2
Vero	346	169	367	181	609	794	2
fueron	370	169	398	181	609	794	2
lavadas	401	169	432	181	609	794	2
con	436	169	452	181	609	794	2
PBS	455	169	471	181	609	794	2
1X	474	169	486	181	609	794	2
para	489	169	507	181	609	794	2
eliminar	510	169	544	181	609	794	2
proteínas,	315	181	356	192	609	794	2
se	362	181	371	192	609	794	2
re-suspendieron	377	181	444	192	609	794	2
en	450	181	460	192	609	794	2
1ml	466	181	482	192	609	794	2
de	487	181	498	192	609	794	2
Trizol,	504	181	530	192	609	794	2
se	535	181	544	192	609	794	2
incubaron	315	192	358	203	609	794	2
3	362	192	368	203	609	794	2
minutos	373	192	407	203	609	794	2
(min)	411	192	433	203	609	794	2
a	438	192	443	203	609	794	2
temperatura	448	192	500	203	609	794	2
ambiente	504	192	544	203	609	794	2
(	315	203	318	214	609	794	2
TA	318	204	328	214	609	794	2
),	328	203	334	214	609	794	2
se	337	203	346	214	609	794	2
adicionó	349	203	386	214	609	794	2
200µl	389	203	413	214	609	794	2
de	416	203	427	214	609	794	2
Cloroformo	430	203	479	214	609	794	2
(Merck™)	482	203	524	214	609	794	2
y	527	203	532	214	609	794	2
se	535	203	544	214	609	794	2
centrifugó	315	214	358	225	609	794	2
a	361	214	366	225	609	794	2
5000	370	214	392	225	609	794	2
revoluciones	395	214	449	225	609	794	2
por	453	214	467	225	609	794	2
minuto	471	214	501	225	609	794	2
(rpm)	504	214	528	225	609	794	2
du-	531	214	544	225	609	794	2
rante	315	225	336	236	609	794	2
15	341	225	352	236	609	794	2
min,	356	225	374	236	609	794	2
se	378	225	388	236	609	794	2
tomó	392	225	414	236	609	794	2
la	419	225	426	236	609	794	2
fase	430	225	447	236	609	794	2
acuosa	451	225	481	236	609	794	2
y	485	225	490	236	609	794	2
se	494	225	503	236	609	794	2
adicionó	507	225	544	236	609	794	2
Isopropanol	315	236	365	247	609	794	2
frío,	370	236	386	247	609	794	2
se	390	236	399	247	609	794	2
incubó	403	236	433	247	609	794	2
durante	437	236	470	247	609	794	2
10	474	236	485	247	609	794	2
min	489	236	505	247	609	794	2
a	509	236	514	247	609	794	2
-20°C,	518	236	544	247	609	794	2
nuevamente	315	247	367	258	609	794	2
se	370	247	379	258	609	794	2
centrifugó	382	247	425	258	609	794	2
a	427	247	432	258	609	794	2
5000	435	247	457	258	609	794	2
rpm	460	247	477	258	609	794	2
durante	479	247	512	258	609	794	2
10	515	247	526	258	609	794	2
min	528	247	544	258	609	794	2
usando	315	258	346	269	609	794	2
microcentrífuga	349	258	416	269	609	794	2
(Eppendorf™,	419	258	477	269	609	794	2
5810	480	258	503	269	609	794	2
R).	506	258	517	269	609	794	2
El	521	258	528	269	609	794	2
pe-	531	258	544	269	609	794	2
llet	315	269	327	280	609	794	2
se	330	269	340	280	609	794	2
lavó	343	269	360	280	609	794	2
con	364	269	380	280	609	794	2
1ml	383	269	399	280	609	794	2
de	402	269	413	280	609	794	2
Etanol	416	269	442	280	609	794	2
al	445	269	452	280	609	794	2
75%	456	269	475	280	609	794	2
con	479	269	495	280	609	794	2
vortex	498	269	524	280	609	794	2
sua-	528	269	544	280	609	794	2
ve,	315	280	327	291	609	794	2
se	331	280	340	291	609	794	2
centrifugó	344	280	387	291	609	794	2
nuevamente	391	280	444	291	609	794	2
a	448	280	453	291	609	794	2
10.700	457	280	487	291	609	794	2
rpm	490	280	508	291	609	794	2
durante	512	280	544	291	609	794	2
5	315	291	320	302	609	794	2
min,	324	291	342	302	609	794	2
se	346	291	355	302	609	794	2
dejó	358	291	377	302	609	794	2
secar	381	291	403	302	609	794	2
el	406	291	414	302	609	794	2
etanol	417	291	444	302	609	794	2
a	447	291	452	302	609	794	2
TA	456	291	467	302	609	794	2
y	471	291	476	302	609	794	2
posteriormente	479	291	544	302	609	794	2
se	315	302	324	313	609	794	2
re-suspendió	327	302	380	313	609	794	2
el	383	302	390	313	609	794	2
pellet	393	302	416	313	609	794	2
en	419	302	430	313	609	794	2
100µl	433	302	457	313	609	794	2
de	459	302	470	313	609	794	2
agua	473	302	493	313	609	794	2
tratada	496	302	525	313	609	794	2
con	528	302	544	313	609	794	2
DEPC	315	314	337	324	609	794	2
.	337	313	339	324	609	794	2
Con	343	313	361	324	609	794	2
NanoDrop	365	313	411	324	609	794	2
2000	415	313	437	324	609	794	2
(Thermo	441	313	477	324	609	794	2
Scientific™)	481	313	531	324	609	794	2
se	535	313	544	324	609	794	2
determinó	315	324	358	335	609	794	2
pureza	361	324	390	335	609	794	2
y	393	324	398	335	609	794	2
concentración	401	324	462	335	609	794	2
del	464	324	477	335	609	794	2
RNA	480	324	500	335	609	794	2
extraído.	503	324	540	335	609	794	2
Northern	315	351	355	364	609	794	2
blot	357	351	374	364	609	794	2
no	377	351	387	364	609	794	2
radioactivo	390	351	438	364	609	794	2
El	315	368	322	379	609	794	2
RNA	326	368	346	379	609	794	2
extraído,	350	368	387	379	609	794	2
fue	391	368	405	379	609	794	2
evaluado	409	368	448	379	609	794	2
por	452	368	466	379	609	794	2
Northern	471	368	508	379	609	794	2
blot	513	368	529	379	609	794	2
no	533	368	544	379	609	794	2
radioactivo.	315	379	364	390	609	794	2
Para	368	379	387	390	609	794	2
esto	391	379	409	390	609	794	2
se	413	379	422	390	609	794	2
modificó,	426	379	465	390	609	794	2
implementó	469	379	520	390	609	794	2
y	524	379	529	390	609	794	2
es-	533	379	544	390	609	794	2
tandarizó	315	390	355	401	609	794	2
el	360	390	368	401	609	794	2
protocolo	373	390	415	401	609	794	2
para	421	390	439	401	609	794	2
detectar	445	390	480	401	609	794	2
miRNAs,	485	390	522	401	609	794	2
pre-	528	390	544	401	609	794	2
viamente	315	401	354	412	609	794	2
descrito	358	401	392	412	609	794	2
Kim	396	401	413	412	609	794	2
et	417	401	425	412	609	794	2
al.	429	401	438	412	609	794	2
(2010),	443	401	473	412	609	794	2
el	477	401	485	412	609	794	2
protocolo	489	401	531	412	609	794	2
se	535	401	544	412	609	794	2
desarrolló	315	412	357	423	609	794	2
en	359	412	369	423	609	794	2
4	372	412	377	423	609	794	2
pasos	379	412	403	423	609	794	2
(figura	406	412	433	423	609	794	2
1):	435	412	446	423	609	794	2
1)	448	412	457	424	609	794	2
Separación	459	412	507	423	609	794	2
del	509	412	522	423	609	794	2
RNA	524	412	544	423	609	794	2
en	315	423	325	435	609	794	2
gel	329	423	342	435	609	794	2
de	346	423	357	435	609	794	2
poliacrilamida,	361	423	422	435	609	794	2
2)	426	423	435	435	609	794	2
Transferencia	439	423	496	435	609	794	2
e	500	423	505	435	609	794	2
inmovili-	509	423	544	435	609	794	2
zación	315	434	343	446	609	794	2
del	347	434	360	446	609	794	2
RNA,	364	434	386	446	609	794	2
3)	390	434	399	446	609	794	2
Pre-hibridación	403	434	467	446	609	794	2
e	471	434	476	446	609	794	2
Hibridación	480	434	530	446	609	794	2
de	534	434	544	446	609	794	2
la	315	445	322	457	609	794	2
sonda,	327	445	355	457	609	794	2
4)	360	445	369	457	609	794	2
Detección	374	445	418	457	609	794	2
del	423	445	436	457	609	794	2
RNA	441	446	460	456	609	794	2
.	460	445	462	457	609	794	2
Para	467	445	486	457	609	794	2
implementar	491	445	544	457	609	794	2
el	315	456	322	468	609	794	2
protocolo	326	456	368	468	609	794	2
se	372	456	381	468	609	794	2
usó	386	456	401	468	609	794	2
una	405	456	421	468	609	794	2
sonda	425	456	451	468	609	794	2
específica	455	456	497	468	609	794	2
y	501	456	506	468	609	794	2
comple-	510	456	544	468	609	794	2
mentaria	315	467	352	479	609	794	2
al	355	467	362	479	609	794	2
RNA	364	467	385	479	609	794	2
pequeño	387	467	425	479	609	794	2
nuclear	428	467	459	479	609	794	2
U6	462	467	475	479	609	794	2
(snRNA	478	467	511	479	609	794	2
U6,	513	467	529	479	609	794	2
del	531	467	544	479	609	794	2
inglés	315	478	339	490	609	794	2
small	345	478	366	490	609	794	2
nuclear	372	478	403	490	609	794	2
RNA	409	479	427	490	609	794	2
)	427	478	430	490	609	794	2
conteniendo	436	478	489	490	609	794	2
nucleótidos	495	478	544	490	609	794	2
modificados	315	489	366	501	609	794	2
LNA	369	490	386	501	609	794	2
(Exiqon™),	388	489	434	501	609	794	2
como	436	489	461	501	609	794	2
control	464	489	494	501	609	794	2
negativo	496	489	533	501	609	794	2
se	535	489	544	501	609	794	2
usó	315	500	330	512	609	794	2
una	334	500	349	512	609	794	2
sonda	353	500	379	512	609	794	2
también	386	500	421	512	609	794	2
de	425	500	435	512	609	794	2
nucleótidos	439	500	489	512	609	794	2
modificados	492	500	544	512	609	794	2
LNA	315	512	332	523	609	794	2
(Exiqon),	336	511	373	523	609	794	2
pero	377	511	397	523	609	794	2
en	401	511	412	523	609	794	2
una	416	511	432	523	609	794	2
secuencia	436	511	478	523	609	794	2
desorganizada	483	511	544	523	609	794	2
“Scramble”.	315	523	365	534	609	794	2
1.	315	539	322	551	609	794	2
Separación	332	539	380	551	609	794	2
del	384	539	398	551	609	794	2
RNA.	401	539	424	551	609	794	2
Se	427	539	438	551	609	794	2
hizo	442	539	460	551	609	794	2
un	464	539	474	551	609	794	2
corrido	478	539	509	551	609	794	2
electro-	513	539	544	551	609	794	2
forético	332	550	364	562	609	794	2
en	367	550	378	562	609	794	2
gel	380	550	393	562	609	794	2
de	395	550	406	562	609	794	2
poliacrilamida	409	550	468	562	609	794	2
15%	471	550	490	562	609	794	2
(desnaturali-	493	550	544	562	609	794	2
zante	332	561	355	573	609	794	2
7M	361	561	376	573	609	794	2
de	379	561	390	573	609	794	2
úrea,	393	561	414	573	609	794	2
Sigma™)	417	561	454	573	609	794	2
utilizando	457	561	499	573	609	794	2
el	502	561	510	573	609	794	2
sistema	513	561	544	573	609	794	2
Mini-protean	332	572	386	584	609	794	2
(BioRad™,	391	572	435	584	609	794	2
Hercules,	440	572	479	584	609	794	2
CA,	484	573	498	583	609	794	2
USA	502	573	520	583	609	794	2
)	520	572	523	584	609	794	2
y	527	572	532	584	609	794	2
el	537	572	544	584	609	794	2
marcador	332	583	372	595	609	794	2
de	376	583	387	595	609	794	2
peso	390	583	411	595	609	794	2
molecular	415	583	457	595	609	794	2
para	460	583	479	595	609	794	2
miRNAs	483	583	517	595	609	794	2
(New	521	583	544	595	609	794	2
England	332	594	365	606	609	794	2
BioLabs™	368	594	410	606	609	794	2
–	413	594	418	606	609	794	2
miRNA	421	594	452	606	609	794	2
marker).	455	594	490	606	609	794	2
2µg	493	594	509	606	609	794	2
de	512	594	523	606	609	794	2
RNA	526	595	544	606	609	794	2
extraído,	332	605	369	617	609	794	2
se	372	605	381	617	609	794	2
mezclaron	384	605	428	617	609	794	2
con	431	605	447	617	609	794	2
tampón	450	605	483	617	609	794	2
de	486	605	497	617	609	794	2
carga	500	605	523	617	609	794	2
(Gel	526	605	544	617	609	794	2
Loading	332	617	365	628	609	794	2
Buffer	369	617	394	628	609	794	2
II,	398	617	405	628	609	794	2
Sigma™),	409	617	449	628	609	794	2
las	452	617	463	628	609	794	2
muestras	467	617	505	628	609	794	2
y	509	617	513	628	609	794	2
5µl	517	617	530	628	609	794	2
de	534	617	544	628	609	794	2
marcador	332	628	372	639	609	794	2
de	376	628	387	639	609	794	2
peso	390	628	410	639	609	794	2
molecular,	414	628	458	639	609	794	2
se	461	628	471	639	609	794	2
desnaturalizaron	474	628	544	639	609	794	2
a	332	639	337	650	609	794	2
95°C	339	639	361	650	609	794	2
durante	364	639	397	650	609	794	2
1	399	639	405	650	609	794	2
min,	408	639	426	650	609	794	2
luego	429	639	453	650	609	794	2
se	456	639	465	650	609	794	2
cargaron	468	639	505	650	609	794	2
en	508	639	519	650	609	794	2
el	521	639	529	650	609	794	2
gel	532	639	544	650	609	794	2
y	332	650	336	661	609	794	2
se	339	650	348	661	609	794	2
corrieron	351	650	390	661	609	794	2
aplicando	393	650	435	661	609	794	2
12.5	437	650	456	661	609	794	2
v/cm,	459	650	483	661	609	794	2
en	486	650	497	661	609	794	2
cámara	500	650	531	661	609	794	2
de	534	650	544	661	609	794	2
electroforesis	332	661	388	672	609	794	2
MiniProtean	391	661	443	672	609	794	2
(Biorad™).	446	661	490	672	609	794	2
2.	315	677	322	689	609	794	2
Transferencia	332	677	390	689	609	794	2
e	393	677	398	689	609	794	2
inmovilización	401	677	465	689	609	794	2
del	468	677	481	689	609	794	2
RNA.	484	677	506	689	609	794	2
Una	509	677	527	689	609	794	2
vez	529	677	544	689	609	794	2
finalizado	332	688	373	700	609	794	2
el	376	688	384	700	609	794	2
corrido	387	688	418	700	609	794	2
electroforético,	422	688	486	700	609	794	2
el	490	688	497	700	609	794	2
RNA	501	689	519	700	609	794	2
sepa-	522	688	544	700	609	794	2
rado	332	699	351	711	609	794	2
fue	356	699	369	711	609	794	2
transferido	374	699	419	711	609	794	2
a	423	699	428	711	609	794	2
una	433	699	448	711	609	794	2
membrana	453	699	499	711	609	794	2
de	503	699	514	711	609	794	2
Nylon	519	699	544	711	609	794	2
Rev.	298	730	313	741	609	794	2
Colomb.	315	730	348	741	609	794	2
Biotecnol.	350	730	388	741	609	794	2
Vol.	390	730	405	741	609	794	2
XVII	407	730	422	741	609	794	2
No.	424	730	438	741	609	794	2
2	440	730	445	741	609	794	2
Diciembre	450	730	488	741	609	794	2
2015	490	730	509	741	609	794	2
123-128	514	730	546	741	609	794	2
Figura	65	690	90	700	609	794	3
1.	93	690	100	700	609	794	3
Esquema	102	690	137	700	609	794	3
ilustrando	139	690	178	700	609	794	3
el	180	690	187	700	609	794	3
protocolo	189	690	227	700	609	794	3
de	229	690	238	700	609	794	3
Northern	241	690	272	700	609	794	3
blot	274	690	286	700	609	794	3
implementado.	291	690	348	700	609	794	3
Estandarización	66	730	126	741	609	794	3
de	128	730	137	741	609	794	3
un	139	730	149	741	609	794	3
protocolo	151	730	188	741	609	794	3
para	191	730	208	741	609	794	3
Northern	210	731	240	741	609	794	3
blot	242	731	255	741	609	794	3
no	257	730	267	741	609	794	3
radioactivo	269	730	311	741	609	794	3
125	538	729	554	741	609	794	3
cargada	74	57	107	68	609	794	4
positivamente	114	57	173	68	609	794	4
(Roche™),	180	57	224	68	609	794	4
utilizando	231	57	272	68	609	794	4
el	279	57	286	68	609	794	4
equipo	74	68	103	79	609	794	4
Trans-Blot	107	68	149	79	609	794	4
SD	152	68	165	79	609	794	4
Semi-Dry	168	68	207	79	609	794	4
Transfer	210	68	244	79	609	794	4
Cell	247	68	264	79	609	794	4
(Bio-	267	68	286	79	609	794	4
Rad™),	74	79	104	90	609	794	4
en	108	79	119	90	609	794	4
este	123	79	141	90	609	794	4
equipo	145	79	175	90	609	794	4
se	179	79	188	90	609	794	4
hizo	193	79	211	90	609	794	4
un	215	79	226	90	609	794	4
montaje	231	79	265	90	609	794	4
tipo	270	79	286	90	609	794	4
sándwich	74	90	114	101	609	794	4
con	116	90	132	101	609	794	4
3	134	90	139	101	609	794	4
hojas	142	90	164	101	609	794	4
de	166	90	177	101	609	794	4
papel	179	90	202	101	609	794	4
Whatman	205	90	246	101	609	794	4
cromato-	248	90	286	101	609	794	4
gráfico	74	101	103	112	609	794	4
3MM	106	101	129	112	609	794	4
(Whatman),	133	101	183	112	609	794	4
la	186	101	193	112	609	794	4
membrana	196	101	241	112	609	794	4
de	245	101	255	112	609	794	4
Nylon,	258	101	286	112	609	794	4
el	74	112	81	123	609	794	4
gel	84	112	97	123	609	794	4
y	99	112	104	123	609	794	4
finalmente	107	112	152	123	609	794	4
3	155	112	160	123	609	794	4
hojas	163	112	185	123	609	794	4
más	188	112	205	123	609	794	4
de	208	112	219	123	609	794	4
papel	222	112	245	123	609	794	4
cromato-	248	112	286	123	609	794	4
gráfico,	74	123	105	134	609	794	4
luego	107	123	131	134	609	794	4
se	133	123	142	134	609	794	4
adicionó	145	123	181	134	609	794	4
TBE	184	124	198	134	609	794	4
1X	200	123	211	134	609	794	4
(89mM	214	123	245	134	609	794	4
Tris	247	123	262	134	609	794	4
base,	264	123	286	134	609	794	4
89mM	74	134	102	145	609	794	4
ácido	106	134	129	145	609	794	4
borico,	132	134	162	145	609	794	4
2mM	166	134	188	145	609	794	4
EDTA	192	135	214	145	609	794	4
).	214	134	219	145	609	794	4
Para	222	134	241	145	609	794	4
garantizar	244	134	286	145	609	794	4
la	74	145	81	156	609	794	4
transferencia,	86	145	142	156	609	794	4
esta	147	145	164	156	609	794	4
se	169	145	178	156	609	794	4
realizó	182	145	211	156	609	794	4
en	215	145	226	156	609	794	4
cuarto	231	145	258	156	609	794	4
frío	263	145	277	156	609	794	4
a	281	145	286	156	609	794	4
15V	74	156	91	167	609	794	4
durante	94	156	127	167	609	794	4
60	129	156	140	167	609	794	4
min.	143	156	161	167	609	794	4
Transcurridos	164	156	221	167	609	794	4
el	223	156	231	167	609	794	4
tiempo	233	156	263	167	609	794	4
de	266	156	277	167	609	794	4
la	279	156	286	167	609	794	4
transferencia,	74	167	130	178	609	794	4
se	134	167	143	178	609	794	4
evaluó	147	167	175	178	609	794	4
si	179	167	185	178	609	794	4
hubo	189	167	211	178	609	794	4
transferencia	215	167	270	178	609	794	4
del	273	167	286	178	609	794	4
RNA	74	178	94	189	609	794	4
a	96	178	101	189	609	794	4
la	104	178	111	189	609	794	4
membrana,	114	178	162	189	609	794	4
tiñéndola	164	178	204	189	609	794	4
con	206	178	222	189	609	794	4
azul	225	178	242	189	609	794	4
de	245	178	256	189	609	794	4
metile-	258	178	286	189	609	794	4
no	74	189	85	200	609	794	4
(0.02%	87	189	118	200	609	794	4
azul	120	189	138	200	609	794	4
de	140	189	151	200	609	794	4
metileno,	153	189	192	200	609	794	4
0.3M	195	189	217	200	609	794	4
NaOAc	220	189	252	200	609	794	4
pH	254	189	268	200	609	794	4
5.5)	270	189	286	200	609	794	4
durante	74	200	106	211	609	794	4
3	109	200	115	211	609	794	4
a	118	200	123	211	609	794	4
10	125	200	136	211	609	794	4
min,	139	200	157	211	609	794	4
en	160	200	171	211	609	794	4
este	174	200	191	211	609	794	4
tiempo	194	200	224	211	609	794	4
se	227	200	236	211	609	794	4
observaron	239	200	286	211	609	794	4
las	74	211	85	222	609	794	4
bandas	88	211	118	222	609	794	4
de	121	211	132	222	609	794	4
RNA	134	211	155	222	609	794	4
en	158	211	168	222	609	794	4
la	171	211	178	222	609	794	4
membrana,	181	211	229	222	609	794	4
luego	232	211	256	222	609	794	4
el	259	211	266	222	609	794	4
azul	269	211	286	222	609	794	4
de	74	222	84	233	609	794	4
metileno	88	222	125	233	609	794	4
se	128	222	137	233	609	794	4
lavó	140	222	158	233	609	794	4
con	161	222	177	233	609	794	4
agua	180	222	200	233	609	794	4
destilada.	203	222	243	233	609	794	4
Posterior-	246	222	286	233	609	794	4
mente	74	233	101	244	609	794	4
se	103	233	112	244	609	794	4
inmovilizó	115	233	159	244	609	794	4
el	161	233	169	244	609	794	4
RNA	171	233	192	244	609	794	4
en	194	233	205	244	609	794	4
la	207	233	214	244	609	794	4
membrana,	217	233	265	244	609	794	4
para	268	233	286	244	609	794	4
lo	74	244	82	255	609	794	4
cual	85	244	102	255	609	794	4
se	105	244	114	255	609	794	4
humedeció	117	244	165	255	609	794	4
una	168	244	184	255	609	794	4
hoja	187	244	205	255	609	794	4
de	208	244	219	255	609	794	4
papel	222	244	245	255	609	794	4
cromato-	248	244	286	255	609	794	4
gráfico	74	255	103	266	609	794	4
Whatman	105	255	147	266	609	794	4
con	150	255	166	266	609	794	4
solución	169	255	204	266	609	794	4
EDC	207	256	224	266	609	794	4
(para	227	255	249	266	609	794	4
24ml	251	255	273	266	609	794	4
de	276	255	286	266	609	794	4
EDC	74	267	91	277	609	794	4
:	91	266	94	277	609	794	4
0.753gr	96	266	129	277	609	794	4
de	131	266	142	277	609	794	4
1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)	144	266	286	277	609	794	4
carboniimide	74	277	129	288	609	794	4
-	132	277	134	288	609	794	4
Sigma,	137	277	165	288	609	794	4
245	167	277	184	288	609	794	4
µl	186	277	194	288	609	794	4
de	196	277	207	288	609	794	4
1	210	277	215	288	609	794	4
Methylmidazole	218	277	286	288	609	794	4
12.5M,	74	288	104	299	609	794	4
se	108	288	117	299	609	794	4
aforó	120	288	143	299	609	794	4
al	146	288	153	299	609	794	4
volumen	157	288	194	299	609	794	4
final	197	288	215	299	609	794	4
en	219	288	229	299	609	794	4
agua	233	288	253	299	609	794	4
tratada	257	288	286	299	609	794	4
con	74	299	90	310	609	794	4
DEPC	92	300	115	310	609	794	4
),	115	299	120	310	609	794	4
y	123	299	128	310	609	794	4
se	130	299	140	310	609	794	4
incubó	142	299	172	310	609	794	4
durante	174	299	207	310	609	794	4
1	210	299	215	310	609	794	4
hora	218	299	237	310	609	794	4
a	240	299	245	310	609	794	4
65°C.	248	299	272	310	609	794	4
3.	57	316	65	327	609	794	4
Pre-hibridación	74	316	141	327	609	794	4
e	144	316	149	327	609	794	4
hibridación	152	316	202	327	609	794	4
de	205	316	216	327	609	794	4
la	219	316	227	327	609	794	4
sonda.	230	316	258	327	609	794	4
Trans-	261	316	286	327	609	794	4
currida	74	327	103	338	609	794	4
la	107	327	114	338	609	794	4
hora	117	327	136	338	609	794	4
de	139	327	150	338	609	794	4
inmovilización	153	327	215	338	609	794	4
la	218	327	225	338	609	794	4
membrana	228	327	274	338	609	794	4
se	277	327	286	338	609	794	4
lavó	74	338	91	349	609	794	4
con	94	338	110	349	609	794	4
Agua	114	338	136	349	609	794	4
desionizada.	139	338	192	349	609	794	4
Se	195	338	205	349	609	794	4
precalentó	208	338	254	349	609	794	4
a	257	338	262	349	609	794	4
65°C	265	338	286	349	609	794	4
el	74	349	81	360	609	794	4
tampón	86	349	119	360	609	794	4
de	124	349	135	360	609	794	4
hibridación	140	349	187	360	609	794	4
Ultrahyb	192	349	229	360	609	794	4
(Ambion),	234	349	276	360	609	794	4
a	281	349	286	360	609	794	4
cada	74	360	94	371	609	794	4
botella	98	360	126	371	609	794	4
de	130	360	141	371	609	794	4
hibridación	144	360	192	371	609	794	4
se	195	360	204	371	609	794	4
adicionó	208	360	245	371	609	794	4
15ml	248	360	270	371	609	794	4
del	273	360	286	371	609	794	4
tampón,	74	371	109	382	609	794	4
se	113	371	123	382	609	794	4
introdujo	127	371	166	382	609	794	4
la	171	371	178	382	609	794	4
membrana	182	371	228	382	609	794	4
conteniendo	233	371	286	382	609	794	4
los	74	382	86	393	609	794	4
RNA	91	382	111	393	609	794	4
inmovilizados	116	382	174	393	609	794	4
y	179	382	184	393	609	794	4
se	189	382	198	393	609	794	4
incubó	203	382	232	393	609	794	4
durante	237	382	270	393	609	794	4
30	275	382	286	393	609	794	4
min	74	393	90	404	609	794	4
a	92	393	97	404	609	794	4
37°C	99	393	121	404	609	794	4
para	123	393	142	404	609	794	4
pre-hibridar.	144	393	195	404	609	794	4
Las	198	393	211	404	609	794	4
sondas	214	393	243	404	609	794	4
marcadas	246	393	286	404	609	794	4
con	74	404	90	415	609	794	4
Digoxigenina	92	404	148	415	609	794	4
y	150	404	155	415	609	794	4
Estreptavidina,	157	404	219	415	609	794	4
para	221	404	240	415	609	794	4
detectar	242	404	277	415	609	794	4
el	279	404	286	415	609	794	4
miRNA	74	415	104	426	609	794	4
y	108	415	113	426	609	794	4
el	116	415	123	426	609	794	4
marcador	127	415	167	426	609	794	4
de	171	415	181	426	609	794	4
peso	185	415	205	426	609	794	4
molecular,	208	415	253	426	609	794	4
respec-	256	415	286	426	609	794	4
tivamente,	74	426	118	437	609	794	4
se	122	426	131	437	609	794	4
desnaturalizaron	135	426	205	437	609	794	4
a	209	426	214	437	609	794	4
95°C	218	426	240	437	609	794	4
durante	244	426	277	437	609	794	4
1	281	426	286	437	609	794	4
min,	74	437	92	448	609	794	4
se	95	437	104	448	609	794	4
pusieron	107	437	144	448	609	794	4
en	147	437	158	448	609	794	4
hielo	161	437	182	448	609	794	4
inmediatamente,	185	437	256	448	609	794	4
se	259	437	268	448	609	794	4
adi-	271	437	286	448	609	794	4
cionaron	74	448	111	459	609	794	4
a	115	448	120	459	609	794	4
la	124	448	131	459	609	794	4
botella	134	448	163	459	609	794	4
de	167	448	178	459	609	794	4
hibridación	181	448	229	459	609	794	4
conteniendo	233	448	286	459	609	794	4
la	74	459	81	470	609	794	4
membrana	85	459	130	470	609	794	4
con	134	459	150	470	609	794	4
el	154	459	162	470	609	794	4
RNA	166	459	186	470	609	794	4
y	190	459	195	470	609	794	4
se	199	459	208	470	609	794	4
incubaron	212	459	254	470	609	794	4
nueva-	258	459	286	470	609	794	4
mente	74	470	101	481	609	794	4
a	103	470	108	481	609	794	4
37°C	111	470	133	481	609	794	4
durante	135	470	168	481	609	794	4
toda	171	470	190	481	609	794	4
la	193	470	200	481	609	794	4
noche.	203	470	231	481	609	794	4
4.	57	486	65	498	609	794	4
Detección	74	486	118	498	609	794	4
del	123	486	136	498	609	794	4
RNA.	140	486	163	498	609	794	4
Para	167	486	186	498	609	794	4
realizar	190	486	221	498	609	794	4
el	225	486	233	498	609	794	4
proceso	237	486	271	498	609	794	4
de	276	486	286	498	609	794	4
detección	74	497	116	509	609	794	4
se	119	497	128	509	609	794	4
retiró	132	497	155	509	609	794	4
la	158	497	165	509	609	794	4
membrana	169	497	215	509	609	794	4
de	218	497	229	509	609	794	4
la	233	497	240	509	609	794	4
botella	243	497	272	509	609	794	4
de	276	497	286	509	609	794	4
hibridación,	74	508	124	520	609	794	4
se	126	508	135	520	609	794	4
lavó	138	508	155	520	609	794	4
dos	158	508	173	520	609	794	4
veces	175	508	199	520	609	794	4
con	202	508	218	520	609	794	4
tampón	220	508	253	520	609	794	4
de	255	508	266	520	609	794	4
baja	269	508	286	520	609	794	4
astringencia	74	519	124	531	609	794	4
(2x	128	519	141	531	609	794	4
SSC	144	519	161	531	609	794	4
con	164	519	180	531	609	794	4
0.1%	184	519	206	531	609	794	4
(p/v)	209	519	229	531	609	794	4
SDS)	233	519	253	531	609	794	4
a	257	519	262	531	609	794	4
37°C	265	519	286	531	609	794	4
con	74	530	90	542	609	794	4
agitación	92	530	131	542	609	794	4
durante	133	530	166	542	609	794	4
15	169	530	180	542	609	794	4
min.	182	530	201	542	609	794	4
Dos	203	530	220	542	609	794	4
veces	223	530	247	542	609	794	4
con	249	530	265	542	609	794	4
tam-	268	530	286	542	609	794	4
pón	74	541	90	553	609	794	4
de	93	541	104	553	609	794	4
alta	107	541	122	553	609	794	4
astringencia	125	541	175	553	609	794	4
(0.1x	178	541	199	553	609	794	4
SSC	202	541	219	553	609	794	4
con	222	541	238	553	609	794	4
0.1%	241	541	263	553	609	794	4
(p/v)	266	541	286	553	609	794	4
SDS)	332	57	352	68	609	794	4
a	355	57	360	68	609	794	4
37°C	363	57	385	68	609	794	4
durante	388	57	421	68	609	794	4
5	424	57	429	68	609	794	4
min.	432	57	451	68	609	794	4
Una	454	57	471	68	609	794	4
vez	474	57	489	68	609	794	4
con	492	57	508	68	609	794	4
tampón	511	57	544	68	609	794	4
de	332	68	342	79	609	794	4
lavado	345	68	373	79	609	794	4
(1x	376	68	389	79	609	794	4
SSC)	392	68	412	79	609	794	4
durante	415	68	448	79	609	794	4
10	451	68	462	79	609	794	4
min,	465	68	483	79	609	794	4
luego	486	68	509	79	609	794	4
se	512	68	521	79	609	794	4
incu-	524	68	544	79	609	794	4
bó	332	79	343	90	609	794	4
a	345	79	350	90	609	794	4
37°C	353	79	374	90	609	794	4
durante	376	79	409	90	609	794	4
3h	411	79	422	90	609	794	4
en	424	79	435	90	609	794	4
tampón	437	79	470	90	609	794	4
de	472	79	483	90	609	794	4
bloqueo	485	79	521	90	609	794	4
(DIG	523	79	544	90	609	794	4
wash	332	90	353	101	609	794	4
and	356	90	372	101	609	794	4
Block	374	90	398	101	609	794	4
buffer	400	90	425	101	609	794	4
set,	428	90	442	101	609	794	4
Roche).	444	90	477	101	609	794	4
Posteriormente	479	90	544	101	609	794	4
se	332	101	341	112	609	794	4
adicionaron	345	101	395	112	609	794	4
los	399	101	411	112	609	794	4
anticuerpos,	415	101	467	112	609	794	4
Anti-Digoxigenin-	471	101	544	112	609	794	4
AP,	332	112	346	123	609	794	4
Fab	351	112	366	123	609	794	4
fragments	370	112	412	123	609	794	4
(Sigma)	417	112	448	123	609	794	4
en	453	112	463	123	609	794	4
dilución	468	112	502	123	609	794	4
1:15.000	506	112	544	123	609	794	4
y	332	123	336	134	609	794	4
Estreptavidina	341	123	399	134	609	794	4
(Promega)	403	123	447	134	609	794	4
1:4000,	452	123	484	134	609	794	4
se	488	123	497	134	609	794	4
incubaron	501	123	544	134	609	794	4
durante	332	134	364	145	609	794	4
30min	367	134	394	145	609	794	4
a	398	134	403	145	609	794	4
TA.	406	134	420	145	609	794	4
Después	423	134	460	145	609	794	4
de	463	134	473	145	609	794	4
incubar	477	134	508	145	609	794	4
los	511	134	523	145	609	794	4
anti-	526	134	544	145	609	794	4
cuerpos	332	145	366	156	609	794	4
la	368	145	375	156	609	794	4
membrana	378	145	424	156	609	794	4
se	426	145	435	156	609	794	4
lavó	438	145	455	156	609	794	4
con	458	145	474	156	609	794	4
tampón	477	145	509	156	609	794	4
de	512	145	523	156	609	794	4
lava-	525	145	544	156	609	794	4
do	332	156	343	167	609	794	4
(DIG	346	156	367	167	609	794	4
wash	370	156	391	167	609	794	4
and	394	156	410	167	609	794	4
Block	413	156	436	167	609	794	4
buffer	439	156	464	167	609	794	4
set,	467	156	481	167	609	794	4
Roche)	484	156	514	167	609	794	4
cuatro	517	156	544	167	609	794	4
veces	332	167	356	178	609	794	4
durante	358	167	391	178	609	794	4
15	394	167	405	178	609	794	4
min	408	167	424	178	609	794	4
a	427	167	432	178	609	794	4
TA.	434	167	449	178	609	794	4
Se	451	167	462	178	609	794	4
incubó	464	167	494	178	609	794	4
la	497	167	504	178	609	794	4
membra-	507	167	544	178	609	794	4
na	332	178	342	189	609	794	4
5	346	178	351	189	609	794	4
min	355	178	371	189	609	794	4
en	375	178	385	189	609	794	4
Buffer	389	178	414	189	609	794	4
de	418	178	429	189	609	794	4
detección	432	178	474	189	609	794	4
(DIG	478	178	499	189	609	794	4
wash	503	178	525	189	609	794	4
and	528	178	544	189	609	794	4
Block	332	189	355	200	609	794	4
buffer	358	189	383	200	609	794	4
set,	386	189	401	200	609	794	4
Roche)	404	189	434	200	609	794	4
a	437	189	442	200	609	794	4
TA,	445	189	459	200	609	794	4
luego	462	189	486	200	609	794	4
sobre	489	189	512	200	609	794	4
el	515	189	523	200	609	794	4
lado	526	189	544	200	609	794	4
de	332	200	342	211	609	794	4
la	345	200	352	211	609	794	4
membrana	355	200	400	211	609	794	4
que	403	200	419	211	609	794	4
contiene	421	200	458	211	609	794	4
el	461	200	468	211	609	794	4
RNA,	471	200	493	211	609	794	4
se	496	200	505	211	609	794	4
adicionó	507	200	544	211	609	794	4
la	332	211	339	222	609	794	4
solución	341	211	377	222	609	794	4
de	379	211	390	222	609	794	4
detección	392	211	434	222	609	794	4
CSPD	437	212	459	222	609	794	4
(Roche)	462	211	495	222	609	794	4
en	497	211	508	222	609	794	4
dilución	510	211	544	222	609	794	4
1:100	332	222	356	233	609	794	4
se	359	222	368	233	609	794	4
dejó	371	222	390	233	609	794	4
a	392	222	397	233	609	794	4
TA	400	222	412	233	609	794	4
durante	415	222	447	233	609	794	4
5	450	222	456	233	609	794	4
min,	458	222	477	233	609	794	4
posteriormente	479	222	544	233	609	794	4
se	332	233	341	244	609	794	4
eliminó	344	233	376	244	609	794	4
el	379	233	386	244	609	794	4
exceso	390	233	419	244	609	794	4
de	423	233	434	244	609	794	4
CSPD	437	233	462	244	609	794	4
de	465	233	476	244	609	794	4
la	480	233	487	244	609	794	4
membrana	490	233	536	244	609	794	4
y	539	233	544	244	609	794	4
se	332	244	341	255	609	794	4
introdujo	343	244	382	255	609	794	4
en	384	244	395	255	609	794	4
una	397	244	413	255	609	794	4
bolsa	415	244	437	255	609	794	4
sellable	440	244	471	255	609	794	4
y	473	244	478	255	609	794	4
resistente	480	244	521	255	609	794	4
al	523	244	530	255	609	794	4
ca-	532	244	544	255	609	794	4
lor	332	255	343	266	609	794	4
(heat	346	255	367	266	609	794	4
-	370	255	372	266	609	794	4
seleable	375	255	410	266	609	794	4
bag)	413	255	431	266	609	794	4
se	434	255	443	266	609	794	4
incubó	446	255	476	266	609	794	4
durante	479	255	511	266	609	794	4
15	514	255	525	266	609	794	4
min	528	255	544	266	609	794	4
a	332	266	337	277	609	794	4
37°C,	340	266	364	277	609	794	4
para	367	266	386	277	609	794	4
proceder	389	266	427	277	609	794	4
a	431	266	436	277	609	794	4
su	439	266	448	277	609	794	4
detección	452	266	494	277	609	794	4
con	497	266	513	277	609	794	4
casset-	516	266	544	277	609	794	4
te	332	277	340	288	609	794	4
de	343	277	354	288	609	794	4
revelado	357	277	394	288	609	794	4
y	397	277	401	288	609	794	4
películas	405	277	441	288	609	794	4
de	444	277	455	288	609	794	4
alta	458	277	473	288	609	794	4
sensibilidad.	476	277	528	288	609	794	4
Las	531	277	544	288	609	794	4
películas	332	288	368	299	609	794	4
se	372	288	381	299	609	794	4
expusieron	385	288	431	299	609	794	4
durante	435	288	468	299	609	794	4
30min	472	288	499	299	609	794	4
y	502	288	507	299	609	794	4
1h	511	288	522	299	609	794	4
para	526	288	544	299	609	794	4
luego	332	299	355	310	609	794	4
ser	358	299	370	310	609	794	4
reveladas.	373	299	415	310	609	794	4
Resultados	315	323	367	336	609	794	4
y	370	323	375	336	609	794	4
discusión	378	323	422	336	609	794	4
Con	315	340	333	351	609	794	4
el	337	340	344	351	609	794	4
protocolo	348	340	390	351	609	794	4
descrito	394	340	428	351	609	794	4
anteriormente	432	340	492	351	609	794	4
se	497	340	506	351	609	794	4
observó	510	340	544	351	609	794	4
señal	315	351	336	362	609	794	4
cuando	340	351	372	362	609	794	4
el	376	351	384	362	609	794	4
RNA	388	351	408	362	609	794	4
fue	412	351	425	362	609	794	4
evaluado	429	351	468	362	609	794	4
con	472	351	488	362	609	794	4
la	492	351	499	362	609	794	4
sonda	503	351	529	362	609	794	4
es-	533	351	544	362	609	794	4
pecífica	315	362	347	373	609	794	4
del	352	362	365	373	609	794	4
snRNA	369	362	399	373	609	794	4
U6	404	362	417	373	609	794	4
(figura	421	362	448	373	609	794	4
2),	453	362	463	373	609	794	4
un	468	362	479	373	609	794	4
RNA	483	363	502	373	609	794	4
pequeño	506	362	544	373	609	794	4
nuclear	315	373	346	384	609	794	4
involucrado	349	373	399	384	609	794	4
en	402	373	412	384	609	794	4
el	415	373	423	384	609	794	4
ensamblaje	426	373	474	384	609	794	4
y	476	373	481	384	609	794	4
funcionamien-	484	373	544	384	609	794	4
to	315	384	323	395	609	794	4
del	327	384	340	395	609	794	4
complejo	344	384	384	395	609	794	4
de	387	384	398	395	609	794	4
corte	402	384	424	395	609	794	4
y	428	384	432	395	609	794	4
empalme	436	384	476	395	609	794	4
celular,	479	384	510	395	609	794	4
con	514	384	530	395	609	794	4
un	533	384	544	395	609	794	4
tamaño	315	395	347	406	609	794	4
aproximado	350	395	401	406	609	794	4
de	404	395	415	406	609	794	4
150	418	395	435	406	609	794	4
nucleótidos	438	395	487	406	609	794	4
(nt).	490	395	507	406	609	794	4
Cuando	510	395	544	406	609	794	4
se	315	406	324	417	609	794	4
evaluó	327	406	356	417	609	794	4
el	359	406	367	417	609	794	4
mismo	370	406	399	417	609	794	4
RNA	402	407	420	417	609	794	4
con	424	406	440	417	609	794	4
la	444	406	451	417	609	794	4
sonda	454	406	480	417	609	794	4
de	483	406	494	417	609	794	4
control	498	406	528	417	609	794	4
ne-	531	406	544	417	609	794	4
gativo	315	417	340	428	609	794	4
Scramble	344	417	383	428	609	794	4
(con	386	417	405	428	609	794	4
nucleótidos	408	417	457	428	609	794	4
desorganizados)	461	417	530	428	609	794	4
no	533	417	544	428	609	794	4
se	315	428	324	439	609	794	4
observó	327	428	361	439	609	794	4
señal	364	428	386	439	609	794	4
(figura	389	428	416	439	609	794	4
5),	419	428	430	439	609	794	4
lo	434	428	442	439	609	794	4
que	445	428	461	439	609	794	4
indica	464	428	490	439	609	794	4
que	493	428	509	439	609	794	4
la	512	428	519	439	609	794	4
señal	523	428	544	439	609	794	4
observada	315	439	359	450	609	794	4
con	361	439	377	450	609	794	4
la	380	439	387	450	609	794	4
sonda	390	439	415	450	609	794	4
complementaria	418	439	487	450	609	794	4
al	489	439	496	450	609	794	4
snRNA	499	439	529	450	609	794	4
U6	531	439	544	450	609	794	4
es	315	450	324	461	609	794	4
específica.	327	450	371	461	609	794	4
Con	374	450	392	461	609	794	4
lo	396	450	403	461	609	794	4
anterior	407	450	440	461	609	794	4
se	443	450	452	461	609	794	4
demuestra	455	450	500	461	609	794	4
la	503	450	510	461	609	794	4
sensibi-	513	450	544	461	609	794	4
lidad	315	461	335	472	609	794	4
y	338	461	343	472	609	794	4
especificidad	346	461	401	472	609	794	4
del	404	461	417	472	609	794	4
protocolo	420	461	462	472	609	794	4
en	465	461	475	472	609	794	4
la	478	461	486	472	609	794	4
detección	489	461	531	472	609	794	4
de	534	461	544	472	609	794	4
un	315	472	325	483	609	794	4
snRNA	328	472	358	483	609	794	4
constitutivo	361	472	410	483	609	794	4
celular.	413	472	443	483	609	794	4
Como	315	489	341	500	609	794	4
se	344	489	353	500	609	794	4
mencionó	356	489	399	500	609	794	4
inicialmente	402	489	453	500	609	794	4
en	456	489	467	500	609	794	4
este	470	489	487	500	609	794	4
protocolo	490	489	532	500	609	794	4
se	535	489	544	500	609	794	4
proponen	315	500	357	511	609	794	4
cambios	360	500	396	511	609	794	4
en	399	500	410	511	609	794	4
tres	414	500	429	511	609	794	4
aspectos	433	500	470	511	609	794	4
que	473	500	490	511	609	794	4
contribuyen	493	500	544	511	609	794	4
a	315	511	320	522	609	794	4
la	322	511	329	522	609	794	4
especificidad,	332	511	390	522	609	794	4
sensibilidad	392	511	442	522	609	794	4
y	444	511	449	522	609	794	4
seguridad	452	511	493	522	609	794	4
de	496	511	507	522	609	794	4
esta	509	511	526	522	609	794	4
téc-	529	511	544	522	609	794	4
nica,	315	522	334	533	609	794	4
como	338	522	362	533	609	794	4
son	365	522	381	533	609	794	4
el	384	522	391	533	609	794	4
tipo	394	522	411	533	609	794	4
de	414	522	425	533	609	794	4
sonda,	428	522	456	533	609	794	4
su	459	522	469	533	609	794	4
marcaje	472	522	506	533	609	794	4
y	509	522	514	533	609	794	4
el	517	522	524	533	609	794	4
pro-	527	522	544	533	609	794	4
ceso	315	533	334	544	609	794	4
de	337	533	348	544	609	794	4
inmovilización	350	533	411	544	609	794	4
del	414	533	427	544	609	794	4
RNA	429	533	450	544	609	794	4
en	452	533	463	544	609	794	4
la	465	533	472	544	609	794	4
membrana.	475	533	523	544	609	794	4
Para	526	533	544	544	609	794	4
entender	315	544	353	555	609	794	4
la	357	544	364	555	609	794	4
razón	368	544	392	555	609	794	4
de	396	544	407	555	609	794	4
las	411	544	422	555	609	794	4
modificaciones	426	544	490	555	609	794	4
realizadas	493	544	536	555	609	794	4
y	539	544	544	555	609	794	4
Figura	57	696	82	707	609	794	4
2.	84	696	92	707	609	794	4
Análisis	94	696	123	707	609	794	4
de	125	696	134	707	609	794	4
Northern	137	697	168	707	609	794	4
blot	170	697	182	707	609	794	4
para	184	696	202	707	609	794	4
detectar	204	696	236	707	609	794	4
el	238	696	244	707	609	794	4
snRNA	247	696	273	707	609	794	4
U6	275	696	286	707	609	794	4
en	289	696	298	707	609	794	4
RNA	300	696	318	707	609	794	4
extraído	320	696	352	707	609	794	4
de	354	696	363	707	609	794	4
células	365	696	391	707	609	794	4
Vero.	393	696	413	707	609	794	4
126	57	729	73	741	609	794	4
Rev.	298	730	313	741	609	794	4
Colomb.	315	730	348	741	609	794	4
Biotecnol.	350	730	388	741	609	794	4
Vol.	390	730	405	741	609	794	4
XVII	407	730	422	741	609	794	4
No.	424	730	438	741	609	794	4
2	440	730	445	741	609	794	4
Diciembre	450	730	488	741	609	794	4
2015	490	730	509	741	609	794	4
123-128	514	730	546	741	609	794	4
con	65	57	81	68	609	794	5
el	84	57	91	68	609	794	5
fin	94	57	105	68	609	794	5
de	108	57	119	68	609	794	5
que	121	57	138	68	609	794	5
este	141	57	158	68	609	794	5
protocolo	161	57	203	68	609	794	5
pueda	205	57	232	68	609	794	5
ser	235	57	247	68	609	794	5
implemen-	250	57	295	68	609	794	5
tado	65	68	84	79	609	794	5
y	88	68	93	79	609	794	5
modificado	96	68	144	79	609	794	5
posteriormente,	148	68	215	79	609	794	5
a	218	68	223	79	609	794	5
continuación	227	68	282	79	609	794	5
se	286	68	295	79	609	794	5
explicarán	65	79	108	90	609	794	5
y	111	79	116	90	609	794	5
discutirán	118	79	159	90	609	794	5
los	161	79	173	90	609	794	5
fundamentos	176	79	231	90	609	794	5
teóricos	233	79	267	90	609	794	5
de	270	79	281	90	609	794	5
los	283	79	295	90	609	794	5
cambios	65	90	101	101	609	794	5
realizados	104	90	146	101	609	794	5
en	149	90	160	101	609	794	5
el	162	90	170	101	609	794	5
mismo.	173	90	203	101	609	794	5
Diseño	65	117	95	129	609	794	5
de	98	117	108	129	609	794	5
sondas	110	117	140	129	609	794	5
Cuando	65	134	99	145	609	794	5
se	104	134	113	145	609	794	5
diseñan	118	134	151	145	609	794	5
y	156	134	161	145	609	794	5
sintetizan	166	134	206	145	609	794	5
moléculas	211	134	254	145	609	794	5
similares	259	134	295	145	609	794	5
a	65	145	70	156	609	794	5
los	74	145	86	156	609	794	5
ácidos	89	145	116	156	609	794	5
nucleicos,	120	145	162	156	609	794	5
como	166	145	190	156	609	794	5
las	194	145	205	156	609	794	5
sondas	208	145	238	156	609	794	5
utilizadas	241	145	281	156	609	794	5
en	284	145	295	156	609	794	5
Northern	65	156	103	167	609	794	5
blotting,	106	156	140	167	609	794	5
tres	143	156	159	167	609	794	5
características	162	156	221	167	609	794	5
generales	224	156	265	167	609	794	5
deben	268	156	295	167	609	794	5
tenerse	65	167	96	178	609	794	5
en	101	167	111	178	609	794	5
cuenta:	115	167	147	178	609	794	5
primero,	151	167	187	178	609	794	5
las	191	167	202	178	609	794	5
moléculas	206	167	249	178	609	794	5
diseñadas	253	167	295	178	609	794	5
deben	65	178	92	189	609	794	5
ser	96	178	108	189	609	794	5
eficientes	112	178	152	189	609	794	5
en	156	178	166	189	609	794	5
la	170	178	177	189	609	794	5
oligomerización.	181	178	251	189	609	794	5
Segundo,	255	178	295	189	609	794	5
deben	65	189	92	200	609	794	5
tener	96	189	118	200	609	794	5
alta	122	189	137	200	609	794	5
afinidad	141	189	174	200	609	794	5
y	178	189	183	200	609	794	5
reconocimiento	187	189	254	200	609	794	5
selectivo	258	189	295	200	609	794	5
del	65	200	78	211	609	794	5
ácido	83	200	106	211	609	794	5
nucleico	111	200	147	211	609	794	5
complementario;	152	200	224	211	609	794	5
esta	229	200	246	211	609	794	5
propiedad	251	200	295	211	609	794	5
puede	65	211	92	222	609	794	5
ser	96	211	108	222	609	794	5
medida	112	211	143	222	609	794	5
por	147	211	162	222	609	794	5
los	165	211	177	222	609	794	5
valores	181	211	211	222	609	794	5
de	214	211	225	222	609	794	5
temperatura	229	211	280	222	609	794	5
de	284	211	295	222	609	794	5
fusión	65	222	91	233	609	794	5
(Tm),	94	222	116	233	609	794	5
con	119	222	135	233	609	794	5
altos	138	222	158	233	609	794	5
valores	161	222	191	233	609	794	5
menor	195	222	222	233	609	794	5
afinidad,	226	222	262	233	609	794	5
valores	265	222	295	233	609	794	5
bajos	65	233	88	244	609	794	5
mayor	90	233	117	244	609	794	5
afinidad.	120	233	156	244	609	794	5
Tercero,	158	233	193	244	609	794	5
tener	196	233	218	244	609	794	5
buena	220	233	247	244	609	794	5
solubilidad	249	233	295	244	609	794	5
en	65	244	76	255	609	794	5
agua	79	244	99	255	609	794	5
(Wengel	102	244	138	255	609	794	5
1999).	141	244	168	255	609	794	5
Para	65	261	84	272	609	794	5
obtener	88	261	121	272	609	794	5
sondas	125	261	154	272	609	794	5
con	158	261	174	272	609	794	5
oligomerización	178	261	246	272	609	794	5
eficiente	250	261	286	272	609	794	5
y	290	261	295	272	609	794	5
alta	65	272	80	283	609	794	5
afinidad	84	272	118	283	609	794	5
en	122	272	133	283	609	794	5
la	137	272	144	283	609	794	5
hibridación	148	272	196	283	609	794	5
con	200	272	216	283	609	794	5
las	220	272	231	283	609	794	5
cadenas	235	272	270	283	609	794	5
com-	274	272	295	283	609	794	5
plementarias	65	283	119	294	609	794	5
de	123	283	133	294	609	794	5
los	137	283	148	294	609	794	5
ácidos	152	283	179	294	609	794	5
nucleicos,	182	283	225	294	609	794	5
estas	228	283	249	294	609	794	5
deben	252	283	279	294	609	794	5
ser	282	283	295	294	609	794	5
diseñas	65	294	96	305	609	794	5
de	99	294	110	305	609	794	5
forma	113	294	138	305	609	794	5
tal	141	294	151	305	609	794	5
que	154	294	170	305	609	794	5
la	173	294	180	305	609	794	5
estructura	183	294	225	305	609	794	5
de	228	294	239	305	609	794	5
cada	242	294	262	305	609	794	5
una	265	294	281	305	609	794	5
de	284	294	295	305	609	794	5
estas	65	305	86	316	609	794	5
sondas	91	305	120	316	609	794	5
tenga	125	305	149	316	609	794	5
una	154	305	170	316	609	794	5
configuración	175	305	233	316	609	794	5
estructural	238	305	282	316	609	794	5
lo	287	305	295	316	609	794	5
más	65	316	82	327	609	794	5
similar	86	316	113	327	609	794	5
posible	116	316	147	327	609	794	5
a	151	316	155	327	609	794	5
la	159	316	166	327	609	794	5
encontrada	170	316	218	327	609	794	5
en	221	316	232	327	609	794	5
los	236	316	247	327	609	794	5
ácidos	251	316	278	327	609	794	5
nu-	282	316	295	327	609	794	5
cleicos	323	57	352	68	609	794	5
naturalmente	355	57	411	68	609	794	5
Petersen	414	57	450	68	609	794	5
et	453	57	461	68	609	794	5
al.	463	57	473	68	609	794	5
(2002).	475	57	506	68	609	794	5
Los	508	57	523	68	609	794	5
ácidos	525	57	553	68	609	794	5
nucleicos	323	68	363	79	609	794	5
naturalmente	369	68	425	79	609	794	5
tienen	432	68	458	79	609	794	5
dos	464	68	479	79	609	794	5
configuraciones	486	68	553	79	609	794	5
estructurales,	323	79	379	90	609	794	5
el	383	79	390	90	609	794	5
tipo	394	79	410	90	609	794	5
A	414	79	420	90	609	794	5
(también	424	79	462	90	609	794	5
llamado	465	79	499	90	609	794	5
tipo	503	79	519	90	609	794	5
N)	523	79	533	90	609	794	5
y	537	79	542	90	609	794	5
el	545	79	553	90	609	794	5
tipo	323	90	340	101	609	794	5
B	344	90	350	101	609	794	5
(también	355	90	392	101	609	794	5
llamado	397	90	431	101	609	794	5
tipo	435	90	452	101	609	794	5
S).	457	90	467	101	609	794	5
Estas	472	90	492	101	609	794	5
conformacio-	497	90	553	101	609	794	5
nes	323	101	338	112	609	794	5
están	341	101	363	112	609	794	5
dadas	367	101	392	112	609	794	5
por	395	101	410	112	609	794	5
los	413	101	425	112	609	794	5
cambios	428	101	464	112	609	794	5
de	467	101	478	112	609	794	5
estructura	481	101	524	112	609	794	5
en	527	101	538	112	609	794	5
los	541	101	553	112	609	794	5
azúcares	323	112	361	123	609	794	5
de	365	112	376	123	609	794	5
los	380	112	392	123	609	794	5
nucleótidos	396	112	445	123	609	794	5
(Wenge	450	112	484	123	609	794	5
1999).	488	112	515	123	609	794	5
La	520	112	529	123	609	794	5
ribo-	534	112	553	123	609	794	5
sa	323	123	332	134	609	794	5
(azúcar	336	123	368	134	609	794	5
del	372	123	385	134	609	794	5
RNA	389	124	408	134	609	794	5
)	408	123	411	134	609	794	5
normalmente	415	123	472	134	609	794	5
se	476	123	485	134	609	794	5
encuentra	490	123	532	134	609	794	5
con	537	123	553	134	609	794	5
configuración	323	134	381	145	609	794	5
del	385	134	398	145	609	794	5
tipo	401	134	417	145	609	794	5
A,	421	134	430	145	609	794	5
mientras	433	134	469	145	609	794	5
que	473	134	489	145	609	794	5
el	492	134	499	145	609	794	5
DNA	503	135	522	145	609	794	5
puede	526	134	553	145	609	794	5
encontrarse	323	145	373	156	609	794	5
en	377	145	387	156	609	794	5
cualquiera	391	145	435	156	609	794	5
de	438	145	449	156	609	794	5
las	452	145	463	156	609	794	5
dos	467	145	482	156	609	794	5
configuraciones	486	145	553	156	609	794	5
dependiendo	323	156	380	167	609	794	5
del	383	156	396	167	609	794	5
ambiente	399	156	439	167	609	794	5
(fuerza	443	156	472	167	609	794	5
iónica	475	156	501	167	609	794	5
y	504	156	509	167	609	794	5
humedad	513	156	553	167	609	794	5
relativa)	323	167	357	178	609	794	5
(Wengel	359	167	395	178	609	794	5
1999)	398	167	423	178	609	794	5
(figura	426	167	453	178	609	794	5
3).	456	167	467	178	609	794	5
Por	323	184	338	195	609	794	5
su	341	184	351	195	609	794	5
parte	355	184	377	195	609	794	5
los	380	184	392	195	609	794	5
LNA	396	185	413	195	609	794	5
(Locked	417	184	451	195	609	794	5
Nucleic	455	184	487	195	609	794	5
Acids)	491	184	517	195	609	794	5
son	521	184	536	195	609	794	5
nu-	540	184	553	195	609	794	5
cleótidos	323	195	362	206	609	794	5
modificados,	364	195	418	206	609	794	5
su	421	195	430	206	609	794	5
estructura	433	195	475	206	609	794	5
se	478	195	487	206	609	794	5
caracteriza	489	195	536	206	609	794	5
por	538	195	553	206	609	794	5
tener	323	206	345	217	609	794	5
un	349	206	360	217	609	794	5
puente	364	206	394	217	609	794	5
de	397	206	408	217	609	794	5
metileno	412	206	449	217	609	794	5
que	453	206	469	217	609	794	5
conecta	473	206	507	217	609	794	5
el	511	206	518	217	609	794	5
2´-Oxi-	522	206	553	217	609	794	5
geno	323	217	345	228	609	794	5
con	349	217	365	228	609	794	5
el	369	217	376	228	609	794	5
4´-Carbono	380	217	430	228	609	794	5
de	434	217	445	228	609	794	5
la	449	217	456	228	609	794	5
ribosa	460	217	486	228	609	794	5
(figura	490	217	517	228	609	794	5
4).	521	217	532	228	609	794	5
Este	536	217	553	228	609	794	5
puente	323	228	353	239	609	794	5
resulta	357	228	384	239	609	794	5
en	388	228	399	239	609	794	5
una	402	228	418	239	609	794	5
conformación	422	228	481	239	609	794	5
bloqueada	484	228	530	239	609	794	5
C3´-	533	228	553	239	609	794	5
endo,	323	239	347	250	609	794	5
impidiendo	351	239	399	250	609	794	5
que	402	239	418	250	609	794	5
el	422	239	429	250	609	794	5
nucleótido	432	239	478	250	609	794	5
adopte	481	239	511	250	609	794	5
otra	514	239	531	250	609	794	5
con-	535	239	553	250	609	794	5
figuración	323	250	365	261	609	794	5
diferente	368	250	406	261	609	794	5
a	409	250	414	261	609	794	5
la	417	250	424	261	609	794	5
A,	427	250	436	261	609	794	5
configuración	439	250	497	261	609	794	5
en	501	250	511	261	609	794	5
la	514	250	521	261	609	794	5
que	524	250	541	261	609	794	5
se	544	250	553	261	609	794	5
encuentra	323	261	366	272	609	794	5
el	369	261	376	272	609	794	5
RNA	380	262	398	272	609	794	5
naturalmente	401	261	457	272	609	794	5
(Gurman	460	261	498	272	609	794	5
S	502	261	507	272	609	794	5
Pall	510	261	525	272	609	794	5
&	528	261	535	272	609	794	5
Ha-	538	261	553	272	609	794	5
milton,	323	272	352	283	609	794	5
2008;	355	272	380	283	609	794	5
Wengel	383	272	416	283	609	794	5
2009).	418	272	446	283	609	794	5
Esto	323	288	341	300	609	794	5
hace	344	288	364	300	609	794	5
que	368	288	384	300	609	794	5
las	387	288	398	300	609	794	5
sondas	401	288	431	300	609	794	5
LNA	434	289	451	300	609	794	5
usadas	454	288	483	300	609	794	5
en	486	288	497	300	609	794	5
el	500	288	508	300	609	794	5
protocolo	511	288	553	300	609	794	5
propuesto	323	299	367	311	609	794	5
por	370	299	385	311	609	794	5
Kim	388	299	405	311	609	794	5
et	408	299	416	311	609	794	5
al.,	419	299	431	311	609	794	5
2010	434	299	456	311	609	794	5
tengan	460	299	489	311	609	794	5
alta	492	299	507	311	609	794	5
afinidad	511	299	544	311	609	794	5
y	548	299	553	311	609	794	5
estabilidad	323	310	369	322	609	794	5
térmica	372	310	404	322	609	794	5
representada	408	310	463	322	609	794	5
en	467	310	478	322	609	794	5
bajos	482	310	504	322	609	794	5
valores	508	310	538	322	609	794	5
de	542	310	553	322	609	794	5
Tm	323	321	336	333	609	794	5
y	339	321	344	333	609	794	5
mayor	347	321	374	333	609	794	5
especificidad.	377	321	434	333	609	794	5
Inmovilización	323	348	384	361	609	794	5
del	387	348	400	361	609	794	5
RNA	402	348	424	361	609	794	5
en	427	348	437	361	609	794	5
la	440	348	448	361	609	794	5
membrana	450	348	496	361	609	794	5
Figura	65	448	90	458	609	794	5
3.	94	448	102	458	609	794	5
Esquema	106	448	140	458	609	794	5
mostrando	144	448	187	458	609	794	5
las	190	448	201	458	609	794	5
configuraciones	205	448	265	458	609	794	5
estruc-	269	448	295	458	609	794	5
turales	65	459	91	469	609	794	5
de	94	459	104	469	609	794	5
los	107	459	118	469	609	794	5
ácidos	121	459	146	469	609	794	5
nucleicos.	149	459	187	469	609	794	5
Configuración	190	459	245	469	609	794	5
B	248	459	253	469	609	794	5
o	257	459	262	469	609	794	5
S,	265	459	272	469	609	794	5
en	276	459	285	469	609	794	5
al	288	459	295	469	609	794	5
que	65	470	79	480	609	794	5
se	82	470	90	480	609	794	5
encuentra	92	470	131	480	609	794	5
el	133	470	140	480	609	794	5
DNA.	142	470	164	480	609	794	5
Configuración	167	470	221	480	609	794	5
A	224	470	229	480	609	794	5
o	232	470	237	480	609	794	5
N	240	470	246	480	609	794	5
en	249	470	258	480	609	794	5
la	261	470	268	480	609	794	5
que	270	470	284	480	609	794	5
se	287	470	295	480	609	794	5
encuentran	65	481	108	491	609	794	5
tanto	112	481	133	491	609	794	5
el	136	481	142	491	609	794	5
DNA	146	481	164	491	609	794	5
como	168	481	189	491	609	794	5
el	193	481	199	491	609	794	5
RNA.	203	481	223	491	609	794	5
Imagen	227	481	255	491	609	794	5
tomada	258	481	288	491	609	794	5
y	291	481	295	491	609	794	5
modificada	65	492	108	502	609	794	5
de	111	492	120	502	609	794	5
Wengel,	122	492	152	502	609	794	5
2009.	154	492	176	502	609	794	5
La	323	365	333	377	609	794	5
inmovilización	337	365	398	377	609	794	5
del	402	365	415	377	609	794	5
RNA	419	366	437	376	609	794	5
en	441	365	452	377	609	794	5
la	456	365	463	377	609	794	5
membrana	467	365	512	377	609	794	5
inducida	516	365	553	377	609	794	5
por	323	376	338	388	609	794	5
UV	341	377	354	387	609	794	5
sucede	357	376	387	388	609	794	5
por	390	376	405	388	609	794	5
el	408	376	415	388	609	794	5
entrecruzamiento	418	376	494	388	609	794	5
entre	497	376	519	388	609	794	5
fraccio-	522	376	553	388	609	794	5
nes	323	387	338	399	609	794	5
de	340	387	350	399	609	794	5
residuos	353	387	388	399	609	794	5
de	390	387	401	399	609	794	5
uracilo	403	387	432	399	609	794	5
y	434	387	438	399	609	794	5
los	441	387	452	399	609	794	5
grupos	455	387	484	399	609	794	5
amino	486	387	512	399	609	794	5
cargados	514	387	553	399	609	794	5
positivamente	323	398	383	410	609	794	5
presentes	385	398	426	410	609	794	5
en	428	398	439	410	609	794	5
la	441	398	448	410	609	794	5
membrana	451	398	497	410	609	794	5
Sambrook	499	398	543	410	609	794	5
et	545	398	553	410	609	794	5
al.	323	409	332	421	609	794	5
(2001).	336	409	366	421	609	794	5
El	370	409	377	421	609	794	5
proceso	380	409	414	421	609	794	5
tiene	418	409	439	421	609	794	5
tres	442	409	457	421	609	794	5
desventajas	461	409	510	421	609	794	5
que	513	409	529	421	609	794	5
afec-	533	409	553	421	609	794	5
tan	323	420	336	432	609	794	5
notablemente	341	420	400	432	609	794	5
la	405	420	412	432	609	794	5
detección	417	420	459	432	609	794	5
de	464	420	475	432	609	794	5
pequeños	479	420	521	432	609	794	5
RNAs.	526	420	553	432	609	794	5
Ocurre	323	431	354	443	609	794	5
degradación	358	431	410	443	609	794	5
por	415	431	429	443	609	794	5
UV	433	432	446	442	609	794	5
de	450	431	461	443	609	794	5
los	465	431	477	443	609	794	5
grupos	481	431	510	443	609	794	5
funciona-	514	431	553	443	609	794	5
les	323	442	334	454	609	794	5
(grupos	339	442	371	454	609	794	5
amino	375	442	401	454	609	794	5
de	406	442	416	454	609	794	5
la	420	442	428	454	609	794	5
membrana)	432	442	480	454	609	794	5
requeridos	485	442	530	454	609	794	5
para	534	442	553	454	609	794	5
el	323	453	331	465	609	794	5
apareamiento	333	453	392	465	609	794	5
de	394	453	405	465	609	794	5
bases.	408	453	434	465	609	794	5
Los	436	453	450	465	609	794	5
RNA	453	454	471	464	609	794	5
se	474	453	483	465	609	794	5
fragmentan,	486	453	536	465	609	794	5
dis-	539	453	553	465	609	794	5
minuyendo	323	464	371	476	609	794	5
su	375	464	385	476	609	794	5
longitud	389	464	424	476	609	794	5
impidiendo	428	464	476	476	609	794	5
conservar	481	464	522	476	609	794	5
las	526	464	537	476	609	794	5
se-	541	464	553	476	609	794	5
cuencias	323	475	360	487	609	794	5
completas,	364	475	410	487	609	794	5
limitándose	413	475	462	487	609	794	5
así	465	475	477	487	609	794	5
la	480	475	487	487	609	794	5
hibridación	491	475	538	487	609	794	5
de	542	475	553	487	609	794	5
las	323	486	334	498	609	794	5
sondas.	338	486	370	498	609	794	5
Como	374	486	400	498	609	794	5
última	404	486	430	498	609	794	5
desventaja,	434	486	481	498	609	794	5
tenemos	485	486	522	498	609	794	5
que	525	486	542	498	609	794	5
el	545	486	553	498	609	794	5
Figura	65	677	90	688	609	794	5
4.	93	677	100	688	609	794	5
Ilustración	103	677	144	688	609	794	5
de	146	677	155	688	609	794	5
la	158	677	165	688	609	794	5
configuración	167	677	219	688	609	794	5
estructural	222	677	264	688	609	794	5
de	266	677	275	688	609	794	5
un	278	677	287	688	609	794	5
LNA.	290	677	310	688	609	794	5
Con	312	677	328	688	609	794	5
la	330	677	337	688	609	794	5
formación	340	677	379	688	609	794	5
del	382	677	393	688	609	794	5
enlace	395	677	419	688	609	794	5
C3'-endo	422	677	456	688	609	794	5
el	459	677	465	688	609	794	5
nucleótido	468	677	509	688	609	794	5
permanece	511	677	553	688	609	794	5
con	65	688	79	699	609	794	5
configuración	81	688	133	699	609	794	5
A	135	688	141	699	609	794	5
o	142	688	147	699	609	794	5
N,	149	688	158	699	609	794	5
forma	160	688	183	699	609	794	5
estructural	185	688	227	699	609	794	5
en	229	688	238	699	609	794	5
la	239	688	246	699	609	794	5
que	248	688	262	699	609	794	5
se	264	688	271	699	609	794	5
encuentra	273	688	311	699	609	794	5
el	313	688	319	699	609	794	5
RNA	321	688	339	699	609	794	5
naturalmente.	341	688	395	699	609	794	5
Imagen	396	688	424	699	609	794	5
tomada	426	688	456	699	609	794	5
y	458	688	461	699	609	794	5
modificada	463	688	506	699	609	794	5
de	508	688	517	699	609	794	5
(Wengel,	519	688	553	699	609	794	5
2009).	65	699	90	710	609	794	5
Estandarización	66	730	126	741	609	794	5
de	128	730	137	741	609	794	5
un	139	730	149	741	609	794	5
protocolo	151	730	188	741	609	794	5
para	191	730	208	741	609	794	5
Northern	210	731	240	741	609	794	5
blot	242	731	255	741	609	794	5
no	257	730	267	741	609	794	5
radioactivo	269	730	311	741	609	794	5
127	538	729	554	741	609	794	5
número	57	57	90	68	609	794	6
de	94	57	105	68	609	794	6
bases	109	57	132	68	609	794	6
involucradas	136	57	190	68	609	794	6
no	194	57	205	68	609	794	6
puede	209	57	236	68	609	794	6
ser	240	57	252	68	609	794	6
contro-	256	57	286	68	609	794	6
lado	57	68	75	79	609	794	6
en	78	68	89	79	609	794	6
la	92	68	99	79	609	794	6
reacción	103	68	139	79	609	794	6
inducida	143	68	179	79	609	794	6
por	182	68	197	79	609	794	6
UV,	200	68	217	79	609	794	6
por	220	68	235	79	609	794	6
esto	238	68	256	79	609	794	6
podría	259	68	286	79	609	794	6
ocurrir	57	79	85	90	609	794	6
un	89	79	100	90	609	794	6
entrecruzamiento	104	79	179	90	609	794	6
excesivo,	183	79	222	90	609	794	6
reduciendo	227	79	275	90	609	794	6
la	279	79	286	90	609	794	6
disponibilidad	57	90	116	101	609	794	6
de	120	90	131	101	609	794	6
bases	135	90	159	101	609	794	6
para	163	90	182	101	609	794	6
la	187	90	194	101	609	794	6
hibridación	198	90	246	101	609	794	6
con	250	90	266	101	609	794	6
una	271	90	286	101	609	794	6
sonda	57	101	82	112	609	794	6
complementaria.	85	101	156	112	609	794	6
zaciones,	315	57	354	68	609	794	6
a	357	57	362	68	609	794	6
la	365	57	373	68	609	794	6
creación	376	57	412	68	609	794	6
de	415	57	426	68	609	794	6
nuevos	429	57	460	68	609	794	6
protocolos	463	57	509	68	609	794	6
y	512	57	517	68	609	794	6
meto-	520	57	544	68	609	794	6
dologías	315	68	350	79	609	794	6
que	353	68	369	79	609	794	6
puedan	371	68	404	79	609	794	6
ser	406	68	419	79	609	794	6
consideradas	421	68	477	79	609	794	6
en	479	68	490	79	609	794	6
el	492	68	500	79	609	794	6
desarrollo	502	68	544	79	609	794	6
de	315	79	325	90	609	794	6
investigaciones	328	79	392	90	609	794	6
de	395	79	406	90	609	794	6
este	409	79	426	90	609	794	6
tipo.	429	79	448	90	609	794	6
A	57	118	63	129	609	794	6
pesar	66	118	89	129	609	794	6
de	92	118	103	129	609	794	6
lo	106	118	114	129	609	794	6
anterior	117	118	150	129	609	794	6
el	153	118	160	129	609	794	6
entrecruzamiento	163	118	238	129	609	794	6
entre	241	118	263	129	609	794	6
RNA	266	118	286	129	609	794	6
y	57	129	61	140	609	794	6
membrana	65	129	111	140	609	794	6
inducido	114	129	151	140	609	794	6
por	155	129	169	140	609	794	6
UV	173	129	187	140	609	794	6
es	190	129	199	140	609	794	6
rápido,	202	129	232	140	609	794	6
poco	236	129	257	140	609	794	6
costo-	261	129	286	140	609	794	6
so	57	140	66	151	609	794	6
y	70	140	75	151	609	794	6
eficiente	79	140	115	151	609	794	6
para	118	140	137	151	609	794	6
RNA	141	140	161	151	609	794	6
con	165	140	181	151	609	794	6
más	184	140	201	151	609	794	6
de	205	140	216	151	609	794	6
70nt	219	140	239	151	609	794	6
Gurman	243	140	278	151	609	794	6
S	281	140	286	151	609	794	6
Pall	57	151	72	162	609	794	6
&	75	151	82	162	609	794	6
Hamilton	86	151	125	162	609	794	6
(2008).	129	151	159	162	609	794	6
Sin	163	151	176	162	609	794	6
embargo	180	151	218	162	609	794	6
lo	221	151	229	162	609	794	6
ideal	233	151	253	162	609	794	6
para	257	151	275	162	609	794	6
la	279	151	286	162	609	794	6
detección	57	162	99	173	609	794	6
por	103	162	117	173	609	794	6
hibridación	122	162	169	173	609	794	6
de	173	162	184	173	609	794	6
pequeños	188	162	230	173	609	794	6
RNAs,	234	162	261	173	609	794	6
debe	265	162	286	173	609	794	6
ser	57	173	69	184	609	794	6
el	72	173	80	184	609	794	6
acoplamiento	83	173	141	184	609	794	6
de	144	173	155	184	609	794	6
la	159	173	166	184	609	794	6
secuencia	169	173	211	184	609	794	6
de	214	173	225	184	609	794	6
forma	228	173	253	184	609	794	6
tal	257	173	267	184	609	794	6
que	270	173	286	184	609	794	6
permanezca	57	184	109	195	609	794	6
completamente	113	184	180	195	609	794	6
disponible	184	184	228	195	609	794	6
para	232	184	250	195	609	794	6
la	254	184	261	195	609	794	6
hibri-	265	184	286	195	609	794	6
dación	57	195	85	206	609	794	6
con	89	195	105	206	609	794	6
la	109	195	116	206	609	794	6
sonda	120	195	145	206	609	794	6
complementaria	149	195	218	206	609	794	6
(Gurman	222	195	260	206	609	794	6
et	263	195	271	206	609	794	6
al.,	275	195	286	206	609	794	6
2008;	57	206	81	217	609	794	6
Gurman	85	206	120	217	609	794	6
et	123	206	131	217	609	794	6
al.,	134	206	146	217	609	794	6
2007).	152	206	180	217	609	794	6
El	183	206	190	217	609	794	6
entrecruzamiento	193	206	268	217	609	794	6
por	272	206	286	217	609	794	6
medio	57	217	84	228	609	794	6
del	86	217	99	228	609	794	6
extremo	102	217	137	228	609	794	6
5´	140	217	151	228	609	794	6
(diferentes	154	217	198	228	609	794	6
modificaciones	201	217	265	228	609	794	6
pue-	268	217	286	228	609	794	6
den	57	228	73	239	609	794	6
encontrarse	76	228	126	239	609	794	6
en	129	228	140	239	609	794	6
el	143	228	151	239	609	794	6
extremo	154	228	189	239	609	794	6
3´,	192	228	205	239	609	794	6
por	209	228	223	239	609	794	6
esto	226	228	244	239	609	794	6
se	247	228	257	239	609	794	6
prefie-	260	228	286	239	609	794	6
re	57	239	65	250	609	794	6
el	69	239	76	250	609	794	6
5´	80	239	91	250	609	794	6
para	95	239	113	250	609	794	6
un	117	239	128	250	609	794	6
entrecruzamiento)	132	239	210	250	609	794	6
de	214	239	225	250	609	794	6
los	229	239	240	250	609	794	6
pequeños	244	239	286	250	609	794	6
RNAs,	57	250	83	261	609	794	6
y	87	250	92	261	609	794	6
no	96	250	107	261	609	794	6
a	111	250	116	261	609	794	6
partir	120	250	142	261	609	794	6
de	146	250	157	261	609	794	6
las	161	250	172	261	609	794	6
bases	176	250	199	261	609	794	6
nitrogenadas	203	250	258	261	609	794	6
como	262	250	286	261	609	794	6
sucede	57	261	87	272	609	794	6
usando	90	261	120	272	609	794	6
UV,	123	261	139	272	609	794	6
es	142	261	151	272	609	794	6
una	154	261	170	272	609	794	6
alternativa.	172	261	219	272	609	794	6
Este	221	261	238	272	609	794	6
tipo	241	261	257	272	609	794	6
de	260	261	271	272	609	794	6
en-	274	261	286	272	609	794	6
trecruzamiento	57	272	121	283	609	794	6
es	125	272	134	283	609	794	6
posible	137	272	168	283	609	794	6
realizarlo	171	272	210	283	609	794	6
usando	213	272	244	283	609	794	6
1-	247	272	255	283	609	794	6
Ethyl-3	258	272	286	283	609	794	6
(3-dimetilaminopropil)	57	283	150	294	609	794	6
Carboniimida	154	283	212	294	609	794	6
(	216	283	219	294	609	794	6
EDC	219	284	236	294	609	794	6
),	236	283	241	294	609	794	6
compues-	245	283	286	294	609	794	6
to	57	294	65	305	609	794	6
que	68	294	85	305	609	794	6
previamente	88	294	140	305	609	794	6
ha	143	294	154	305	609	794	6
sido	157	294	174	305	609	794	6
usado	177	294	203	305	609	794	6
para	206	294	224	305	609	794	6
entrecruzar	227	294	276	305	609	794	6
el	279	294	286	305	609	794	6
extremo	57	305	92	316	609	794	6
5´	95	305	106	316	609	794	6
de	109	305	120	316	609	794	6
oligonucleótidos	124	305	194	316	609	794	6
sintéticos	197	305	237	316	609	794	6
en	240	305	251	316	609	794	6
diferen-	254	305	286	316	609	794	6
tes	57	316	69	327	609	794	6
substratos	72	316	115	327	609	794	6
sólidos	118	316	147	327	609	794	6
Gurman	150	316	185	327	609	794	6
Singh	188	316	212	327	609	794	6
Pall	215	316	229	327	609	794	6
et	233	316	240	327	609	794	6
al.	243	316	253	327	609	794	6
(2007).	256	316	286	327	609	794	6
El	57	327	64	338	609	794	6
uso	66	327	81	338	609	794	6
del	83	327	96	338	609	794	6
EDC	99	328	116	338	609	794	6
en	118	327	129	338	609	794	6
la	131	327	138	338	609	794	6
inmovilización	141	327	202	338	609	794	6
del	204	327	217	338	609	794	6
RNA	220	328	238	338	609	794	6
en	240	327	251	338	609	794	6
la	253	327	260	338	609	794	6
mem-	262	327	286	338	609	794	6
brana	57	338	81	349	609	794	6
dirigido	85	338	117	349	609	794	6
a	121	338	125	349	609	794	6
la	129	338	136	349	609	794	6
detección	140	338	182	349	609	794	6
de	186	338	197	349	609	794	6
miRNA	200	338	231	349	609	794	6
surge	235	338	258	349	609	794	6
como	262	338	286	349	609	794	6
una	57	349	72	360	609	794	6
alternativa	76	349	119	360	609	794	6
que	123	349	139	360	609	794	6
mejora	142	349	172	360	609	794	6
de	175	349	186	360	609	794	6
manera	189	349	221	360	609	794	6
notable	224	349	256	360	609	794	6
la	259	349	266	360	609	794	6
sen-	270	349	286	360	609	794	6
sibilidad	57	360	91	371	609	794	6
en	94	360	104	371	609	794	6
la	107	360	114	371	609	794	6
detección	117	360	159	371	609	794	6
de	161	360	172	371	609	794	6
estas	174	360	195	371	609	794	6
pequeñas	198	360	239	371	609	794	6
moléculas.	241	360	286	371	609	794	6
Los	315	120	329	131	609	794	6
autores	334	120	365	131	609	794	6
agradecen	369	120	414	131	609	794	6
al	418	120	426	131	609	794	6
Departamento	430	120	492	131	609	794	6
Administra-	497	120	544	131	609	794	6
tivo	315	131	330	142	609	794	6
de	336	131	346	142	609	794	6
Ciencia	351	131	383	142	609	794	6
Tecnología	388	131	435	142	609	794	6
e	440	131	445	142	609	794	6
Innovación	450	131	497	142	609	794	6
-	502	131	505	142	609	794	6
COLCIEN-	505	132	544	142	609	794	6
CIAS	315	143	334	153	609	794	6
-	334	142	336	153	609	794	6
por	340	142	354	153	609	794	6
su	358	142	367	153	609	794	6
apoyo	371	142	398	153	609	794	6
en	402	142	412	153	609	794	6
la	416	142	423	153	609	794	6
realización	427	142	473	153	609	794	6
de	477	142	487	153	609	794	6
este	491	142	508	153	609	794	6
trabajo,	512	142	544	153	609	794	6
mediante	315	153	354	164	609	794	6
la	357	153	364	164	609	794	6
financiación	366	153	417	164	609	794	6
del	420	153	433	164	609	794	6
proyecto	435	153	473	164	609	794	6
111554531621.	476	153	544	164	609	794	6
NCP	315	165	333	175	609	794	6
tuvo	336	164	355	175	609	794	6
financiación	359	164	410	175	609	794	6
también	414	164	449	175	609	794	6
de	453	164	463	175	609	794	6
Colciencias	467	164	516	175	609	794	6
como	520	164	544	175	609	794	6
Joven	315	175	339	186	609	794	6
Investigadora,	344	175	403	186	609	794	6
durante	407	175	440	186	609	794	6
el	445	175	452	186	609	794	6
período	457	175	491	186	609	794	6
2010-2011.	495	175	544	186	609	794	6
JCGG	315	187	337	197	609	794	6
agradece	341	186	380	197	609	794	6
a	384	186	389	197	609	794	6
la	392	186	399	197	609	794	6
Universidad	403	186	454	197	609	794	6
de	457	186	468	197	609	794	6
Antioquia,	472	186	515	197	609	794	6
por	519	186	533	197	609	794	6
la	537	186	544	197	609	794	6
concesión	315	197	358	208	609	794	6
de	360	197	371	208	609	794	6
su	374	197	383	208	609	794	6
Dedicación	385	197	434	208	609	794	6
Exclusiva	436	197	474	208	609	794	6
2014-2015	477	197	523	208	609	794	6
para	526	197	544	208	609	794	6
la	315	208	322	219	609	794	6
Facultad	325	208	360	219	609	794	6
de	363	208	374	219	609	794	6
Medicina.	376	208	418	219	609	794	6
Marcaje	57	386	92	399	609	794	6
de	95	386	105	399	609	794	6
sondas	108	386	137	399	609	794	6
El	57	404	64	415	609	794	6
análisis	68	404	98	415	609	794	6
de	102	404	113	415	609	794	6
transferencia	117	404	173	415	609	794	6
de	177	404	188	415	609	794	6
Northern	192	404	230	415	609	794	6
blot	234	404	251	415	609	794	6
usando	255	404	286	415	609	794	6
radioisótopos	57	415	116	426	609	794	6
es	120	415	129	426	609	794	6
la	133	415	140	426	609	794	6
metodología	145	415	199	426	609	794	6
usada	204	415	229	426	609	794	6
actualmente	233	415	286	426	609	794	6
para	57	426	76	437	609	794	6
la	80	426	87	437	609	794	6
detección	91	426	134	437	609	794	6
de	138	426	149	437	609	794	6
sRNAs,	153	426	184	437	609	794	6
sin	188	426	200	437	609	794	6
embargo,	204	426	245	437	609	794	6
esta	249	426	267	437	609	794	6
téc-	271	426	286	437	609	794	6
nica	57	437	74	448	609	794	6
generalmente	79	437	139	448	609	794	6
es	143	437	152	448	609	794	6
dispendiosa,	157	437	211	448	609	794	6
costosa,	216	437	251	448	609	794	6
implica	255	437	286	448	609	794	6
riesgos	57	448	87	459	609	794	6
ambientales	92	448	144	459	609	794	6
y	148	448	153	459	609	794	6
laborales,	158	448	199	459	609	794	6
adicionalmente	204	448	271	459	609	794	6
en	276	448	286	459	609	794	6
nuestro	57	459	89	470	609	794	6
país	94	459	111	470	609	794	6
existe	115	459	140	470	609	794	6
una	144	459	160	470	609	794	6
justificada	164	459	208	470	609	794	6
y	212	459	217	470	609	794	6
seria	221	459	241	470	609	794	6
exigencia	246	459	286	470	609	794	6
para	57	470	76	481	609	794	6
no	78	470	89	481	609	794	6
promover	92	470	134	481	609	794	6
el	137	470	144	481	609	794	6
uso	147	470	162	481	609	794	6
de	164	470	175	481	609	794	6
radioisótopos.	178	470	239	481	609	794	6
Como	241	470	268	481	609	794	6
una	270	470	286	481	609	794	6
alternativa,	57	481	104	492	609	794	6
el	107	481	114	492	609	794	6
sistema	117	481	149	492	609	794	6
de	152	481	163	492	609	794	6
marcaje	165	481	200	492	609	794	6
(DIG)-Digoxigenina	202	481	286	492	609	794	6
basa	57	492	76	503	609	794	6
su	80	492	90	503	609	794	6
sistema	94	492	126	503	609	794	6
de	130	492	140	503	609	794	6
detección	144	492	187	503	609	794	6
en	191	492	202	503	609	794	6
el	206	492	213	503	609	794	6
proceso	217	492	252	503	609	794	6
de	256	492	267	503	609	794	6
qui-	271	492	286	503	609	794	6
mioluminiscencia,	57	503	134	514	609	794	6
lo	139	503	147	514	609	794	6
que	151	503	168	514	609	794	6
genera	172	503	202	514	609	794	6
varias	207	503	231	514	609	794	6
ventajas	236	503	271	514	609	794	6
en	276	503	286	514	609	794	6
comparación	57	514	113	525	609	794	6
a	117	514	122	525	609	794	6
las	126	514	137	525	609	794	6
técnicas	141	514	176	525	609	794	6
de	179	514	190	525	609	794	6
marcado	194	514	232	525	609	794	6
radioactivo,	236	514	286	525	609	794	6
como:	57	525	84	536	609	794	6
alta	89	525	105	536	609	794	6
sensibilidad,	110	525	163	536	609	794	6
tiempos	168	525	202	536	609	794	6
cortos	208	525	235	536	609	794	6
de	240	525	251	536	609	794	6
exposi-	256	525	286	536	609	794	6
ción,	57	536	78	547	609	794	6
vida	81	536	99	547	609	794	6
útil	102	536	115	547	609	794	6
más	119	536	136	547	609	794	6
larga,	139	536	163	547	609	794	6
y	166	536	171	547	609	794	6
mayor	174	536	201	547	609	794	6
seguridad	205	536	247	547	609	794	6
(Ramkis-	250	536	286	547	609	794	6
soon	57	547	78	558	609	794	6
et	81	547	89	558	609	794	6
al.,	92	547	103	558	609	794	6
2006).	106	547	134	558	609	794	6
Conclusión	57	570	109	583	609	794	6
La	57	588	66	599	609	794	6
creciente	70	588	109	599	609	794	6
necesidad	112	588	155	599	609	794	6
e	159	588	164	599	609	794	6
interés	167	588	195	599	609	794	6
de	199	588	209	599	609	794	6
identificar,	213	588	257	599	609	794	6
detec-	260	588	286	599	609	794	6
tar,	57	599	70	610	609	794	6
caracterizar	74	599	123	610	609	794	6
y	127	599	132	610	609	794	6
validar	135	599	163	610	609	794	6
nuevos	166	599	197	610	609	794	6
sRNAs,	200	599	231	610	609	794	6
ha	234	599	244	610	609	794	6
ido	248	599	261	610	609	794	6
de	265	599	276	610	609	794	6
la	279	599	286	610	609	794	6
mano	57	610	81	621	609	794	6
con	84	610	100	621	609	794	6
la	104	610	111	621	609	794	6
optimización	114	610	170	621	609	794	6
y	173	610	178	621	609	794	6
mejora	181	610	211	621	609	794	6
de	214	610	225	621	609	794	6
las	228	610	239	621	609	794	6
metodolo-	243	610	286	621	609	794	6
gías	57	621	73	632	609	794	6
utilizadas	77	621	117	632	609	794	6
para	121	621	140	632	609	794	6
tales	144	621	163	632	609	794	6
fines,	168	621	190	632	609	794	6
dándose	194	621	230	632	609	794	6
lugar	235	621	256	632	609	794	6
a	260	621	265	632	609	794	6
pro-	270	621	286	632	609	794	6
tocolos	57	632	88	643	609	794	6
como	92	632	117	643	609	794	6
el	121	632	129	643	609	794	6
descrito	133	632	167	643	609	794	6
previamente.	171	632	226	643	609	794	6
El	231	632	238	643	609	794	6
conocer	242	632	277	643	609	794	6
y	281	632	286	643	609	794	6
entender	57	643	95	654	609	794	6
los	99	643	111	654	609	794	6
fundamentos	115	643	170	654	609	794	6
teóricos	174	643	208	654	609	794	6
por	212	643	227	654	609	794	6
los	231	643	243	654	609	794	6
cuales	247	643	273	654	609	794	6
se	277	643	286	654	609	794	6
optimizan	57	654	99	665	609	794	6
protocolos	101	654	147	665	609	794	6
como	149	654	174	665	609	794	6
el	176	654	184	665	609	794	6
descrito	186	654	220	665	609	794	6
en	222	654	232	665	609	794	6
este	235	654	252	665	609	794	6
trabajo,	254	654	286	665	609	794	6
aporta	57	665	84	676	609	794	6
al	87	665	95	676	609	794	6
desarrollo,	98	665	142	676	609	794	6
planteamiento	146	665	207	676	609	794	6
de	210	665	221	676	609	794	6
nuevas	224	665	254	676	609	794	6
optimi-	257	665	286	676	609	794	6
128	57	729	73	741	609	794	6
Agradecimientos	315	103	394	116	609	794	6
Referencias	315	232	369	245	609	794	6
Gomes,	315	249	341	258	609	794	6
A.	344	249	351	258	609	794	6
Q.,	353	249	364	258	609	794	6
Nolasco,	366	249	396	258	609	794	6
S.,	398	249	406	258	609	794	6
&	409	249	414	258	609	794	6
Soares,	416	249	441	258	609	794	6
H.	443	249	451	258	609	794	6
(2013).	454	249	478	258	609	794	6
Non-coding	480	249	520	258	609	794	6
RNAs:	523	249	544	258	609	794	6
multi-tasking	332	258	374	267	609	794	6
molecules	376	258	410	267	609	794	6
in	412	258	418	267	609	794	6
the	420	258	431	267	609	794	6
cell.	433	258	446	267	609	794	6
International	448	258	490	267	609	794	6
Journal	492	258	515	267	609	794	6
of	517	258	523	267	609	794	6
Mole-	525	258	544	267	609	794	6
cular	332	267	348	276	609	794	6
Sciences,	350	267	380	276	609	794	6
14(8),	383	267	402	276	609	794	6
16010–39.	405	267	442	276	609	794	6
Kim,	315	277	330	286	609	794	6
S.	332	277	338	286	609	794	6
W.,	340	277	352	286	609	794	6
Li,	354	277	362	286	609	794	6
Z.,	364	277	373	286	609	794	6
Moore,	376	277	401	286	609	794	6
P.	403	277	409	286	609	794	6
S.,	412	277	419	286	609	794	6
Monaghan,	422	277	460	286	609	794	6
a	463	277	467	286	609	794	6
P.,	469	277	477	286	609	794	6
Chang,	480	277	504	286	609	794	6
Y.,	506	277	514	286	609	794	6
Nichols,	517	277	544	286	609	794	6
M.,	332	286	343	295	609	794	6
&	345	286	350	295	609	794	6
John,	352	286	370	295	609	794	6
B.	372	286	378	295	609	794	6
(2010).	380	286	405	295	609	794	6
A	407	286	412	295	609	794	6
sensitive	414	286	443	295	609	794	6
non-radioactive	445	286	498	295	609	794	6
northern	500	286	529	295	609	794	6
blot	531	286	544	295	609	794	6
method	332	295	358	304	609	794	6
to	361	295	368	304	609	794	6
detect	371	295	392	304	609	794	6
small	395	295	413	304	609	794	6
RNAs.	416	295	437	304	609	794	6
Nucleic	440	295	465	304	609	794	6
Acids	468	295	486	304	609	794	6
Research,	489	295	521	304	609	794	6
38(7),	524	295	544	304	609	794	6
e98.	332	304	346	313	609	794	6
Lee,	315	314	329	323	609	794	6
R.	332	314	338	323	609	794	6
C.,	342	314	351	323	609	794	6
Feinbaum,	354	314	390	323	609	794	6
R.	393	314	400	323	609	794	6
L.,	403	314	410	323	609	794	6
&	414	314	419	323	609	794	6
Ambros,	422	314	451	323	609	794	6
V.	454	314	461	323	609	794	6
(1993).	465	314	489	323	609	794	6
The	492	314	505	323	609	794	6
C.	508	314	515	323	609	794	6
elegans	519	314	544	323	609	794	6
heterochronic	332	323	379	332	609	794	6
gene	382	323	399	332	609	794	6
lin-4	403	323	417	332	609	794	6
encodes	420	323	449	332	609	794	6
small	452	323	469	332	609	794	6
RNAs	472	323	492	332	609	794	6
with	495	323	510	332	609	794	6
antisense	513	323	544	332	609	794	6
complementarity	332	332	389	341	609	794	6
to	391	332	398	341	609	794	6
lin-14.	400	332	421	341	609	794	6
Cell,	423	332	438	341	609	794	6
75,	440	332	451	341	609	794	6
843–854.	453	332	486	341	609	794	6
Pall,	315	342	328	351	609	794	6
G.	331	342	339	351	609	794	6
S.,	342	342	350	351	609	794	6
Codony-Servat,	353	342	405	351	609	794	6
C.,	408	342	417	351	609	794	6
Byrne,	420	342	442	351	609	794	6
J.,	445	342	451	351	609	794	6
Ritchie,	454	342	479	351	609	794	6
L.,	482	342	489	351	609	794	6
&	492	342	498	351	609	794	6
Hamilton,	501	342	534	351	609	794	6
A.	537	342	544	351	609	794	6
(2007).	332	351	356	360	609	794	6
Carbodiimide-mediated	359	351	439	360	609	794	6
cross-linking	442	351	483	360	609	794	6
of	486	351	493	360	609	794	6
RNA	496	351	512	360	609	794	6
to	515	351	522	360	609	794	6
nylon	525	351	544	360	609	794	6
membranes	332	360	372	369	609	794	6
improves	374	360	405	369	609	794	6
the	407	360	418	369	609	794	6
detection	421	360	453	369	609	794	6
of	455	360	462	369	609	794	6
siRNA,	464	360	487	369	609	794	6
miRNA	489	360	514	369	609	794	6
and	516	360	529	369	609	794	6
piR-	531	360	544	369	609	794	6
NA	332	369	343	378	609	794	6
by	345	369	354	378	609	794	6
northern	356	369	385	378	609	794	6
blot.	387	369	402	378	609	794	6
Nucleic	405	369	430	378	609	794	6
Acids	432	369	450	378	609	794	6
Research,	453	369	485	378	609	794	6
35(8),	487	369	507	378	609	794	6
e60.	509	369	524	378	609	794	6
Pall,	315	379	328	389	609	794	6
G.	331	379	339	389	609	794	6
S.,	341	379	349	389	609	794	6
&	351	379	356	389	609	794	6
Hamilton,	358	379	392	389	609	794	6
A.	394	379	401	389	609	794	6
J.	403	379	407	389	609	794	6
(2008).	410	379	434	389	609	794	6
Improved	436	379	469	389	609	794	6
northern	471	379	500	389	609	794	6
blot	502	379	516	389	609	794	6
method	518	379	544	389	609	794	6
for	332	388	341	398	609	794	6
enhanced	345	388	379	398	609	794	6
detection	383	388	415	398	609	794	6
of	419	388	426	398	609	794	6
small	430	388	448	398	609	794	6
RNA.	452	388	470	398	609	794	6
Nature	474	389	497	398	609	794	6
Protocols,	501	389	534	398	609	794	6
3,	538	388	544	398	609	794	6
1077–1084.	332	397	373	407	609	794	6
Petersen,	315	408	346	417	609	794	6
M.,	350	408	361	417	609	794	6
Bondensgaard,	364	408	415	417	609	794	6
K.,	419	408	427	417	609	794	6
Wengel,	431	408	459	417	609	794	6
J.,	463	408	469	417	609	794	6
&	473	408	478	417	609	794	6
Peter	482	408	500	417	609	794	6
Jacobsen,	503	408	536	417	609	794	6
J.	540	408	544	417	609	794	6
(2002).	332	417	356	426	609	794	6
Locked	359	417	384	426	609	794	6
nucleic	387	417	411	426	609	794	6
acid	414	417	428	426	609	794	6
(LNA)	431	417	451	426	609	794	6
recognition	454	417	492	426	609	794	6
of	495	417	502	426	609	794	6
RNA:	505	417	523	426	609	794	6
NMR	526	417	544	426	609	794	6
solution	332	426	359	435	609	794	6
structures	361	426	394	435	609	794	6
of	397	426	404	435	609	794	6
LNA:	406	426	424	435	609	794	6
RNA	426	426	442	435	609	794	6
hybrids.	445	426	471	435	609	794	6
Journal	474	426	497	435	609	794	6
of	500	426	507	435	609	794	6
the	509	426	520	435	609	794	6
Ameri-	522	426	544	435	609	794	6
can	332	435	343	444	609	794	6
Chemical	346	435	377	444	609	794	6
Society,	379	435	405	444	609	794	6
124,	407	435	422	444	609	794	6
5974–5982.	424	435	466	444	609	794	6
Ramkissoon,	315	445	357	454	609	794	6
S.	360	445	366	454	609	794	6
H.,	368	445	378	454	609	794	6
Mainwaring,	380	445	422	454	609	794	6
L.	424	445	430	454	609	794	6
A.,	432	445	441	454	609	794	6
Sloand,	444	445	469	454	609	794	6
E.	471	445	477	454	609	794	6
M.,	479	445	490	454	609	794	6
Young,	492	445	516	454	609	794	6
N.	519	445	526	454	609	794	6
S.,	529	445	537	454	609	794	6
&	539	445	544	454	609	794	6
Kajigaya,	332	454	362	463	609	794	6
S.	364	454	370	463	609	794	6
(2006).	373	454	397	463	609	794	6
Nonisotopic	400	454	442	463	609	794	6
detection	444	454	476	463	609	794	6
of	479	454	486	463	609	794	6
microRNA	488	454	524	463	609	794	6
using	526	454	544	463	609	794	6
digoxigenin	332	463	371	472	609	794	6
labeled	374	463	399	472	609	794	6
RNA	402	463	418	472	609	794	6
probes.	422	463	447	472	609	794	6
Molecular	450	463	484	472	609	794	6
and	487	463	500	472	609	794	6
Cellular	503	463	528	472	609	794	6
Pro-	531	463	544	472	609	794	6
bes,	332	472	345	481	609	794	6
20,	347	472	358	481	609	794	6
1–4.	360	472	375	481	609	794	6
Sambrook,	315	482	351	491	609	794	6
J.,	353	482	359	491	609	794	6
Fritsch,	361	482	385	491	609	794	6
E.	387	482	393	491	609	794	6
F.,	395	482	403	491	609	794	6
&	405	482	410	491	609	794	6
Maniatis,	412	482	443	491	609	794	6
T.	445	482	451	491	609	794	6
(2001).	453	482	477	491	609	794	6
Molecular	479	482	514	491	609	794	6
Cloning:	516	482	544	491	609	794	6
A	332	491	337	500	609	794	6
Laboratory	339	491	376	500	609	794	6
Manual.	378	491	405	500	609	794	6
Vol.	408	491	421	500	609	794	6
3.	423	491	430	500	609	794	6
Cold	432	491	448	500	609	794	6
Spring	450	491	472	500	609	794	6
Harbor	474	491	498	500	609	794	6
Laboratory.	500	491	539	500	609	794	6
Van	315	501	328	510	609	794	6
Wolfswinkel,	330	501	374	510	609	794	6
J.	376	501	380	510	609	794	6
C.,	382	501	391	510	609	794	6
&	393	501	399	510	609	794	6
Ketting,	401	501	427	510	609	794	6
R.	429	501	435	510	609	794	6
F.	437	501	443	510	609	794	6
(2010).	445	501	469	510	609	794	6
The	471	501	484	510	609	794	6
role	486	501	499	510	609	794	6
of	501	501	508	510	609	794	6
small	510	501	527	510	609	794	6
non-	529	501	544	510	609	794	6
coding	332	510	355	519	609	794	6
RNAs	358	510	377	519	609	794	6
in	380	510	386	519	609	794	6
genome	389	510	416	519	609	794	6
stability	419	510	445	519	609	794	6
and	447	510	460	519	609	794	6
chromatin	463	510	497	519	609	794	6
organization.	500	510	544	519	609	794	6
Journal	332	519	355	528	609	794	6
of	357	519	364	528	609	794	6
Cell	366	519	379	528	609	794	6
Science,	381	519	408	528	609	794	6
123(Pt	411	519	433	528	609	794	6
11),	435	519	449	528	609	794	6
1825–39.	451	519	484	528	609	794	6
Várallyay,	315	529	347	538	609	794	6
E.,	349	529	357	538	609	794	6
Burgyán,	359	529	389	538	609	794	6
J.,	391	529	397	538	609	794	6
&	399	529	404	538	609	794	6
Havelda,	406	529	436	538	609	794	6
Z.	438	529	445	538	609	794	6
(2008).	447	529	472	538	609	794	6
MicroRNA	474	529	510	538	609	794	6
detection	512	529	544	538	609	794	6
by	332	538	340	547	609	794	6
northern	343	538	372	547	609	794	6
blotting	375	538	401	547	609	794	6
using	404	538	421	547	609	794	6
locked	424	538	447	547	609	794	6
nucleic	450	538	474	547	609	794	6
acid	477	538	491	547	609	794	6
probes.	493	538	519	547	609	794	6
Nature	522	538	544	547	609	794	6
Protocols,	332	547	364	556	609	794	6
3(2),	367	547	382	556	609	794	6
190–6.	384	547	408	556	609	794	6
Wang,	315	557	337	566	609	794	6
Z.,	342	557	351	566	609	794	6
&	355	557	361	566	609	794	6
Yang,	366	557	385	566	609	794	6
B.	390	557	396	566	609	794	6
(2010).	401	557	425	566	609	794	6
MicroRNA	430	557	467	566	609	794	6
Expression	471	557	507	566	609	794	6
detection	512	557	544	566	609	794	6
methods.	332	566	363	575	609	794	6
Heidelberg:	365	566	405	575	609	794	6
Springer-Verlag.	407	566	461	575	609	794	6
Wengel,	315	576	343	585	609	794	6
J.	345	576	350	585	609	794	6
(1999).	352	576	377	585	609	794	6
Synthesis	379	576	410	585	609	794	6
of	413	576	419	585	609	794	6
3'-C-and	422	576	450	585	609	794	6
4'-C-Branched	452	576	500	585	609	794	6
Oligodeoxy-	503	576	544	585	609	794	6
nucleotides	332	585	371	594	609	794	6
and	375	585	388	594	609	794	6
the	392	585	403	594	609	794	6
Development	407	585	454	594	609	794	6
of	458	585	465	594	609	794	6
Locked	469	585	494	594	609	794	6
Nucleic	498	585	524	594	609	794	6
Acid	529	585	544	594	609	794	6
(LNA).	332	594	353	603	609	794	6
Acc.	356	594	370	603	609	794	6
Chem.	372	594	394	603	609	794	6
Res.,	396	594	412	603	609	794	6
32,	414	594	425	603	609	794	6
301–310.	427	594	460	603	609	794	6
Wengel,	315	604	343	614	609	794	6
J.	346	604	350	614	609	794	6
(2009).	353	604	377	614	609	794	6
Locked	380	604	405	614	609	794	6
Nucleic	407	604	433	614	609	794	6
Acid	436	604	452	614	609	794	6
Technology	454	604	494	614	609	794	6
:	496	604	498	614	609	794	6
A	501	604	506	614	609	794	6
brief	509	604	525	614	609	794	6
over-	527	604	544	614	609	794	6
view.	332	613	349	623	609	794	6
Exiqon,	352	614	376	623	609	794	6
7.	378	613	384	623	609	794	6
Wightman,	315	624	352	633	609	794	6
B.,	354	624	363	633	609	794	6
Ha,	365	624	377	633	609	794	6
I.,	379	624	385	633	609	794	6
&	388	624	393	633	609	794	6
Ruvkun,	395	624	423	633	609	794	6
G.	425	624	433	633	609	794	6
(1993).	436	624	460	633	609	794	6
Posttranscriptional	462	624	525	633	609	794	6
regu-	527	624	544	633	609	794	6
lation	332	633	350	642	609	794	6
of	352	633	359	642	609	794	6
the	361	633	372	642	609	794	6
heterochronic	374	633	421	642	609	794	6
gene	423	633	440	642	609	794	6
lin-14	441	633	460	642	609	794	6
by	462	633	470	642	609	794	6
lin-4	472	633	486	642	609	794	6
mediates	488	633	519	642	609	794	6
tempo-	520	633	544	642	609	794	6
ral	332	642	340	651	609	794	6
pattern	342	642	366	651	609	794	6
formation	369	642	402	651	609	794	6
in	404	642	410	651	609	794	6
C.	412	642	420	651	609	794	6
elegans.	422	642	449	651	609	794	6
Cell,	451	642	466	651	609	794	6
75,	468	642	479	651	609	794	6
855–862.	481	642	514	651	609	794	6
Winter,	315	652	340	661	609	794	6
J.,	342	652	348	661	609	794	6
Jung,	351	652	368	661	609	794	6
S.,	370	652	378	661	609	794	6
Keller,	380	652	401	661	609	794	6
S.,	404	652	411	661	609	794	6
Gregory,	414	652	444	661	609	794	6
R.	446	652	453	661	609	794	6
I.,	455	652	461	661	609	794	6
&	463	652	469	661	609	794	6
Diederichs,	471	652	509	661	609	794	6
S.	512	652	518	661	609	794	6
(2009).	520	652	544	661	609	794	6
Many	332	661	351	670	609	794	6
roads	354	661	373	670	609	794	6
to	376	661	383	670	609	794	6
maturity:	386	661	416	670	609	794	6
microRNA	419	661	455	670	609	794	6
biogenesis	458	661	493	670	609	794	6
pathways	496	661	528	670	609	794	6
and	532	661	544	670	609	794	6
their	332	670	347	679	609	794	6
regulation.	349	670	385	679	609	794	6
Nature	387	670	410	679	609	794	6
Cell	412	670	425	679	609	794	6
Biology,	427	670	454	679	609	794	6
11(3),	456	670	476	679	609	794	6
228–34.	478	670	506	679	609	794	6
Rev.	298	730	313	741	609	794	6
Colomb.	315	730	348	741	609	794	6
Biotecnol.	350	730	388	741	609	794	6
Vol.	390	730	405	741	609	794	6
XVII	407	730	422	741	609	794	6
No.	424	730	438	741	609	794	6
2	440	730	445	741	609	794	6
Diciembre	450	730	488	741	609	794	6
2015	490	730	509	741	609	794	6
123-128	514	730	546	741	609	794	6
