Original	438	27	485	45	581	788	1
Breve	488	27	521	45	581	788	1
Rev	376	51	392	61	581	788	1
Peru	395	51	416	61	581	788	1
Med	419	51	438	61	581	788	1
Exp	441	51	456	61	581	788	1
Salud	458	51	485	61	581	788	1
Publica	487	51	521	61	581	788	1
CLONACIÓN	73	97	172	115	581	788	1
DE	176	97	198	115	581	788	1
SECUENCIAS	202	97	299	115	581	788	1
DE	303	97	325	115	581	788	1
ALFAVIRUS	329	97	412	115	581	788	1
Y	416	97	426	115	581	788	1
FLAVIVIRUS	430	97	520	115	581	788	1
PARA	100	114	139	132	581	788	1
SU	143	114	163	132	581	788	1
USO	167	114	200	132	581	788	1
COMO	204	114	256	132	581	788	1
CONTROLES	260	114	356	132	581	788	1
POSITIVOS	360	114	445	132	581	788	1
EN	449	114	471	132	581	788	1
EL	475	114	492	132	581	788	1
DIAGNÓSTICO	188	131	304	149	581	788	1
MOLECULAR	308	131	405	149	581	788	1
Daría	133	157	158	170	581	788	1
Camacho	160	157	203	170	581	788	1
1,a	203	158	211	166	581	788	1
,	211	157	214	170	581	788	1
Jesús	217	157	243	170	581	788	1
Reyes	246	157	274	170	581	788	1
1,b	274	158	282	166	581	788	1
,	282	157	285	170	581	788	1
Leticia	288	157	317	170	581	788	1
Franco	319	157	351	170	581	788	1
2,c	353	158	361	166	581	788	1
,	361	157	364	170	581	788	1
Guillermo	367	157	409	170	581	788	1
Comach	412	157	450	170	581	788	1
1,d,	450	158	459	166	581	788	1
Elizabeth	257	170	298	184	581	788	1
Ferrer	301	170	328	184	581	788	1
1,e	328	171	336	179	581	788	1
RESUMEN	85	194	128	205	581	788	1
Palabras	85	306	117	316	581	788	1
clave:	119	306	140	316	581	788	1
Alphavirus;	142	306	181	316	581	788	1
Flavivirus;	183	306	219	316	581	788	1
Clonación,	222	306	259	316	581	788	1
molecular;	262	306	299	316	581	788	1
Diagnóstico	301	306	343	316	581	788	1
(fuente:	345	306	372	316	581	788	1
DeCS	374	306	396	316	581	788	1
BIREME).	398	306	433	316	581	788	1
CLONING	81	332	148	347	581	788	1
ALPHAVIRUS	152	332	235	347	581	788	1
AND	238	332	269	347	581	788	1
FLAVIVIRUS	273	332	350	347	581	788	1
SEQUENCES	354	332	433	347	581	788	1
FOR	436	332	464	347	581	788	1
USE	467	332	492	347	581	788	1
AS	496	332	511	347	581	788	1
POSITIVE	123	347	185	362	581	788	1
CONTROLS	188	347	263	362	581	788	1
IN	267	347	284	362	581	788	1
MOLECULAR	287	347	370	362	581	788	1
DIAGNOSTICS	374	347	469	362	581	788	1
ABSTRACT	85	375	130	385	581	788	1
Keywords:	85	486	122	497	581	788	1
Alphavirus;	124	486	163	497	581	788	1
Flavivirus;	165	486	201	497	581	788	1
Cloning,	203	486	232	497	581	788	1
molecular;	234	486	271	497	581	788	1
Diagnosis,	273	486	310	497	581	788	1
(source:	312	486	340	497	581	788	1
MeSH	343	486	365	497	581	788	1
NLM)	367	486	386	497	581	788	1
INTRODUCCIÓN	62	506	167	520	581	788	1
Los	62	531	77	543	581	788	1
flavivirus	79	531	114	543	581	788	1
y	116	531	121	543	581	788	1
alfavirus	123	531	156	543	581	788	1
conforman	159	531	201	543	581	788	1
un	203	531	213	543	581	788	1
grupo	215	531	238	543	581	788	1
de	241	531	251	543	581	788	1
agentes	253	531	285	543	581	788	1
virales	62	542	88	554	581	788	1
causantes	93	542	134	554	581	788	1
de	139	542	149	554	581	788	1
enfermedades	153	542	211	554	581	788	1
en	215	542	225	554	581	788	1
humanos	230	542	267	554	581	788	1
(1,2)	272	543	282	550	581	788	1
.	282	542	285	554	581	788	1
Los	62	554	77	566	581	788	1
primeros	81	554	116	566	581	788	1
pertenecen	120	554	165	566	581	788	1
a	169	554	174	566	581	788	1
la	178	554	185	566	581	788	1
familia	189	554	215	566	581	788	1
Flaviviridae,	218	554	266	566	581	788	1
son	270	554	285	566	581	788	1
transmitidos	62	565	111	577	581	788	1
por	115	565	128	577	581	788	1
mosquitos	133	565	174	577	581	788	1
del	178	565	190	577	581	788	1
género	195	565	223	577	581	788	1
Aedes,	227	565	255	577	581	788	1
Culex,	259	565	285	577	581	788	1
Haemagogus,	62	577	118	588	581	788	1
entre	123	576	143	588	581	788	1
otros.	148	576	170	588	581	788	1
Destacan,	175	576	215	588	581	788	1
el	220	576	227	588	581	788	1
virus	231	576	250	588	581	788	1
dengue	255	576	285	588	581	788	1
(DENV),	62	588	96	600	581	788	1
el	101	588	108	600	581	788	1
virus	112	588	131	600	581	788	1
de	136	588	146	600	581	788	1
la	151	588	158	600	581	788	1
encefalitis	162	588	202	600	581	788	1
japonesa	207	588	243	600	581	788	1
(JEV),	248	588	273	600	581	788	1
el	278	588	285	600	581	788	1
virus	62	599	81	611	581	788	1
de	83	599	93	611	581	788	1
la	95	599	102	611	581	788	1
encefalitis	105	599	145	611	581	788	1
de	147	599	157	611	581	788	1
San	159	599	175	611	581	788	1
Luis	177	599	193	611	581	788	1
(SLEV),	195	599	227	611	581	788	1
fiebre	229	599	251	611	581	788	1
amarilla	253	599	285	611	581	788	1
(YFV)	62	611	86	623	581	788	1
y	90	611	95	623	581	788	1
el	99	611	106	623	581	788	1
virus	111	611	130	623	581	788	1
del	134	611	146	623	581	788	1
Nilo	151	611	166	623	581	788	1
Occidental	171	611	213	623	581	788	1
(WNV)	218	611	245	623	581	788	1
(1)	249	612	255	619	581	788	1
.	255	611	258	623	581	788	1
En	262	611	273	623	581	788	1
la	278	611	285	623	581	788	1
región	62	622	87	634	581	788	1
de	92	622	102	634	581	788	1
las	106	622	118	634	581	788	1
Américas	122	622	160	634	581	788	1
las	164	622	176	634	581	788	1
poblaciones	180	622	228	634	581	788	1
se	233	622	242	634	581	788	1
han	247	622	262	634	581	788	1
visto	266	622	285	634	581	788	1
afectadas	62	634	101	646	581	788	1
por	104	634	117	646	581	788	1
cualquiera	120	634	162	646	581	788	1
de	164	634	174	646	581	788	1
los	177	634	189	646	581	788	1
serotipos	192	634	228	646	581	788	1
de	231	634	241	646	581	788	1
DENV	244	634	269	646	581	788	1
(3,4)	272	635	282	641	581	788	1
;	282	634	285	646	581	788	1
YFV	62	645	80	657	581	788	1
ha	84	645	94	657	581	788	1
cobrado	98	645	131	657	581	788	1
importancia	135	645	181	657	581	788	1
por	185	645	198	657	581	788	1
su	202	645	212	657	581	788	1
reemergencia	216	645	271	657	581	788	1
en	275	645	285	657	581	788	1
1	62	673	64	679	581	788	1
2	62	681	64	687	581	788	1
a	62	690	64	696	581	788	1
Sudamérica	308	506	356	518	581	788	1
y	358	506	362	518	581	788	1
África	364	506	387	518	581	788	1
(5);	389	507	397	520	581	788	1
WNV	399	506	420	518	581	788	1
ha	422	506	432	518	581	788	1
ampliado	434	506	471	518	581	788	1
su	473	506	482	518	581	788	1
distribución	485	506	530	518	581	788	1
y	308	518	312	530	581	788	1
focos	317	518	338	530	581	788	1
de	343	518	353	530	581	788	1
transmisión	358	518	404	530	581	788	1
(6)	409	518	416	525	581	788	1
.	416	518	418	530	581	788	1
En	423	518	434	530	581	788	1
2015,	438	518	460	530	581	788	1
el	464	518	471	530	581	788	1
virus	475	518	493	530	581	788	1
Zika	498	518	514	530	581	788	1
fue	518	518	530	530	581	788	1
detectado	308	529	345	541	581	788	1
en	349	529	358	541	581	788	1
Brasil	362	529	383	541	581	788	1
representando	387	529	442	541	581	788	1
una	445	529	460	541	581	788	1
amenaza	463	529	499	541	581	788	1
para	502	529	520	541	581	788	1
el	523	529	530	541	581	788	1
resto	308	540	326	552	581	788	1
de	328	540	338	552	581	788	1
los	340	540	351	552	581	788	1
países	353	540	378	552	581	788	1
de	380	540	390	552	581	788	1
la	392	540	399	552	581	788	1
región	401	540	424	552	581	788	1
(7,8)	426	541	436	548	581	788	1
.	436	540	439	552	581	788	1
Entre	308	563	328	575	581	788	1
los	330	563	341	575	581	788	1
alfavirus	343	563	374	575	581	788	1
destacan	376	563	411	575	581	788	1
los	412	563	423	575	581	788	1
virus	425	563	443	575	581	788	1
de	445	563	455	575	581	788	1
la	457	563	463	575	581	788	1
encefalitis	465	563	502	575	581	788	1
equina	504	563	530	575	581	788	1
del	308	575	319	587	581	788	1
este	323	575	339	587	581	788	1
y	342	575	347	587	581	788	1
oeste	350	575	371	587	581	788	1
(EEEV	375	575	401	587	581	788	1
y	404	575	409	587	581	788	1
WEEV),	413	575	443	587	581	788	1
Semliki	447	575	474	587	581	788	1
Forest	478	575	502	587	581	788	1
(SFV),	505	575	530	587	581	788	1
Chikungunya	308	586	357	598	581	788	1
(CHIKV)	361	586	393	598	581	788	1
y	397	586	402	598	581	788	1
O'nyong	405	586	437	598	581	788	1
nyong	441	586	465	598	581	788	1
(ONNV)	469	586	499	598	581	788	1
(2)	503	587	509	594	581	788	1
.	509	586	512	598	581	788	1
Los	516	586	530	598	581	788	1
alfavirus	308	598	341	610	581	788	1
pueden	344	598	374	610	581	788	1
causar	377	598	404	610	581	788	1
enfermedades	407	598	464	610	581	788	1
que	467	598	482	610	581	788	1
pueden	485	598	515	610	581	788	1
ser	518	598	530	610	581	788	1
fatales	308	609	334	621	581	788	1
[e.g.	337	609	355	621	581	788	1
encefalitis	358	609	398	621	581	788	1
equina	402	609	429	621	581	788	1
del	432	609	444	621	581	788	1
este	448	609	465	621	581	788	1
y	468	609	472	621	581	788	1
oeste	476	609	498	621	581	788	1
(EEE	501	609	522	621	581	788	1
y	526	609	530	621	581	788	1
EEO)],	308	621	335	633	581	788	1
Semliki	340	621	369	633	581	788	1
Forest	374	621	399	633	581	788	1
Chikungunya	429	621	482	633	581	788	1
(CHIKV)	487	621	520	633	581	788	1
y	526	621	530	633	581	788	1
O'nyong	308	632	341	644	581	788	1
nyong	343	632	367	644	581	788	1
(ONN)	369	632	395	644	581	788	1
(2)	397	633	404	640	581	788	1
.	404	632	406	644	581	788	1
Algunos	407	632	440	644	581	788	1
miembros	442	632	481	644	581	788	1
de	483	632	493	644	581	788	1
flavivirus	495	632	530	644	581	788	1
y	308	643	312	655	581	788	1
alfavirus,	315	643	351	655	581	788	1
se	355	643	364	655	581	788	1
asocian	368	643	399	655	581	788	1
a	402	643	407	655	581	788	1
brotes	410	643	435	655	581	788	1
de	439	643	449	655	581	788	1
importancia	452	643	498	655	581	788	1
para	502	643	520	655	581	788	1
la	523	643	530	655	581	788	1
Instituto	71	672	96	682	581	788	1
de	98	672	105	682	581	788	1
Investigaciones	107	672	153	682	581	788	1
Biomédicas	154	672	189	682	581	788	1
(BIOMED-UC),	191	672	240	682	581	788	1
Facultad	241	672	267	682	581	788	1
de	269	672	276	682	581	788	1
Ciencias	278	672	303	682	581	788	1
de	305	672	312	682	581	788	1
la	314	672	319	682	581	788	1
Salud,	321	672	339	682	581	788	1
Universidad	341	672	377	682	581	788	1
de	379	672	386	682	581	788	1
Carabobo.	388	672	419	682	581	788	1
Maracay,	421	672	447	682	581	788	1
Venezuela.	449	672	481	682	581	788	1
Centro	71	681	92	691	581	788	1
Nacional	94	681	121	691	581	788	1
de	122	681	129	691	581	788	1
Microbiología.	131	681	175	691	581	788	1
Instituto	177	681	203	691	581	788	1
de	204	681	211	691	581	788	1
Salud	213	681	230	691	581	788	1
Carlos	231	681	251	691	581	788	1
III.	253	681	262	691	581	788	1
Majadahonda,	264	681	307	691	581	788	1
Madrid,	308	681	333	691	581	788	1
España.	334	681	358	691	581	788	1
Master	71	689	92	699	581	788	1
en	93	689	101	699	581	788	1
Virología;	102	689	132	699	581	788	1
b	134	690	136	696	581	788	1
Licenciado	138	689	170	699	581	788	1
en	172	689	179	699	581	788	1
Bioanálisis;	181	689	215	699	581	788	1
c	218	690	220	696	581	788	1
Doctora	222	689	247	699	581	788	1
en	248	689	256	699	581	788	1
Bioquímica;	257	689	294	699	581	788	1
d	296	690	298	696	581	788	1
Master	300	689	320	699	581	788	1
of	322	689	328	699	581	788	1
Science;	330	689	354	699	581	788	1
e	356	690	357	696	581	788	1
Doctora	358	689	383	699	581	788	1
en	385	689	392	699	581	788	1
Biología	394	689	419	699	581	788	1
Molecular	420	689	451	699	581	788	1
Recibido:	71	698	99	708	581	788	1
04/07/2015	101	698	135	708	581	788	1
Aprobado:	143	698	175	708	581	788	1
06/04/2016	177	698	210	708	581	788	1
Citar	62	714	78	725	581	788	1
como:	80	714	99	725	581	788	1
Camacho	100	715	129	725	581	788	1
D,	131	715	137	725	581	788	1
Reyes	139	715	156	725	581	788	1
J,	158	715	162	725	581	788	1
Franco	163	715	184	725	581	788	1
L,	186	715	192	725	581	788	1
Comach	193	715	219	725	581	788	1
G,	220	715	227	725	581	788	1
Ferrer	229	715	247	725	581	788	1
E.	249	715	255	725	581	788	1
Clonación	256	715	287	725	581	788	1
de	289	715	296	725	581	788	1
secuencias	298	715	329	725	581	788	1
de	331	715	338	725	581	788	1
Alfavirus	340	715	367	725	581	788	1
y	369	715	372	725	581	788	1
Flavivirus	374	715	403	725	581	788	1
para	405	715	418	725	581	788	1
su	420	715	427	725	581	788	1
uso	428	715	439	725	581	788	1
como	440	715	457	725	581	788	1
controles	459	715	486	725	581	788	1
positivos	488	715	515	725	581	788	1
en	516	715	523	725	581	788	1
el	525	715	530	725	581	788	1
diagnóstico	62	723	97	733	581	788	1
molecular.	99	723	130	733	581	788	1
Rev	132	723	143	733	581	788	1
Peru	145	723	159	733	581	788	1
Med	161	723	174	733	581	788	1
Exp	176	723	188	733	581	788	1
Salud	190	723	206	733	581	788	1
Publica.	208	723	232	733	581	788	1
2016;33(2):269-73.	234	723	290	733	581	788	1
doi:	292	723	303	733	581	788	1
10.17843/rpmesp.2016.332.2101	305	723	401	733	581	788	1
269	513	757	530	769	581	788	1
Rev	51	39	66	48	581	788	2
Peru	68	39	88	48	581	788	2
Med	91	39	109	48	581	788	2
Exp	111	39	125	48	581	788	2
Salud	128	39	152	48	581	788	2
Publica.	155	39	189	48	581	788	2
2016;33(2):269-73.	191	39	257	48	581	788	2
salud	51	83	73	95	581	788	2
pública.	74	83	105	95	581	788	2
DENV	107	83	132	95	581	788	2
circula	134	83	160	95	581	788	2
en	162	83	172	95	581	788	2
Venezuela	174	83	216	95	581	788	2
desde	218	83	243	95	581	788	2
1989,	245	83	267	95	581	788	2
y	269	83	274	95	581	788	2
se	51	94	61	106	581	788	2
han	63	94	78	106	581	788	2
identificado	80	94	126	106	581	788	2
los	128	94	140	106	581	788	2
cuatro	142	94	167	106	581	788	2
serotipos	169	94	206	106	581	788	2
del	208	94	220	106	581	788	2
virus	223	94	242	106	581	788	2
(9,10)	244	95	258	102	581	788	2
.	258	94	260	106	581	788	2
En	263	94	274	106	581	788	2
relación	51	106	83	118	581	788	2
al	85	106	92	118	581	788	2
virus	95	106	114	118	581	788	2
Zika,	117	106	136	118	581	788	2
a	139	106	144	118	581	788	2
pesar	147	106	169	118	581	788	2
de	172	106	182	118	581	788	2
que	185	106	200	118	581	788	2
no	203	106	213	118	581	788	2
había	215	106	238	118	581	788	2
reportes	241	106	274	118	581	788	2
de	51	117	61	129	581	788	2
su	64	117	74	129	581	788	2
presencia,	77	117	119	129	581	788	2
su	122	117	131	129	581	788	2
identificación	135	117	187	129	581	788	2
en	190	117	200	129	581	788	2
Brasil	203	117	226	129	581	788	2
(7,8)	229	118	240	125	581	788	2
abrió	243	117	263	129	581	788	2
la	267	117	274	129	581	788	2
posibilidad	51	129	94	141	581	788	2
de	98	129	108	141	581	788	2
introducción	113	129	161	141	581	788	2
en	166	129	176	141	581	788	2
Venezuela.	180	129	225	141	581	788	2
CHIKV	229	129	257	141	581	788	2
fue	261	129	274	141	581	788	2
reconocido	51	141	95	153	581	788	2
en	99	141	109	153	581	788	2
América	112	141	145	153	581	788	2
como	148	141	170	153	581	788	2
causa	174	141	198	153	581	788	2
de	201	141	211	153	581	788	2
brotes	215	141	240	153	581	788	2
durante	243	141	274	153	581	788	2
2013	51	152	71	164	581	788	2
y	73	152	77	164	581	788	2
2014	79	152	99	164	581	788	2
(11)	101	153	110	160	581	788	2
.	110	152	112	164	581	788	2
Desde	114	152	140	164	581	788	2
entonces	142	152	178	164	581	788	2
se	180	152	190	164	581	788	2
confirmó	191	152	226	164	581	788	2
transmisión	228	152	274	164	581	788	2
local	51	164	70	176	581	788	2
en	73	164	83	176	581	788	2
más	86	164	103	176	581	788	2
de	106	164	116	176	581	788	2
43	119	164	129	176	581	788	2
países	132	164	159	176	581	788	2
y	162	164	167	176	581	788	2
territorios	170	164	207	176	581	788	2
americanos.	210	164	259	176	581	788	2
En	263	164	274	176	581	788	2
Venezuela,	51	175	96	187	581	788	2
CHIKV	98	175	126	187	581	788	2
se	128	175	138	187	581	788	2
confirmó	140	175	175	187	581	788	2
en	177	175	187	187	581	788	2
2014	190	175	210	187	581	788	2
(12)	212	176	221	183	581	788	2
.	221	175	224	187	581	788	2
Para	51	199	70	211	581	788	2
diagnosticar	72	199	120	211	581	788	2
flavivirus	122	199	157	211	581	788	2
y/o	159	199	171	211	581	788	2
alfavirus	172	199	206	211	581	788	2
es	207	199	217	211	581	788	2
indispensable	218	199	274	211	581	788	2
la	51	210	58	222	581	788	2
confirmación	61	210	112	222	581	788	2
en	114	210	124	222	581	788	2
los	127	210	138	222	581	788	2
laboratorios.	141	210	190	222	581	788	2
Se	193	210	204	222	581	788	2
han	206	210	221	222	581	788	2
desarrollado	224	210	274	222	581	788	2
metodologías,	51	222	108	234	581	788	2
entre	114	222	134	234	581	788	2
las	141	222	152	234	581	788	2
que	159	222	174	234	581	788	2
destacan	180	222	216	234	581	788	2
las	223	222	234	234	581	788	2
técnicas	241	222	274	234	581	788	2
moleculares	51	233	100	245	581	788	2
como	105	233	127	245	581	788	2
la	133	233	140	245	581	788	2
transcripción	145	233	196	245	581	788	2
reversa	202	233	232	245	581	788	2
del	237	233	249	245	581	788	2
ARN	255	233	274	245	581	788	2
seguido	51	245	83	257	581	788	2
de	86	245	96	257	581	788	2
reacción	100	245	134	257	581	788	2
en	137	245	147	257	581	788	2
cadena	151	245	181	257	581	788	2
de	184	245	194	257	581	788	2
la	198	245	205	257	581	788	2
polimerasa	209	245	253	257	581	788	2
(RT-	256	245	274	257	581	788	2
PCR),	51	257	76	269	581	788	2
para	78	257	96	269	581	788	2
amplificar	98	257	137	269	581	788	2
secuencias	139	257	184	269	581	788	2
nucleotídicas	187	257	239	269	581	788	2
con	242	257	256	269	581	788	2
una	259	257	274	269	581	788	2
sensibilidad	51	268	98	280	581	788	2
y	103	268	107	280	581	788	2
especificidad	112	268	164	280	581	788	2
elevada,	168	268	202	280	581	788	2
demostrando	207	268	259	280	581	788	2
su	264	268	274	280	581	788	2
utilidad	51	280	80	292	581	788	2
como	84	280	106	292	581	788	2
herramienta	110	280	158	292	581	788	2
diagnóstica	162	280	207	292	581	788	2
en	211	280	221	292	581	788	2
la	225	280	232	292	581	788	2
vigilancia	237	280	274	292	581	788	2
epidemiológica	51	291	111	303	581	788	2
(13-15)	116	292	133	299	581	788	2
e	137	291	142	303	581	788	2
investigación	147	291	199	303	581	788	2
(16)	203	292	213	299	581	788	2
.	213	291	215	303	581	788	2
En	220	291	231	303	581	788	2
todos	235	291	257	303	581	788	2
los	262	291	274	303	581	788	2
casos,	51	303	77	315	581	788	2
se	81	303	90	315	581	788	2
requiere	94	303	127	315	581	788	2
del	131	303	143	315	581	788	2
uso	147	303	162	315	581	788	2
de	165	303	175	315	581	788	2
controles	179	303	216	315	581	788	2
positivos	220	303	255	315	581	788	2
que	259	303	274	315	581	788	2
validen	51	315	80	327	581	788	2
los	83	315	94	327	581	788	2
ensayos.	98	315	134	327	581	788	2
Clásicamente,	137	315	194	327	581	788	2
se	197	315	207	327	581	788	2
utilizan	210	315	238	327	581	788	2
semillas	241	315	274	327	581	788	2
virales,	51	326	80	338	581	788	2
pero	82	326	100	338	581	788	2
obtenerlas	103	326	145	338	581	788	2
requiere	148	326	181	338	581	788	2
de	184	326	194	338	581	788	2
técnicas	197	326	230	338	581	788	2
laboriosas	233	326	274	338	581	788	2
y	51	338	56	350	581	788	2
costosas	64	338	99	350	581	788	2
de	108	338	118	350	581	788	2
cultivo	126	338	152	350	581	788	2
celular,	160	338	189	350	581	788	2
además	197	338	229	350	581	788	2
elevados	238	338	274	350	581	788	2
requerimientos	51	349	111	361	581	788	2
de	113	349	123	361	581	788	2
bioseguridad.	126	349	180	361	581	788	2
Una	51	373	67	385	581	788	2
alternativa,	71	373	111	385	581	788	2
para	115	373	132	385	581	788	2
la	136	373	143	385	581	788	2
obtención	147	373	183	385	581	788	2
de	188	373	197	385	581	788	2
controles	201	373	235	385	581	788	2
positivos,	239	373	273	385	581	788	2
es	51	384	60	396	581	788	2
el	65	384	72	396	581	788	2
uso	76	384	90	396	581	788	2
de	95	384	105	396	581	788	2
la	110	384	116	396	581	788	2
tecnología	121	384	159	396	581	788	2
de	164	384	174	396	581	788	2
ADN	178	384	196	396	581	788	2
recombinante	201	384	252	396	581	788	2
para	257	384	274	396	581	788	2
clonar	51	396	74	408	581	788	2
secuencias	78	396	120	408	581	788	2
específicas	125	396	167	408	581	788	2
del	171	396	183	408	581	788	2
genoma	187	396	218	408	581	788	2
de	223	396	233	408	581	788	2
diferentes	237	396	274	408	581	788	2
agentes	51	407	81	419	581	788	2
virales.	83	407	109	419	581	788	2
En	112	407	123	419	581	788	2
este	125	407	141	419	581	788	2
reporte	144	407	170	419	581	788	2
se	172	407	182	419	581	788	2
muestra	184	407	214	419	581	788	2
la	217	407	224	419	581	788	2
clonación	226	407	261	419	581	788	2
de	264	407	274	419	581	788	2
secuencias	51	419	93	431	581	788	2
del	95	419	106	431	581	788	2
alfavirus	108	419	139	431	581	788	2
CHIKV	140	419	167	431	581	788	2
y	168	419	173	431	581	788	2
los	175	419	186	431	581	788	2
flavivirus	188	419	220	431	581	788	2
zika,	222	419	239	431	581	788	2
DENV-1,	241	419	274	431	581	788	2
DENV-2,	51	431	85	443	581	788	2
DENV-3	88	431	120	443	581	788	2
y	123	431	127	443	581	788	2
DENV-4,	130	431	164	443	581	788	2
con	167	431	182	443	581	788	2
el	185	431	191	443	581	788	2
fin	195	431	204	443	581	788	2
de	207	431	217	443	581	788	2
sugerir	220	431	246	443	581	788	2
el	249	431	256	443	581	788	2
uso	259	431	274	443	581	788	2
de	51	442	61	454	581	788	2
estos	64	442	85	454	581	788	2
clones	88	442	113	454	581	788	2
como	116	442	137	454	581	788	2
controles	140	442	175	454	581	788	2
positivos	178	442	212	454	581	788	2
en	215	442	225	454	581	788	2
las	228	442	239	454	581	788	2
técnicas	242	442	274	454	581	788	2
moleculares	51	454	98	466	581	788	2
(13-16)	101	455	117	461	581	788	2
,	117	454	120	466	581	788	2
lo	123	454	130	466	581	788	2
que	133	454	148	466	581	788	2
minimizaría	151	454	195	466	581	788	2
el	199	454	205	466	581	788	2
uso	209	454	223	466	581	788	2
de	226	454	236	466	581	788	2
sistemas	239	454	274	466	581	788	2
de	51	465	61	477	581	788	2
multiplicación	65	465	117	477	581	788	2
viral,	122	465	140	477	581	788	2
que	144	465	159	477	581	788	2
además	163	465	195	477	581	788	2
de	199	465	209	477	581	788	2
ser	214	465	226	477	581	788	2
costosos	230	465	264	477	581	788	2
y	269	465	274	477	581	788	2
laboriosos	51	477	90	489	581	788	2
generan	93	477	125	489	581	788	2
riesgo	127	477	150	489	581	788	2
de	152	477	162	489	581	788	2
infección	164	477	198	489	581	788	2
en	201	477	210	489	581	788	2
el	213	477	219	489	581	788	2
personal.	222	477	257	489	581	788	2
MATERIALES	51	503	125	517	581	788	2
Y	129	503	136	517	581	788	2
MÉTODOS	139	503	202	517	581	788	2
MUESTRA	51	527	95	539	581	788	2
BIOLÓGICA	97	527	147	539	581	788	2
Estuvo	51	550	79	562	581	788	2
constituida	82	550	125	562	581	788	2
por	129	550	142	562	581	788	2
cepas	145	550	169	562	581	788	2
virales.	173	550	201	562	581	788	2
Específicamente,	205	550	274	562	581	788	2
el	51	561	58	573	581	788	2
alfavirus	61	561	94	573	581	788	2
CHIKV	97	561	125	573	581	788	2
[genotipo	128	561	165	573	581	788	2
ECSA	167	561	192	573	581	788	2
(East	194	561	215	573	581	788	2
Central	218	561	247	573	581	788	2
South	250	561	274	573	581	788	2
África),	51	573	80	585	581	788	2
cepa	83	573	102	585	581	788	2
DRC	105	573	125	585	581	788	2
1721)]	128	573	154	585	581	788	2
y	157	573	161	585	581	788	2
los	164	573	176	585	581	788	2
flavivirus	179	573	214	585	581	788	2
zika	217	573	233	585	581	788	2
[genotipo	237	573	274	585	581	788	2
africano	51	584	83	596	581	788	2
(MR766)],	90	584	130	596	581	788	2
DENV-1	137	584	170	596	581	788	2
[genotipo	177	584	214	596	581	788	2
II,	221	584	228	596	581	788	2
(Hawaii)],	236	584	274	596	581	788	2
DENV-2	51	596	84	608	581	788	2
[genotipo	89	596	126	608	581	788	2
II	131	596	136	608	581	788	2
NG	141	596	155	608	581	788	2
(New	160	596	181	608	581	788	2
Guinea)”C”],	186	596	236	608	581	788	2
DENV-3	241	596	274	608	581	788	2
[genotipo	51	607	88	619	581	788	2
II	91	607	96	619	581	788	2
(H-87)]	98	607	126	619	581	788	2
y	129	607	133	619	581	788	2
DENV-4	136	607	168	619	581	788	2
[genotipo	171	607	208	619	581	788	2
I	210	607	213	619	581	788	2
(H-241)].	215	607	251	619	581	788	2
VECTOR	51	630	88	642	581	788	2
DE	91	630	103	642	581	788	2
CLONACIÓN	106	630	159	642	581	788	2
Y	162	630	168	642	581	788	2
CEPA	170	630	194	642	581	788	2
BACTERIANA	196	630	254	642	581	788	2
Se	51	652	62	664	581	788	2
empleó	69	652	98	664	581	788	2
el	105	652	112	664	581	788	2
plásmido	119	652	155	664	581	788	2
comercial	161	652	200	664	581	788	2
pGEM®-T	206	652	247	664	581	788	2
Easy	254	652	274	664	581	788	2
(Promega),	51	663	96	675	581	788	2
diseñado	99	663	135	675	581	788	2
para	138	663	156	675	581	788	2
la	158	663	165	675	581	788	2
clonación	168	663	206	675	581	788	2
de	209	663	219	675	581	788	2
productos	221	663	261	675	581	788	2
de	264	663	274	675	581	788	2
PCR.	51	674	73	686	581	788	2
Se	75	674	86	686	581	788	2
utilizaron	89	674	125	686	581	788	2
células	128	674	156	686	581	788	2
de	158	674	168	686	581	788	2
Escherichia	171	674	218	686	581	788	2
coli	220	674	234	686	581	788	2
XL1-Blue	237	674	274	686	581	788	2
MRF`	51	685	74	697	581	788	2
(Stratagene)	77	685	127	697	581	788	2
[genotipo:	131	685	170	697	581	788	2
supE44,	174	685	207	697	581	788	2
hsdR17,	210	685	244	697	581	788	2
recA1,	248	685	274	697	581	788	2
endA1,	51	696	80	708	581	788	2
gyrA46,	83	696	114	708	581	788	2
thirelA1,	118	696	151	708	581	788	2
lacf	155	696	169	708	581	788	2
(proAB+	173	696	206	708	581	788	2
lacI	210	696	224	708	581	788	2
lacZ	227	696	244	708	581	788	2
∆M15,	248	696	274	708	581	788	2
Tn10,	51	707	74	719	581	788	2
Tet	78	707	90	719	581	788	2
r	90	708	92	715	581	788	2
],	92	707	97	719	581	788	2
para	100	707	118	719	581	788	2
la	122	707	129	719	581	788	2
multiplicación	133	707	187	719	581	788	2
y	191	707	195	719	581	788	2
mantenimiento	199	707	258	719	581	788	2
del	262	707	274	719	581	788	2
ADN	51	719	70	731	581	788	2
plasmídico	73	719	116	731	581	788	2
(ADNp).	118	719	151	731	581	788	2
270	50	757	67	769	581	788	2
Camacho	456	38	491	49	581	788	2
D	493	38	499	49	581	788	2
et	501	38	508	49	581	788	2
al.	510	38	519	49	581	788	2
PREPARACIÓN	296	83	361	95	581	788	2
DE	364	83	376	95	581	788	2
CÉLULAS	379	83	420	95	581	788	2
COMPETENTES	423	83	492	95	581	788	2
DE	495	83	507	95	581	788	2
E.	510	83	519	95	581	788	2
coli	296	94	310	106	581	788	2
XL1-BLUE	312	94	355	106	581	788	2
MRF´	357	94	380	106	581	788	2
Las	296	116	311	128	581	788	2
E.	316	116	325	128	581	788	2
coli	330	116	343	128	581	788	2
XL1B	349	116	371	128	581	788	2
criopreservadas	376	116	440	128	581	788	2
se	446	116	455	128	581	788	2
sembraron	460	116	503	128	581	788	2
en	509	116	519	128	581	788	2
placas	296	128	322	140	581	788	2
de	326	128	336	140	581	788	2
Petri	340	128	358	140	581	788	2
[LB	362	128	376	140	581	788	2
sólido	380	128	403	140	581	788	2
(triptona	407	128	440	140	581	788	2
10g/L,	444	128	469	140	581	788	2
extracto	473	128	505	140	581	788	2
de	509	128	519	140	581	788	2
levadura	296	139	331	151	581	788	2
5	333	139	338	151	581	788	2
g/L,	339	139	354	151	581	788	2
NaCl	356	139	376	151	581	788	2
5	378	139	383	151	581	788	2
g/L,	385	139	400	151	581	788	2
pH	401	139	413	151	581	788	2
7,	415	139	422	151	581	788	2
tetraciclina	424	139	467	151	581	788	2
12,5	469	139	486	151	581	788	2
µg/mL)]	488	139	519	151	581	788	2
e	296	151	301	163	581	788	2
incubadas	304	151	345	163	581	788	2
a	348	151	353	163	581	788	2
37	356	151	366	163	581	788	2
°C	369	151	379	163	581	788	2
durante	382	151	413	163	581	788	2
12	416	151	426	163	581	788	2
h.	429	151	436	163	581	788	2
Luego,	439	151	467	163	581	788	2
se	470	151	479	163	581	788	2
realizó	482	151	509	163	581	788	2
el	512	151	519	163	581	788	2
pre-inóculo	296	162	341	174	581	788	2
en	343	162	353	174	581	788	2
5	356	162	361	174	581	788	2
ml	364	162	373	174	581	788	2
de	376	162	386	174	581	788	2
medio	388	162	413	174	581	788	2
LB	415	162	426	174	581	788	2
líquido	429	162	455	174	581	788	2
(triptona	458	162	491	174	581	788	2
10g/L,	494	162	519	174	581	788	2
extracto	296	173	328	185	581	788	2
de	331	173	341	185	581	788	2
levadura	344	173	378	185	581	788	2
5	381	173	386	185	581	788	2
g/L,	388	173	403	185	581	788	2
NaCl	406	173	426	185	581	788	2
5	429	173	434	185	581	788	2
g/L,	436	173	452	185	581	788	2
pH	454	173	466	185	581	788	2
7).	468	173	479	185	581	788	2
Se	482	173	493	185	581	788	2
diluyó	495	173	519	185	581	788	2
1	296	185	301	197	581	788	2
ml	304	185	314	197	581	788	2
de	317	185	327	197	581	788	2
cultivo	330	185	356	197	581	788	2
en	359	185	369	197	581	788	2
50	372	185	382	197	581	788	2
ml	385	185	395	197	581	788	2
de	398	185	408	197	581	788	2
medio	411	185	435	197	581	788	2
LB	439	185	450	197	581	788	2
e	453	185	458	197	581	788	2
incubó	461	185	487	197	581	788	2
a	490	185	495	197	581	788	2
37°C	499	185	519	197	581	788	2
con	296	196	311	208	581	788	2
agitación	313	196	349	208	581	788	2
de	351	196	361	208	581	788	2
250	364	196	379	208	581	788	2
rpm.	381	196	399	208	581	788	2
El	401	196	409	208	581	788	2
cultivo	411	196	437	208	581	788	2
fue	439	196	452	208	581	788	2
centrifugado	454	196	503	208	581	788	2
por	506	196	519	208	581	788	2
15	296	208	306	220	581	788	2
min	309	208	323	220	581	788	2
a	326	208	331	220	581	788	2
3015	334	208	354	220	581	788	2
rpm	357	208	372	220	581	788	2
a	375	208	380	220	581	788	2
4	383	208	388	220	581	788	2
°C	391	208	401	220	581	788	2
y	403	208	408	220	581	788	2
el	411	208	418	220	581	788	2
sedimento	420	208	462	220	581	788	2
resuspendido	465	208	519	220	581	788	2
con	296	219	311	231	581	788	2
CaCl	314	219	334	231	581	788	2
2	334	226	337	233	581	788	2
100	341	219	356	231	581	788	2
mM.	360	219	377	231	581	788	2
Esta	381	219	399	231	581	788	2
mezcla	402	219	431	231	581	788	2
fue	434	219	447	231	581	788	2
centrifugada	450	219	500	231	581	788	2
y	504	219	508	231	581	788	2
el	512	219	519	231	581	788	2
sedimento	296	231	338	243	581	788	2
resuspendido	340	231	394	243	581	788	2
en	396	231	406	243	581	788	2
CaCl	408	231	428	243	581	788	2
2	428	238	431	244	581	788	2
100	433	231	448	243	581	788	2
mM-Glicerol	450	231	499	243	581	788	2
20%	501	231	519	243	581	788	2
para	296	242	314	254	581	788	2
su	317	242	326	254	581	788	2
almacenamiento	329	242	395	254	581	788	2
a	397	242	402	254	581	788	2
-80	405	242	418	254	581	788	2
°C	420	242	430	254	581	788	2
(17)	433	243	442	250	581	788	2
.	442	242	445	254	581	788	2
AMPLIFICACIÓN	296	265	366	277	581	788	2
DE	373	265	386	277	581	788	2
FRAGMENTOS	393	265	456	277	581	788	2
GENÓMICOS	463	265	519	277	581	788	2
CORRESPONDIENTES	296	277	393	289	581	788	2
A	399	277	405	289	581	788	2
CHIKV	410	277	438	289	581	788	2
Y	443	277	449	289	581	788	2
A	454	277	460	289	581	788	2
CEPAS	466	277	496	289	581	788	2
DEL	501	277	519	289	581	788	2
GÉNERO	296	288	335	300	581	788	2
FLAVIVIRUS	338	288	390	300	581	788	2
EXTRACCIÓN	296	311	353	323	581	788	2
DE	355	311	367	323	581	788	2
ARN:	368	311	389	323	581	788	2
se	390	311	400	323	581	788	2
obtuvieron	401	311	441	323	581	788	2
a	443	311	448	323	581	788	2
partir	449	311	469	323	581	788	2
de	470	311	480	323	581	788	2
140	482	311	496	323	581	788	2
μL	498	311	508	323	581	788	2
de	509	311	519	323	581	788	2
cultivos	296	322	325	334	581	788	2
virales	327	322	352	334	581	788	2
mediante	355	322	390	334	581	788	2
el	393	322	400	334	581	788	2
uso	403	322	417	334	581	788	2
del	420	322	431	334	581	788	2
estuche	434	322	464	334	581	788	2
de	467	322	477	334	581	788	2
extracción	480	322	519	334	581	788	2
viral	296	334	312	346	581	788	2
de	314	334	324	346	581	788	2
ARN	326	334	344	346	581	788	2
QIAamp	346	334	378	346	581	788	2
QIAGEN®	381	334	421	346	581	788	2
(QIAGEN	423	334	460	346	581	788	2
Inc.;	462	334	478	346	581	788	2
California,	480	334	519	346	581	788	2
E.U.A),	296	345	324	357	581	788	2
siguiendo	329	345	366	357	581	788	2
las	371	345	382	357	581	788	2
instrucciones	388	345	437	357	581	788	2
del	443	345	454	357	581	788	2
fabricante.	460	345	499	357	581	788	2
Los	505	345	519	357	581	788	2
productos	296	356	334	368	581	788	2
obtenidos	338	356	375	368	581	788	2
fueron	379	356	404	368	581	788	2
resuspendidos	408	356	464	368	581	788	2
en	468	356	477	368	581	788	2
60	481	356	491	368	581	788	2
μL	495	356	505	368	581	788	2
de	509	356	519	368	581	788	2
agua	296	368	316	380	581	788	2
libre	318	368	334	380	581	788	2
de	336	368	346	380	581	788	2
nucleasas	348	368	387	380	581	788	2
y	389	368	393	380	581	788	2
almacenados	395	368	447	380	581	788	2
en	449	368	459	380	581	788	2
alícuotas	461	368	495	380	581	788	2
de	497	368	507	380	581	788	2
10	509	368	519	380	581	788	2
μL	296	379	306	391	581	788	2
cada	308	379	327	391	581	788	2
una	329	379	344	391	581	788	2
a	346	379	351	391	581	788	2
-80	353	379	366	391	581	788	2
°C.	368	379	380	391	581	788	2
Alfavirus	382	379	417	391	581	788	2
(CHIKV):	419	379	455	391	581	788	2
se	458	379	468	391	581	788	2
amplificó	470	379	506	391	581	788	2
un	509	379	519	391	581	788	2
fragmento	296	391	337	403	581	788	2
de	340	391	350	403	581	788	2
481	354	391	369	403	581	788	2
pb	373	391	383	403	581	788	2
correspondiente	387	391	451	403	581	788	2
al	455	391	462	403	581	788	2
gen	466	391	481	403	581	788	2
nsP4	484	391	505	403	581	788	2
de	509	391	519	403	581	788	2
acuerdo	296	402	329	414	581	788	2
a	331	402	336	414	581	788	2
una	338	402	353	414	581	788	2
metodología	355	402	405	414	581	788	2
previamente	407	402	457	414	581	788	2
descrita	459	402	490	414	581	788	2
(13)	493	403	502	410	581	788	2
con	504	402	519	414	581	788	2
modificaciones.	296	413	358	425	581	788	2
En	361	413	372	425	581	788	2
la	374	413	381	425	581	788	2
primera	384	413	414	425	581	788	2
reacción	416	413	451	425	581	788	2
se	453	413	462	425	581	788	2
utilizó	465	413	488	425	581	788	2
MgSO	490	413	516	425	581	788	2
4	516	420	519	427	581	788	2
(2mM);	296	425	325	437	581	788	2
y	327	425	332	437	581	788	2
en	334	425	344	437	581	788	2
la	347	425	354	437	581	788	2
segunda	357	425	391	437	581	788	2
reacción	394	425	428	437	581	788	2
MgCl	431	425	452	437	581	788	2
2	452	432	454	439	581	788	2
(2mM),	457	425	486	437	581	788	2
dNTP´s	488	425	519	437	581	788	2
(0,08	296	436	317	448	581	788	2
mM)	321	436	339	448	581	788	2
y	344	436	349	448	581	788	2
cebadores	353	436	395	448	581	788	2
(8	400	436	408	448	581	788	2
pmoles).	413	436	447	448	581	788	2
Las	452	436	466	448	581	788	2
condiciones	471	436	519	448	581	788	2
restantes	296	448	333	460	581	788	2
fueron	336	448	361	460	581	788	2
iguales	364	448	392	460	581	788	2
a	395	448	400	460	581	788	2
las	402	448	414	460	581	788	2
descritas	416	448	452	460	581	788	2
originalmente.	455	448	511	460	581	788	2
Flavivirus	296	470	333	482	581	788	2
(Zika):	337	470	362	482	581	788	2
en	366	470	376	482	581	788	2
este	380	470	396	482	581	788	2
caso	400	470	419	482	581	788	2
también	423	470	454	482	581	788	2
se	458	470	467	482	581	788	2
empleó	471	470	500	482	581	788	2
una	504	470	519	482	581	788	2
metodología	296	482	345	494	581	788	2
para	348	482	365	494	581	788	2
la	368	482	375	494	581	788	2
obtención	378	482	416	494	581	788	2
de	419	482	429	494	581	788	2
un	431	482	441	494	581	788	2
fragmento	444	482	484	494	581	788	2
de	486	482	496	494	581	788	2
1385	499	482	519	494	581	788	2
pb	296	493	306	505	581	788	2
de	308	493	318	505	581	788	2
la	320	493	327	505	581	788	2
región	329	493	354	505	581	788	2
NS5	356	493	374	505	581	788	2
(14)	376	494	385	501	581	788	2
con	387	493	401	505	581	788	2
modificaciones.	404	493	464	505	581	788	2
En	467	493	478	505	581	788	2
la	480	493	487	505	581	788	2
primera	489	493	519	505	581	788	2
reacción	296	505	330	517	581	788	2
se	332	505	341	517	581	788	2
empleó	344	505	373	517	581	788	2
MgSO	375	505	400	517	581	788	2
4	400	511	403	518	581	788	2
(2mM),	405	505	433	517	581	788	2
cebadores	436	505	477	517	581	788	2
(50	479	505	492	517	581	788	2
pmol);	494	505	519	517	581	788	2
y	296	516	301	528	581	788	2
en	304	516	314	528	581	788	2
la	317	516	324	528	581	788	2
segunda	328	516	361	528	581	788	2
reacción	365	516	398	528	581	788	2
MgCl	402	516	422	528	581	788	2
2	422	523	425	530	581	788	2
(2mM)	428	516	454	528	581	788	2
y	457	516	462	528	581	788	2
dNTP´s	465	516	495	528	581	788	2
(0,08	499	516	519	528	581	788	2
mM).	296	527	316	539	581	788	2
El	319	527	327	539	581	788	2
resto	329	527	349	539	581	788	2
de	351	527	361	539	581	788	2
las	363	527	375	539	581	788	2
condiciones	377	527	423	539	581	788	2
permanecieron	426	527	485	539	581	788	2
iguales.	487	527	517	539	581	788	2
DENV-1,	296	550	331	562	581	788	2
DENV-2,	335	550	370	562	581	788	2
DENV-3	373	550	406	562	581	788	2
y	409	550	414	562	581	788	2
DENV-4	418	550	450	562	581	788	2
(C/prM-M):	454	550	497	562	581	788	2
para	501	550	519	562	581	788	2
la	296	562	303	574	581	788	2
amplificación	309	562	361	574	581	788	2
del	366	562	378	574	581	788	2
fragmento	384	562	425	574	581	788	2
C/prM-M	430	562	465	574	581	788	2
de	471	562	481	574	581	788	2
511	486	562	501	574	581	788	2
pb,	506	562	519	574	581	788	2
común	296	573	323	585	581	788	2
para	327	573	345	585	581	788	2
todos	348	573	370	585	581	788	2
los	373	573	385	585	581	788	2
serotipos	388	573	424	585	581	788	2
de	428	573	438	585	581	788	2
DENV	441	573	466	585	581	788	2
se	469	573	479	585	581	788	2
siguieron	482	573	519	585	581	788	2
instrucciones	296	584	349	596	581	788	2
descritas	351	584	387	596	581	788	2
(15)	390	585	399	592	581	788	2
.	399	584	402	596	581	788	2
DENV-1,	296	607	330	619	581	788	2
DENV-2,	334	607	368	619	581	788	2
DENV-3	372	607	403	619	581	788	2
y	407	607	412	619	581	788	2
DENV-4	416	607	447	619	581	788	2
(5´UTR-C):	451	607	494	619	581	788	2
estos	498	607	519	619	581	788	2
fragmentos	296	619	340	631	581	788	2
se	344	619	353	631	581	788	2
obtuvieron	358	619	398	631	581	788	2
conforme	403	619	439	631	581	788	2
a	443	619	448	631	581	788	2
las	453	619	464	631	581	788	2
instrucciones	468	619	519	631	581	788	2
descritas	296	630	331	642	581	788	2
para	333	630	350	642	581	788	2
obtener	352	630	381	642	581	788	2
productos	383	630	421	642	581	788	2
de	423	630	433	642	581	788	2
275	435	630	449	642	581	788	2
pb	451	630	461	642	581	788	2
(DENV-1),	463	630	502	642	581	788	2
300	504	630	519	642	581	788	2
pb	296	641	306	653	581	788	2
(DENV-2),	308	641	348	653	581	788	2
274	350	641	365	653	581	788	2
pb	367	641	377	653	581	788	2
(DENV-3)	379	641	416	653	581	788	2
y	418	641	423	653	581	788	2
339	425	641	439	653	581	788	2
pb	441	641	451	653	581	788	2
(DENV-4)	453	641	491	653	581	788	2
(16)	492	642	501	649	581	788	2
.	501	641	503	653	581	788	2
Los	296	664	310	676	581	788	2
productos	313	664	350	676	581	788	2
de	353	664	362	676	581	788	2
las	365	664	376	676	581	788	2
RT-PCR	378	664	410	676	581	788	2
fueron	413	664	437	676	581	788	2
analizados	440	664	481	676	581	788	2
en	483	664	493	676	581	788	2
gel	495	664	507	676	581	788	2
de	509	664	519	676	581	788	2
agarosa	296	676	327	688	581	788	2
al	331	676	337	688	581	788	2
2	341	676	346	688	581	788	2
%,	349	676	359	688	581	788	2
con	362	676	376	688	581	788	2
bromuro	380	676	412	688	581	788	2
de	415	676	425	688	581	788	2
etidio	428	676	449	688	581	788	2
0,1	452	676	464	688	581	788	2
µg/mL	467	676	491	688	581	788	2
(18)	494	676	503	683	581	788	2
.	503	676	506	688	581	788	2
La	509	676	519	688	581	788	2
visualización	296	687	346	699	581	788	2
se	350	687	359	699	581	788	2
realizó	362	687	388	699	581	788	2
en	392	687	402	699	581	788	2
un	405	687	415	699	581	788	2
Gel	418	687	432	699	581	788	2
Doc	436	687	451	699	581	788	2
1000	455	687	475	699	581	788	2
(programa	478	687	519	699	581	788	2
Multi-Analyst	296	698	347	710	581	788	2
Bio-Rad	351	698	383	710	581	788	2
®	383	699	387	706	581	788	2
).	387	698	393	710	581	788	2
Las	397	698	412	710	581	788	2
bandas	417	698	446	710	581	788	2
de	450	698	460	710	581	788	2
ADNc	465	698	488	710	581	788	2
de	493	698	503	710	581	788	2
las	507	698	519	710	581	788	2
primeras	296	710	331	722	581	788	2
reacciones	338	710	381	722	581	788	2
(para	389	710	410	722	581	788	2
obtener	417	710	447	722	581	788	2
los	455	710	467	722	581	788	2
fragmentos	474	710	519	722	581	788	2
grandes,	296	721	331	733	581	788	2
donde	339	721	364	733	581	788	2
están	373	721	394	733	581	788	2
contenidas	403	721	446	733	581	788	2
los	454	721	466	733	581	788	2
fragmentos	475	721	519	733	581	788	2
Diagnóstico	404	38	446	49	581	788	3
de	448	38	457	49	581	788	3
alfavirus	460	38	490	49	581	788	3
y	492	38	496	49	581	788	3
flavivirus	499	38	530	49	581	788	3
Rev	62	39	77	48	581	788	3
Peru	80	39	99	48	581	788	3
Med	102	39	120	48	581	788	3
Exp	123	39	136	48	581	788	3
Salud	139	39	164	48	581	788	3
Publica.	166	39	200	48	581	788	3
2016;33(2):269-73.	202	39	269	48	581	788	3
pequeños	62	83	101	95	581	788	3
de	106	83	116	95	581	788	3
las	120	83	131	95	581	788	3
segundas	136	83	174	95	581	788	3
reacciones	179	83	221	95	581	788	3
en	226	83	236	95	581	788	3
el	240	83	247	95	581	788	3
caso	252	83	270	95	581	788	3
de	275	83	285	95	581	788	3
las	62	94	74	106	581	788	3
RT-PCR	77	94	110	106	581	788	3
anidadas)	113	94	151	106	581	788	3
fueron	154	94	180	106	581	788	3
cortadas	183	94	216	106	581	788	3
a	219	94	224	106	581	788	3
partir	228	94	248	106	581	788	3
del	251	94	262	106	581	788	3
gel	265	94	277	106	581	788	3
y	280	94	285	106	581	788	3
purificadas	62	106	105	118	581	788	3
empleando	107	106	151	118	581	788	3
Wizard	153	106	181	118	581	788	3
®	183	106	189	118	581	788	3
SV	191	106	203	118	581	788	3
Gel	205	106	219	118	581	788	3
and	221	106	236	118	581	788	3
PCR	238	106	257	118	581	788	3
Clean-	259	106	285	118	581	788	3
Up	62	117	74	129	581	788	3
System	77	117	106	129	581	788	3
(Promega	110	117	148	129	581	788	3
Corporation,	152	117	200	129	581	788	3
Madison,	203	117	239	129	581	788	3
Wisconsin,	242	117	285	129	581	788	3
USA)	62	129	84	141	581	788	3
de	86	129	96	141	581	788	3
acuerdo	98	129	130	141	581	788	3
a	132	129	137	141	581	788	3
las	140	129	151	141	581	788	3
indicaciones	153	129	202	141	581	788	3
del	204	129	216	141	581	788	3
fabricante.	218	129	260	141	581	788	3
CONSTRUCCIÓN	62	152	136	164	581	788	3
DE	138	152	151	164	581	788	3
LOS	153	152	171	164	581	788	3
ADN	174	152	193	164	581	788	3
RECOMBINANTES	195	152	274	164	581	788	3
Se	62	175	73	187	581	788	3
empleó	76	175	106	187	581	788	3
T4	109	175	119	187	581	788	3
ADN	122	175	141	187	581	788	3
ligasa	144	175	168	187	581	788	3
para	171	175	189	187	581	788	3
ligar	192	175	209	187	581	788	3
los	212	175	224	187	581	788	3
fragmentos	227	175	272	187	581	788	3
de	275	175	285	187	581	788	3
ADNc	62	187	86	199	581	788	3
amplificados	91	187	141	199	581	788	3
y	146	187	150	199	581	788	3
pGEM®-T	155	187	195	199	581	788	3
Easy.	200	187	222	199	581	788	3
La	227	187	237	199	581	788	3
mezcla	242	187	270	199	581	788	3
de	275	187	285	199	581	788	3
reacción	62	198	96	210	581	788	3
se	101	198	111	210	581	788	3
realizó	116	198	142	210	581	788	3
en	147	198	157	210	581	788	3
una	162	198	177	210	581	788	3
relación	182	198	214	210	581	788	3
molar	218	198	241	210	581	788	3
plásmido-	246	198	285	210	581	788	3
ADNc	62	210	86	222	581	788	3
(1:3).	93	210	114	222	581	788	3
El	121	210	129	222	581	788	3
tampón	136	210	166	222	581	788	3
de	173	210	183	222	581	788	3
las	189	210	201	222	581	788	3
reacciones	208	210	251	222	581	788	3
estuvo	258	210	285	222	581	788	3
constituido	62	221	105	233	581	788	3
por	108	221	121	233	581	788	3
Tris-HCl	124	221	156	233	581	788	3
30	159	221	169	233	581	788	3
mM	172	221	187	233	581	788	3
(pH	190	221	204	233	581	788	3
7,8),	207	221	225	233	581	788	3
MgCl	228	221	249	233	581	788	3
2	249	228	252	235	581	788	3
10	255	221	265	233	581	788	3
mM,	267	221	285	233	581	788	3
DTT	62	233	80	245	581	788	3
10	82	233	92	245	581	788	3
mM,	95	233	112	245	581	788	3
ATP	114	233	131	245	581	788	3
1	133	233	138	245	581	788	3
mM.	141	233	158	245	581	788	3
La	161	233	171	245	581	788	3
incubación	173	233	216	245	581	788	3
se	219	233	228	245	581	788	3
realizó	231	233	257	245	581	788	3
a	260	233	265	245	581	788	3
4	267	233	272	245	581	788	3
°C	275	233	285	245	581	788	3
durante	62	245	93	257	581	788	3
12	95	245	105	257	581	788	3
h.	108	245	115	257	581	788	3
TRANSFORMACIÓN	62	268	148	280	581	788	3
DE	153	268	165	280	581	788	3
CÉLULAS	170	268	211	280	581	788	3
COMPETENTES	216	268	285	280	581	788	3
DE	62	280	75	292	581	788	3
E.	82	280	90	292	581	788	3
coli	97	280	111	292	581	788	3
XL1BLUE	118	280	157	292	581	788	3
MRF`	164	280	187	292	581	788	3
CON	194	280	214	292	581	788	3
EL	221	280	232	292	581	788	3
PLÁSMIDO	238	280	285	292	581	788	3
RECOMBINANTE	62	291	135	303	581	788	3
pGEM®-T	137	291	178	303	581	788	3
Easy	181	291	201	303	581	788	3
Las	62	314	76	326	581	788	3
mezclas	78	314	109	326	581	788	3
de	111	314	120	326	581	788	3
ligación	122	314	150	326	581	788	3
fueron	152	314	176	326	581	788	3
añadidas	177	314	211	326	581	788	3
a	213	314	218	326	581	788	3
200	220	314	234	326	581	788	3
µL	236	314	246	326	581	788	3
de	247	314	257	326	581	788	3
células	259	314	285	326	581	788	3
competentes	62	326	110	338	581	788	3
para	113	326	130	338	581	788	3
transformarlas	133	326	186	338	581	788	3
mediante	189	326	224	338	581	788	3
choque	227	326	254	338	581	788	3
térmico	258	326	285	338	581	788	3
(30	62	337	75	349	581	788	3
min	78	337	92	349	581	788	3
4	95	337	100	349	581	788	3
°C,	103	337	115	349	581	788	3
90	118	337	128	349	581	788	3
seg	131	337	144	349	581	788	3
42	148	337	157	349	581	788	3
°C,	160	337	172	349	581	788	3
2	175	337	180	349	581	788	3
min	184	337	197	349	581	788	3
4	201	337	206	349	581	788	3
°C).	209	337	223	349	581	788	3
A	226	337	232	349	581	788	3
cada	235	337	253	349	581	788	3
tubo	256	337	273	349	581	788	3
se	276	337	285	349	581	788	3
agregaron	62	349	101	361	581	788	3
800	103	349	117	361	581	788	3
µL	119	349	129	361	581	788	3
de	131	349	141	361	581	788	3
medio	143	349	166	361	581	788	3
LB	169	349	179	361	581	788	3
precalentado	182	349	230	361	581	788	3
e	232	349	237	361	581	788	3
incubados	239	349	278	361	581	788	3
a	280	349	285	361	581	788	3
37	62	360	72	372	581	788	3
°C,	74	360	86	372	581	788	3
220	88	360	102	372	581	788	3
rpm	104	360	119	372	581	788	3
durante	121	360	149	372	581	788	3
1	151	360	156	372	581	788	3
hora.	158	360	177	372	581	788	3
Con	179	360	195	372	581	788	3
espátula	197	360	229	372	581	788	3
de	230	360	240	372	581	788	3
se	276	360	285	372	581	788	3
sembraron	62	372	102	384	581	788	3
200	105	372	119	384	581	788	3
µL	121	372	131	384	581	788	3
de	133	372	143	384	581	788	3
las	145	372	156	384	581	788	3
preparaciones	158	372	211	384	581	788	3
en	213	372	223	384	581	788	3
placas	225	372	249	384	581	788	3
con	252	372	266	384	581	788	3
agar	268	372	285	384	581	788	3
LB-Ampicilina	308	83	358	95	581	788	3
100	360	83	374	95	581	788	3
µg/mL	376	83	400	95	581	788	3
pretratadas	401	83	443	95	581	788	3
(X-Gal	445	83	469	95	581	788	3
20	471	83	481	95	581	788	3
mg/mL,IPTG	482	83	530	95	581	788	3
1	308	94	313	106	581	788	3
M,LB	316	94	336	106	581	788	3
líquido).	340	94	369	106	581	788	3
Se	373	94	383	106	581	788	3
incubaron	387	94	424	106	581	788	3
a	427	94	432	106	581	788	3
37	436	94	446	106	581	788	3
°C	449	94	459	106	581	788	3
durante	463	94	491	106	581	788	3
12	495	94	505	106	581	788	3
h.	508	94	515	106	581	788	3
Se	519	94	530	106	581	788	3
observaron	308	106	351	118	581	788	3
colonias	353	106	384	118	581	788	3
azules	386	106	411	118	581	788	3
y	413	106	418	118	581	788	3
blancas.	420	106	452	118	581	788	3
IDENTIFICACIÓN	308	129	380	141	581	788	3
DE	405	129	417	141	581	788	3
LAS	442	129	459	141	581	788	3
RECOMBINANTES	308	140	386	152	581	788	3
PCR	389	140	408	152	581	788	3
DE	410	140	423	152	581	788	3
COLONIAS	425	140	472	152	581	788	3
COLONIAS	484	129	530	141	581	788	3
Las	308	163	322	175	581	788	3
colonias	328	163	359	175	581	788	3
blancas	365	163	395	175	581	788	3
seleccionadas	401	163	455	175	581	788	3
fueron	461	163	485	175	581	788	3
colocadas	491	163	530	175	581	788	3
en	308	174	317	186	581	788	3
50	321	174	331	186	581	788	3
µL	334	174	344	186	581	788	3
de	347	174	357	186	581	788	3
mezclas	360	174	392	186	581	788	3
de	396	174	405	186	581	788	3
reacción	409	174	441	186	581	788	3
para	445	174	462	186	581	788	3
PCR	466	174	484	186	581	788	3
[cebadores	488	174	530	186	581	788	3
(0,2	308	186	322	198	581	788	3
mM),	324	186	344	198	581	788	3
MgCl	346	186	366	198	581	788	3
2	366	193	369	200	581	788	3
(1	370	186	378	198	581	788	3
mM),	380	186	400	198	581	788	3
dNTP´s	402	186	431	198	581	788	3
(0,2	433	186	448	198	581	788	3
mM),	450	186	470	198	581	788	3
Taq	472	186	486	198	581	788	3
polimerasa	488	186	530	198	581	788	3
(GoTaq®	308	197	343	209	581	788	3
Flexi,	346	197	366	209	581	788	3
Promega)	369	197	407	209	581	788	3
(1,25	410	197	430	209	581	788	3
U)	433	197	442	209	581	788	3
y	445	197	450	209	581	788	3
tampón	453	197	482	209	581	788	3
de	485	197	495	209	581	788	3
reacción	498	197	530	209	581	788	3
(GoTaq®	308	209	343	221	581	788	3
Flexi	353	209	371	221	581	788	3
Buffer	381	209	404	221	581	788	3
colorless)].	414	209	455	221	581	788	3
Los	465	209	480	221	581	788	3
cebadores	490	209	530	221	581	788	3
correspondieron	308	220	369	232	581	788	3
a	373	220	378	232	581	788	3
lo	382	220	389	232	581	788	3
indicado	392	220	424	232	581	788	3
(Tabla	428	220	451	232	581	788	3
1)	455	220	463	232	581	788	3
de	466	220	476	232	581	788	3
acuerdo	480	220	511	232	581	788	3
a	515	220	520	232	581	788	3
la	523	220	530	232	581	788	3
región	308	232	331	244	581	788	3
genómica	334	232	371	244	581	788	3
a	373	232	378	244	581	788	3
amplificar.	381	232	419	244	581	788	3
Las	421	232	436	244	581	788	3
condiciones	438	232	483	244	581	788	3
de	485	232	495	244	581	788	3
tiempo	497	232	523	244	581	788	3
y	526	232	530	244	581	788	3
temperatura	308	243	354	255	581	788	3
fueron	356	243	381	255	581	788	3
94°	383	243	396	255	581	788	3
C	399	243	405	255	581	788	3
por	408	243	421	255	581	788	3
5	423	243	428	255	581	788	3
min,	431	243	447	255	581	788	3
30	450	243	459	255	581	788	3
ciclos	462	243	483	255	581	788	3
(94	486	243	498	255	581	788	3
°C	501	243	511	255	581	788	3
x	513	243	518	255	581	788	3
30	520	243	530	255	581	788	3
seg,	308	255	324	267	581	788	3
50°	326	255	339	267	581	788	3
C	342	255	348	267	581	788	3
x	351	255	355	267	581	788	3
30	358	255	368	267	581	788	3
seg,	370	255	386	267	581	788	3
72	389	255	398	267	581	788	3
°C	401	255	411	267	581	788	3
x	413	255	418	267	581	788	3
2	420	255	425	267	581	788	3
min)	427	255	444	267	581	788	3
y	447	255	451	267	581	788	3
72°	454	255	467	267	581	788	3
C	469	255	476	267	581	788	3
por	478	255	491	267	581	788	3
7	493	255	498	267	581	788	3
min.	501	255	517	267	581	788	3
Se	519	255	530	267	581	788	3
incluyó	308	266	334	278	581	788	3
una	336	266	350	278	581	788	3
colonia	352	266	379	278	581	788	3
azul	381	266	397	278	581	788	3
como	399	266	420	278	581	788	3
control	422	266	447	278	581	788	3
negativo.	449	266	484	278	581	788	3
El	485	266	493	278	581	788	3
resultado	495	266	530	278	581	788	3
de	308	277	317	289	581	788	3
la	319	277	326	289	581	788	3
amplificación	327	277	377	289	581	788	3
se	378	277	387	289	581	788	3
verificó	389	277	416	289	581	788	3
en	418	277	427	289	581	788	3
gel	429	277	441	289	581	788	3
de	442	277	452	289	581	788	3
agarosa	453	277	485	289	581	788	3
(2%)	486	277	504	289	581	788	3
donde	506	277	530	289	581	788	3
se	308	289	317	301	581	788	3
incluyó	320	289	346	301	581	788	3
el	349	289	356	301	581	788	3
marcador	358	289	395	301	581	788	3
de	398	289	407	301	581	788	3
tamaño	410	289	439	301	581	788	3
molecular	442	289	479	301	581	788	3
100	482	289	496	301	581	788	3
bp	499	289	509	301	581	788	3
DNA	511	289	530	301	581	788	3
step	308	300	324	312	581	788	3
ladder	326	300	350	312	581	788	3
(Axygen).	352	300	389	312	581	788	3
EXTRACCIÓN	308	323	367	335	581	788	3
DEL	369	323	387	335	581	788	3
ADN	389	323	408	335	581	788	3
PLASMÍDICO	410	323	466	335	581	788	3
Verificada	308	347	347	359	581	788	3
la	349	347	356	359	581	788	3
recombinación	358	347	417	359	581	788	3
de	419	347	429	359	581	788	3
los	431	347	442	359	581	788	3
insertos	444	347	476	359	581	788	3
en	478	347	488	359	581	788	3
pGEM®-T	490	347	530	359	581	788	3
Easy	308	359	328	371	581	788	3
se	331	359	340	371	581	788	3
cultivaron	344	359	382	371	581	788	3
las	385	359	397	371	581	788	3
células	400	359	428	371	581	788	3
transformadas	431	359	489	371	581	788	3
en	492	359	502	371	581	788	3
medio	506	359	530	371	581	788	3
LB	308	372	319	384	581	788	3
con	323	372	338	384	581	788	3
ampicilina	343	372	383	384	581	788	3
(100	388	372	406	384	581	788	3
µg/mL)	411	372	439	384	581	788	3
para	444	372	462	384	581	788	3
extraer	467	372	495	384	581	788	3
el	500	372	507	384	581	788	3
ADN	511	372	530	384	581	788	3
Tabla	62	397	85	410	581	788	3
1.	88	397	95	410	581	788	3
Protocolos	100	397	143	409	581	788	3
de	145	397	155	409	581	788	3
PCR	158	397	177	409	581	788	3
empleados	179	397	223	409	581	788	3
en	226	397	236	409	581	788	3
la	238	397	245	409	581	788	3
clonación	248	397	286	409	581	788	3
de	288	397	298	409	581	788	3
secuencias	301	397	346	409	581	788	3
de	348	397	358	409	581	788	3
Alfavirus	360	397	395	409	581	788	3
y	397	397	402	409	581	788	3
Flavivirus	404	397	442	409	581	788	3
N.°	65	419	76	430	581	788	3
1	69	455	73	466	581	788	3
2	69	507	73	517	581	788	3
3	69	571	73	582	581	788	3
4	69	664	73	674	581	788	3
Agente	89	414	117	425	581	788	3
infeccioso	83	423	123	435	581	788	3
Alfavirus	88	455	118	466	581	788	3
Flavivirus	86	507	120	517	581	788	3
DENV-1	89	557	117	567	581	788	3
DENV-2	89	566	117	577	581	788	3
DENV-3	89	576	117	587	581	788	3
DENV-4	89	586	117	597	581	788	3
DENV-1	89	649	117	660	581	788	3
DENV-2	89	659	117	670	581	788	3
DENV-3	89	669	117	679	581	788	3
DENV-4	89	678	117	689	581	788	3
Diana	136	419	158	430	581	788	3
nsP4	138	455	156	466	581	788	3
NS5	139	507	155	517	581	788	3
C/prM-M	131	571	162	582	581	788	3
5´UTR-C	131	664	163	674	581	788	3
Cebadores	171	419	212	430	581	788	3
Secuencia	266	419	305	430	581	788	3
cebadores	308	419	348	430	581	788	3
Productos	419	419	458	430	581	788	3
ALFA1+	177	436	206	446	581	788	3
ALFA1-	178	445	205	456	581	788	3
5´	219	436	226	446	581	788	3
GAYGCITAYYTIGAYATGGTIGAIGG-3´	228	436	366	446	581	788	3
5´	219	445	226	456	581	788	3
CKYTCYTCIGTRTGYTTGTICCIGG-3´	228	445	366	456	581	788	3
Primera	407	436	435	446	581	788	3
reacción:	437	436	470	446	581	788	3
481	426	445	439	456	581	788	3
pb	442	445	451	456	581	788	3
ALFA2+	177	465	206	475	581	788	3
ALFA2-	178	474	205	485	581	788	3
5´	219	465	226	475	581	788	3
GGIAAYTGYAAYGTIACICARATG-3´	228	465	359	475	581	788	3
5´	219	474	226	485	581	788	3
GCRAAIARIGCIGCIGCYTYIGGICC-3´	228	474	366	485	581	788	3
Segunda	405	465	437	475	581	788	3
reacción:	439	465	472	475	581	788	3
195	427	474	441	485	581	788	3
pb	443	474	452	485	581	788	3
FLAVI1+	176	487	207	498	581	788	3
FLAVI1-	177	497	206	508	581	788	3
5´	219	487	226	498	581	788	3
GAYYTIGGITGYGGIIGIGGIRGITGG-3´	228	487	369	498	581	788	3
5´	219	497	226	508	581	788	3
TCCCAICCIGCIRTRTCRTCIGC-3´	228	497	353	508	581	788	3
Primera	407	487	435	498	581	788	3
reacción:	437	487	470	498	581	788	3
1385	424	497	442	508	581	788	3
pb	444	497	453	508	581	788	3
FLAVI2+	176	516	207	527	581	788	3
FLAVI2-	177	526	206	537	581	788	3
5´	219	516	226	527	581	788	3
YGYRTIYAYAWCAYSATGGG-3´	228	516	344	527	581	788	3
5´	219	526	226	537	581	788	3
CCARTGITCYKYRTTIAIRAAICC-3´	228	526	356	537	581	788	3
Segunda	405	516	437	527	581	788	3
reacción:	439	516	472	527	581	788	3
143	426	526	439	537	581	788	3
pb	442	526	451	537	581	788	3
Primera	407	537	435	548	581	788	3
reacción:	437	537	470	548	581	788	3
511	426	547	439	558	581	788	3
pb	441	547	450	558	581	788	3
D1	187	542	197	553	581	788	3
D2	187	552	197	563	581	788	3
5´TCAATATGCTGAAACGCGCGAGAAACCG3´	219	542	388	553	581	788	3
5'TTGCACCAACAGTCAATGTCTTCAGGTTC3´	219	552	390	563	581	788	3
TS1	184	571	199	582	581	788	3
TS2	184	581	199	592	581	788	3
TS3	184	591	199	601	581	788	3
TS4	184	600	199	611	581	788	3
5´CGTCTCAGTGATCCGGGGG-3´	219	571	344	582	581	788	3
5´CGCCACAAGGGCCATGAACAG-3´	219	581	355	592	581	788	3
5´TAACATCATCATGAGACAGAGC-3´	219	591	355	601	581	788	3
5´CTCTGTTGTCTTAAACAAGAGA-3´	219	600	355	611	581	788	3
Segunda	405	566	437	577	581	788	3
reacción:	439	566	472	577	581	788	3
482	426	576	439	587	581	788	3
pb	442	576	451	587	581	788	3
119	426	586	439	596	581	788	3
pb	441	586	450	596	581	788	3
290	426	596	439	606	581	788	3
pb	442	596	451	606	581	788	3
392	426	605	439	616	581	788	3
pb	442	605	451	616	581	788	3
UTRD-1	177	615	206	626	581	788	3
UTRR-1	177	625	206	636	581	788	3
5´AGTTGTTAGTCTACGTGGAC-3´	219	615	345	626	581	788	3
5´GAGGTATGGCTAGAAATCTT-3´	219	625	343	636	581	788	3
UTRD-2	177	644	206	655	581	788	3
UTRR-2	177	654	206	665	581	788	3
5´AGTTGTTAGTCTACGTGGAC-3	219	644	342	655	581	788	3
5´TCTCTTCAATATCCCTGCTG´-3´	219	654	344	665	581	788	3
300	426	644	439	655	581	788	3
pb	442	644	451	655	581	788	3
UTRD-3	177	673	206	684	581	788	3
UTRR-3	177	683	206	694	581	788	3
5´AGTTGTTAGTCTACGTGGAC-3´	219	673	345	684	581	788	3
5´TGGAATGGCTAGAAATCTGA-3´	219	683	344	694	581	788	3
274	426	673	439	684	581	788	3
pb	442	673	451	684	581	788	3
UTRD-4	177	703	206	713	581	788	3
UTRR-4	177	712	206	723	581	788	3
5´AGTTGTTAGTCTACGTGGAC-3´	219	703	345	713	581	788	3
5´GTATCTTGATGGCCTTATTT-3´	219	712	339	723	581	788	3
339	426	703	439	713	581	788	3
pb	442	703	451	713	581	788	3
Referencias	482	419	528	430	581	788	3
Sánchez-	488	445	522	456	581	788	3
Seco	486	455	504	466	581	788	3
et	506	455	513	466	581	788	3
al.	515	455	524	466	581	788	3
(2001)	493	465	516	475	581	788	3
Sánchez-	488	497	522	508	581	788	3
Seco	486	507	504	517	581	788	3
et	506	507	513	517	581	788	3
al.	515	507	524	517	581	788	3
(2005)	493	516	516	527	581	788	3
Lanciotti	486	566	515	577	581	788	3
et	518	566	524	577	581	788	3
al.	488	576	496	587	581	788	3
(1992)	499	576	522	587	581	788	3
275	426	625	439	636	581	788	3
pb	442	625	451	636	581	788	3
Camacho	488	659	522	670	581	788	3
et	484	669	490	679	581	788	3
al.	492	669	501	679	581	788	3
(2012)	503	669	526	679	581	788	3
*pb:	62	724	75	733	581	788	3
pares	77	724	94	733	581	788	3
de	96	724	104	733	581	788	3
bases	106	724	125	733	581	788	3
271	513	757	530	769	581	788	3
Camacho	456	38	491	49	581	788	4
D	493	38	499	49	581	788	4
et	501	38	508	49	581	788	4
al.	510	38	519	49	581	788	4
Rev	51	39	66	48	581	788	4
Peru	68	39	88	48	581	788	4
Med	91	39	109	48	581	788	4
Exp	111	39	125	48	581	788	4
Salud	128	39	152	48	581	788	4
Publica.	155	39	189	48	581	788	4
2016;33(2):269-73.	191	39	257	48	581	788	4
plasmídico	51	83	92	95	581	788	4
(ADNp).	96	83	127	95	581	788	4
Los	131	83	145	95	581	788	4
cultivos	149	83	177	95	581	788	4
fueron	181	83	205	95	581	788	4
centrifugados,	209	83	263	95	581	788	4
el	267	83	274	95	581	788	4
sedimento	51	94	91	106	581	788	4
resuspendido	94	94	146	106	581	788	4
en	149	94	159	106	581	788	4
EDTA	162	94	185	106	581	788	4
(10	188	94	200	106	581	788	4
mM),	204	94	223	106	581	788	4
Tris-HCl	227	94	258	106	581	788	4
(50	261	94	274	106	581	788	4
mM,	51	105	68	117	581	788	4
pH:	71	105	84	117	581	788	4
8)	87	105	95	117	581	788	4
y	97	105	102	117	581	788	4
RNAsa	104	106	132	117	581	788	4
(100	134	105	152	117	581	788	4
µg/mL)	154	105	181	117	581	788	4
e	184	105	189	117	581	788	4
incubadas	191	105	231	117	581	788	4
a	233	105	238	117	581	788	4
4	241	105	246	117	581	788	4
ºC	248	105	258	117	581	788	4
por	261	105	274	117	581	788	4
15	51	117	61	129	581	788	4
min.	65	117	82	129	581	788	4
Se	85	117	96	129	581	788	4
adicionó	100	117	133	129	581	788	4
NaOH	137	117	162	129	581	788	4
(200	166	117	184	129	581	788	4
mM),	187	117	208	129	581	788	4
SDS	211	117	230	129	581	788	4
(1%)	233	117	252	129	581	788	4
y	256	117	260	129	581	788	4
se	264	117	274	129	581	788	4
mantuvieron	51	128	101	140	581	788	4
a	106	128	111	140	581	788	4
temperatura	116	128	165	140	581	788	4
ambiente	170	128	207	140	581	788	4
por	213	128	226	140	581	788	4
5	231	128	236	140	581	788	4
min,	242	128	259	140	581	788	4
se	264	128	274	140	581	788	4
agregó	51	140	79	152	581	788	4
acetato	82	140	112	152	581	788	4
de	115	140	125	152	581	788	4
potasio	129	140	158	152	581	788	4
(3	161	140	169	152	581	788	4
M,	173	140	183	152	581	788	4
pH:	186	140	200	152	581	788	4
5),	204	140	214	152	581	788	4
la	218	140	225	152	581	788	4
suspensión	228	140	274	152	581	788	4
se	51	151	61	163	581	788	4
mantuvo	66	151	101	163	581	788	4
a	106	151	111	163	581	788	4
4	117	151	122	163	581	788	4
ºC	128	151	137	163	581	788	4
por	143	151	156	163	581	788	4
5	162	151	167	163	581	788	4
min.	172	151	189	163	581	788	4
Posteriormente,	195	151	258	163	581	788	4
se	264	151	274	163	581	788	4
centrifugaron	51	163	104	175	581	788	4
y	107	163	112	175	581	788	4
precipitaron	116	163	163	175	581	788	4
los	166	163	178	175	581	788	4
ADNp	181	163	205	175	581	788	4
con	209	163	223	175	581	788	4
isopropanol	227	163	274	175	581	788	4
y	51	174	56	186	581	788	4
acetato	61	174	90	186	581	788	4
de	95	174	105	186	581	788	4
potasio	110	174	139	186	581	788	4
(3	144	174	152	186	581	788	4
M,	157	174	167	186	581	788	4
pH:	172	174	186	186	581	788	4
5,5).	191	174	209	186	581	788	4
Finalmente,	214	174	261	186	581	788	4
la	267	174	274	186	581	788	4
suspensión	51	186	97	198	581	788	4
se	98	186	108	198	581	788	4
centrifugó	110	186	149	198	581	788	4
durante	151	186	181	198	581	788	4
30	183	186	193	198	581	788	4
min	195	186	210	198	581	788	4
a	211	186	216	198	581	788	4
14	218	186	228	198	581	788	4
000	230	186	245	198	581	788	4
rpm,	247	186	265	198	581	788	4
al	267	186	274	198	581	788	4
sedimento	51	197	93	209	581	788	4
se	95	197	104	209	581	788	4
agregó	106	197	134	209	581	788	4
etanol	136	197	161	209	581	788	4
70%	163	197	181	209	581	788	4
para	183	197	201	209	581	788	4
su	203	197	213	209	581	788	4
centrifugación.	215	197	274	209	581	788	4
Cada	51	208	73	220	581	788	4
ADNp	75	208	99	220	581	788	4
obtenido	103	208	137	220	581	788	4
se	141	208	150	220	581	788	4
resuspendió	154	208	203	220	581	788	4
en	206	208	216	220	581	788	4
agua	220	208	240	220	581	788	4
libre	243	208	260	220	581	788	4
de	264	208	274	220	581	788	4
nucleasas	51	220	92	232	581	788	4
y	94	220	99	232	581	788	4
conservado	101	220	148	232	581	788	4
a	150	220	155	232	581	788	4
-20	158	220	171	232	581	788	4
ºC.	173	220	185	232	581	788	4
VERIFICACIÓN	51	243	115	255	581	788	4
DE	119	243	132	255	581	788	4
CLONACIÓN	136	243	189	255	581	788	4
A	193	243	199	255	581	788	4
PARTIR	203	243	235	255	581	788	4
DE	239	243	251	255	581	788	4
LOS	256	243	274	255	581	788	4
PLASMIDOS	51	255	104	266	581	788	4
RECOMBINANTES	106	255	185	266	581	788	4
Los	51	278	66	290	581	788	4
plásmidos	76	278	116	290	581	788	4
recombinantes	126	278	185	290	581	788	4
fueron	195	278	221	290	581	788	4
analizados	231	278	274	290	581	788	4
mediante	51	290	88	302	581	788	4
técnicas	90	290	123	302	581	788	4
moleculares	125	290	174	302	581	788	4
hasta	176	290	198	302	581	788	4
la	200	290	207	302	581	788	4
obtención	209	290	248	302	581	788	4
de	250	290	260	302	581	788	4
los	262	290	274	302	581	788	4
productos	51	301	91	313	581	788	4
finales	93	301	119	313	581	788	4
(Tabla	121	301	146	313	581	788	4
1).	148	301	159	313	581	788	4
Los	161	301	176	313	581	788	4
productos	178	301	218	313	581	788	4
se	220	301	230	313	581	788	4
analizaron	232	301	274	313	581	788	4
en	51	313	61	325	581	788	4
geles	64	313	85	325	581	788	4
de	88	313	98	325	581	788	4
agarosa.	100	313	135	325	581	788	4
RESULTADOS	51	343	130	357	581	788	4
Se	51	368	62	380	581	788	4
obtuvieron	67	368	109	380	581	788	4
los	115	368	126	380	581	788	4
plásmidos	132	368	172	380	581	788	4
recombinantes	178	368	237	380	581	788	4
con	242	368	257	380	581	788	4
las	262	368	274	380	581	788	4
secuencias	51	379	96	391	581	788	4
especificadas	102	379	156	391	581	788	4
para	162	379	180	391	581	788	4
flavivirus	186	379	221	391	581	788	4
y	227	379	232	391	581	788	4
alfavirus.	238	379	274	391	581	788	4
Una	51	391	68	403	581	788	4
vez	74	391	88	403	581	788	4
amplificados,	95	391	147	403	581	788	4
purificados	154	391	198	403	581	788	4
y	204	391	209	403	581	788	4
confirmada	215	391	260	403	581	788	4
la	267	391	274	403	581	788	4
amplificación	51	402	103	414	581	788	4
de	106	402	116	414	581	788	4
los	119	402	131	414	581	788	4
productos	134	402	173	414	581	788	4
de	176	402	186	414	581	788	4
ADNc,	189	402	215	414	581	788	4
se	218	402	227	414	581	788	4
obtuvo	233	402	260	414	581	788	4
un	264	402	274	414	581	788	4
rendimiento	51	414	98	426	581	788	4
entre	101	414	122	426	581	788	4
1,5	125	414	137	426	581	788	4
y	140	414	145	426	581	788	4
12	148	414	158	426	581	788	4
µg	161	414	171	426	581	788	4
totales,	174	414	203	426	581	788	4
con	206	414	221	426	581	788	4
una	224	414	239	426	581	788	4
relación	242	414	274	426	581	788	4
A	51	425	57	437	581	788	4
260/280	57	432	76	439	581	788	4
de	78	425	89	437	581	788	4
1,9	91	425	104	437	581	788	4
indicando	106	425	145	437	581	788	4
pureza	147	425	175	437	581	788	4
de	177	425	187	437	581	788	4
los	190	425	201	437	581	788	4
productos.	204	425	246	437	581	788	4
Luego	51	448	76	460	581	788	4
de	81	448	91	460	581	788	4
la	95	448	102	460	581	788	4
recombinación	107	448	165	460	581	788	4
y	170	448	174	460	581	788	4
siembra	179	448	211	460	581	788	4
de	215	448	225	460	581	788	4
las	230	448	241	460	581	788	4
células	246	448	274	460	581	788	4
transformadas,	51	460	111	472	581	788	4
se	119	460	128	472	581	788	4
observó	136	460	168	472	581	788	4
el	176	460	183	472	581	788	4
crecimiento	191	460	237	472	581	788	4
de	244	460	254	472	581	788	4
las	262	460	274	472	581	788	4
colonias	51	471	84	483	581	788	4
bacterianas,	87	471	136	483	581	788	4
sobre	139	471	161	483	581	788	4
las	164	471	176	483	581	788	4
cuales	178	471	204	483	581	788	4
se	207	471	217	483	581	788	4
realizaron	220	471	259	483	581	788	4
los	262	471	274	483	581	788	4
ensayos	51	482	85	494	581	788	4
para	89	482	107	494	581	788	4
verificar	111	482	142	494	581	788	4
la	146	482	153	494	581	788	4
clonación	157	482	195	494	581	788	4
de	199	482	209	494	581	788	4
los	213	482	225	494	581	788	4
fragmentos	229	482	274	494	581	788	4
de	51	494	61	506	581	788	4
ADNc.	64	494	90	506	581	788	4
Una	94	494	110	506	581	788	4
vez	114	494	128	506	581	788	4
identificadas	131	494	181	506	581	788	4
las	185	494	196	506	581	788	4
colonias	200	494	233	506	581	788	4
mediante	237	494	274	506	581	788	4
su	51	505	61	517	581	788	4
color,	67	505	88	517	581	788	4
se	95	505	104	517	581	788	4
amplificaron	110	505	159	517	581	788	4
los	165	505	177	517	581	788	4
fragmentos	183	505	228	517	581	788	4
de	234	505	244	517	581	788	4
ADNc	250	505	274	517	581	788	4
recombinados	51	517	108	529	581	788	4
mediante	112	517	149	529	581	788	4
una	154	517	169	529	581	788	4
PCR	173	517	192	529	581	788	4
de	197	517	207	529	581	788	4
colonias	211	517	244	529	581	788	4
donde	249	517	274	529	581	788	4
1	59	545	63	555	581	788	4
2	74	545	78	555	581	788	4
3	89	545	93	555	581	788	4
4	105	545	109	555	581	788	4
5	121	545	125	555	581	788	4
6	138	545	142	555	581	788	4
7	154	545	158	555	581	788	4
8	173	545	176	555	581	788	4
9	188	545	192	555	581	788	4
10	201	545	209	555	581	788	4
11	218	545	226	555	581	788	4
M	237	545	243	555	581	788	4
500pb	255	575	273	584	581	788	4
195*	54	603	67	613	581	788	4
143*	70	603	83	613	581	788	4
275*	85	603	99	613	581	788	4
300*	101	603	114	613	581	788	4
274*	119	603	132	613	581	788	4
339*	134	603	147	613	581	788	4
482*	152	603	165	613	581	788	4
119*	168	603	181	613	581	788	4
290*	185	603	198	613	581	788	4
392*	201	603	214	613	581	788	4
*=pb	57	612	71	622	581	788	4
Figura	51	626	75	637	581	788	4
1.	79	626	86	637	581	788	4
Electroforesis	89	626	138	636	581	788	4
en	141	626	150	636	581	788	4
gel	153	626	164	636	581	788	4
de	168	626	176	636	581	788	4
agarosa	180	626	209	636	581	788	4
de	212	626	221	636	581	788	4
los	225	626	235	636	581	788	4
productos	238	626	274	636	581	788	4
genómicos	51	635	90	646	581	788	4
finales	93	635	116	646	581	788	4
correspondientes	120	635	181	646	581	788	4
al	185	635	191	646	581	788	4
alfavirus	195	635	224	646	581	788	4
CHIKV	228	635	252	646	581	788	4
y	256	635	260	646	581	788	4
los	263	635	274	646	581	788	4
flavivirus	51	645	82	656	581	788	4
Zika,	84	645	101	656	581	788	4
DENV-1,	103	645	134	656	581	788	4
DENV-2,	136	645	167	656	581	788	4
DENV-3	169	645	198	656	581	788	4
y	200	645	204	656	581	788	4
DENV-4	206	645	235	656	581	788	4
obtenidos	239	645	274	656	581	788	4
a	51	655	55	665	581	788	4
partir	57	655	76	665	581	788	4
de	78	655	87	665	581	788	4
los	89	655	99	665	581	788	4
ADNp	100	655	122	665	581	788	4
recombinantes	124	655	176	665	581	788	4
mediante	178	655	211	665	581	788	4
las	213	655	223	665	581	788	4
metodologías	226	655	274	665	581	788	4
de	51	664	60	675	581	788	4
RT-PCR	63	664	93	675	581	788	4
referidas	96	664	127	675	581	788	4
en	130	664	139	675	581	788	4
la	142	664	148	675	581	788	4
tabla	151	664	168	675	581	788	4
1.	171	664	178	675	581	788	4
Carril	181	664	202	675	581	788	4
1.	205	664	211	675	581	788	4
nsP4	214	664	233	675	581	788	4
de	236	664	245	675	581	788	4
CHIKV,	248	664	274	675	581	788	4
Carril	51	674	72	685	581	788	4
2.	75	674	81	685	581	788	4
NS5	84	674	99	684	581	788	4
Virus	102	674	120	684	581	788	4
Zika,	123	674	140	684	581	788	4
Carril	143	674	164	685	581	788	4
3.	166	674	173	685	581	788	4
5´UTR-C	176	674	208	684	581	788	4
DENV-1	210	674	239	684	581	788	4
(Hawaii),	242	674	274	684	581	788	4
Carril	51	683	72	694	581	788	4
4.	74	683	81	694	581	788	4
5´UTR-C	83	683	115	694	581	788	4
DENV-2	118	683	147	694	581	788	4
(NG”C”),	149	683	180	694	581	788	4
Carril	182	683	203	694	581	788	4
5.	206	683	212	694	581	788	4
5´UTR-C	215	683	247	694	581	788	4
DENV-	249	683	274	694	581	788	4
3	51	693	55	704	581	788	4
(H87),	58	693	80	704	581	788	4
Carril	83	693	104	704	581	788	4
6.	107	693	113	704	581	788	4
5´UTR-C	116	693	148	704	581	788	4
DENV-4	151	693	180	704	581	788	4
(H241),	182	693	209	704	581	788	4
Carril	212	693	233	704	581	788	4
7.	235	693	242	704	581	788	4
DENV-1	245	693	274	704	581	788	4
(Hawaii),	51	703	83	713	581	788	4
Carril	86	703	107	714	581	788	4
8.	110	703	116	714	581	788	4
DENV-2	120	703	148	713	581	788	4
(NG”C”),	152	703	182	713	581	788	4
Carril	185	703	206	714	581	788	4
9.	209	703	216	714	581	788	4
DENV-3	219	703	248	713	581	788	4
(H87),	251	703	274	713	581	788	4
Carril	51	712	72	723	581	788	4
10.	75	712	86	723	581	788	4
DENV-4(H241),	90	712	145	723	581	788	4
11.	149	712	159	723	581	788	4
Control	163	712	188	723	581	788	4
negativo,	192	712	224	723	581	788	4
M.	228	712	236	723	581	788	4
Marcador	240	712	274	723	581	788	4
(100	51	722	67	732	581	788	4
pb	69	722	78	732	581	788	4
DNA	80	722	97	732	581	788	4
step	99	722	114	732	581	788	4
ladder,	116	722	140	732	581	788	4
Axygen).	142	722	174	732	581	788	4
272	50	757	67	769	581	788	4
se	296	83	306	94	581	788	4
utilizaron	309	83	345	94	581	788	4
los	348	83	360	94	581	788	4
mismos	363	83	394	94	581	788	4
cebadores	398	83	440	94	581	788	4
empleados	443	83	487	94	581	788	4
para	490	83	508	94	581	788	4
la	512	83	519	94	581	788	4
amplificación	296	94	348	106	581	788	4
inicial	352	94	375	106	581	788	4
de	378	94	388	106	581	788	4
los	392	94	404	106	581	788	4
fragmentos.	408	94	455	106	581	788	4
Los	459	94	473	106	581	788	4
resultados	477	94	519	106	581	788	4
de	296	105	306	117	581	788	4
este	311	105	328	117	581	788	4
último	333	105	357	117	581	788	4
ensayo	362	105	391	117	581	788	4
evidenciaron	396	105	447	117	581	788	4
amplificación	452	105	504	117	581	788	4
de	509	105	519	117	581	788	4
bandas	296	116	326	128	581	788	4
correspondientes	332	116	401	128	581	788	4
a	407	116	412	128	581	788	4
los	418	116	430	128	581	788	4
tamaños	436	116	471	128	581	788	4
esperados	477	116	519	128	581	788	4
para	296	127	314	139	581	788	4
nsP4	317	127	337	139	581	788	4
de	340	127	350	139	581	788	4
CHIKV	352	127	380	139	581	788	4
(481	382	127	400	139	581	788	4
pb),	403	127	418	139	581	788	4
Zika	421	127	438	139	581	788	4
(1385	440	127	463	139	581	788	4
pb),	466	127	481	139	581	788	4
C/prM-M	484	127	519	139	581	788	4
de	296	138	306	150	581	788	4
DENV-1,	312	138	347	150	581	788	4
DENV-2,	352	138	387	150	581	788	4
DENV-3	393	138	425	150	581	788	4
y	431	138	435	150	581	788	4
DENV-4	440	138	473	150	581	788	4
(511pb)	478	138	509	150	581	788	4
y	514	138	519	150	581	788	4
5´UTR-C	296	149	332	161	581	788	4
[DENV-1	335	149	370	161	581	788	4
(275	373	149	391	161	581	788	4
pb),	394	149	409	161	581	788	4
DENV-2	412	149	444	161	581	788	4
(300	447	149	465	161	581	788	4
pb),	468	149	483	161	581	788	4
DENV-3	486	149	519	161	581	788	4
(274	296	160	314	172	581	788	4
pb)	317	160	330	172	581	788	4
y	333	160	338	172	581	788	4
DENV-4	341	160	373	172	581	788	4
(339	376	160	394	172	581	788	4
pb)]	397	160	412	172	581	788	4
demostrando	415	160	468	172	581	788	4
la	471	160	478	172	581	788	4
clonación	481	160	519	172	581	788	4
de	296	171	306	183	581	788	4
los	313	171	325	183	581	788	4
insertos.	332	171	366	183	581	788	4
Adicionalmente,	372	171	436	183	581	788	4
se	444	171	453	183	581	788	4
extrajeron	460	171	500	183	581	788	4
los	507	171	519	183	581	788	4
ADNp	296	182	320	194	581	788	4
obtenidos	325	182	364	194	581	788	4
a	369	182	374	194	581	788	4
partir	379	182	399	194	581	788	4
del	404	182	416	194	581	788	4
cultivo	421	182	446	194	581	788	4
de	451	182	461	194	581	788	4
las	466	182	477	194	581	788	4
bacterias	482	182	519	194	581	788	4
transformadas	296	193	354	205	581	788	4
para	356	193	374	205	581	788	4
el	376	193	383	205	581	788	4
almacenamiento	385	193	451	205	581	788	4
y	453	193	457	205	581	788	4
aseguramiento	459	193	519	205	581	788	4
de	296	204	306	216	581	788	4
la	309	204	316	216	581	788	4
clonación.	319	204	360	216	581	788	4
El	362	204	370	216	581	788	4
análisis	373	204	403	216	581	788	4
mediante	406	204	443	216	581	788	4
PCR	446	204	465	216	581	788	4
de	468	204	478	216	581	788	4
los	481	204	492	216	581	788	4
ADNp	495	204	519	216	581	788	4
obtenidos	296	215	335	227	581	788	4
permitió	342	215	374	227	581	788	4
amplificar	382	215	420	227	581	788	4
los	427	215	439	227	581	788	4
productos	446	215	486	227	581	788	4
finales	493	215	519	227	581	788	4
mediante	296	226	333	238	581	788	4
técnicas	335	226	368	238	581	788	4
moleculares	370	226	418	238	581	788	4
(Tabla	420	226	445	238	581	788	4
1)	447	226	455	238	581	788	4
de	457	226	467	238	581	788	4
los	468	226	480	238	581	788	4
genomas	482	226	519	238	581	788	4
de	296	237	306	249	581	788	4
los	310	237	321	249	581	788	4
virus	324	237	343	249	581	788	4
CHIKV,	347	237	376	249	581	788	4
Zika,	379	237	399	249	581	788	4
DENV-1,	402	237	437	249	581	788	4
DENV-2,	440	237	475	249	581	788	4
DENV-3	478	237	511	249	581	788	4
y	514	237	519	249	581	788	4
DENV-4	296	248	329	260	581	788	4
clonados	333	248	369	260	581	788	4
en	373	248	383	260	581	788	4
pGEM®-T	388	248	428	260	581	788	4
Easy	432	248	452	260	581	788	4
(Figura	457	248	485	260	581	788	4
1).	489	248	500	260	581	788	4
Los	504	248	519	260	581	788	4
clones	296	259	322	271	581	788	4
recombinantes	326	259	385	271	581	788	4
serán	389	259	412	271	581	788	4
posteriormente	416	259	476	271	581	788	4
valorados	480	259	519	271	581	788	4
como	296	270	318	282	581	788	4
controles	321	270	358	282	581	788	4
positivos,	361	270	398	282	581	788	4
en	401	270	411	282	581	788	4
cualquiera	414	270	455	282	581	788	4
de	458	270	468	282	581	788	4
las	471	270	483	282	581	788	4
técnicas	486	270	519	282	581	788	4
mencionadas	296	281	350	293	581	788	4
(Tabla	352	281	377	293	581	788	4
1).	379	281	390	293	581	788	4
DISCUSIÓN	296	306	368	320	581	788	4
Las	296	331	310	343	581	788	4
técnicas	315	331	347	343	581	788	4
moleculares	352	331	398	343	581	788	4
representan	403	331	448	343	581	788	4
un	454	331	463	343	581	788	4
gran	469	331	486	343	581	788	4
avance	491	331	519	343	581	788	4
para	296	343	313	355	581	788	4
los	320	343	331	355	581	788	4
laboratorios	338	343	382	355	581	788	4
de	389	343	399	355	581	788	4
diagnóstico	406	343	449	355	581	788	4
e	456	343	461	355	581	788	4
investigación.	468	343	519	355	581	788	4
La	296	354	306	366	581	788	4
aplicación	310	354	348	366	581	788	4
de	352	354	362	366	581	788	4
estas,	367	354	389	366	581	788	4
como	394	354	415	366	581	788	4
la	419	354	426	366	581	788	4
PCR	430	354	449	366	581	788	4
en	453	354	463	366	581	788	4
sus	467	354	481	366	581	788	4
múltiples	485	354	519	366	581	788	4
variantes,	296	366	333	377	581	788	4
identifica	344	366	377	377	581	788	4
agentes	389	366	419	377	581	788	4
infecciosos	430	366	472	377	581	788	4
mediante	484	366	519	377	581	788	4
amplificación	296	377	345	389	581	788	4
de	347	377	357	389	581	788	4
determinados	359	377	411	389	581	788	4
fragmentos	412	377	455	389	581	788	4
genómicos	457	377	498	389	581	788	4
(13-16)	500	378	516	385	581	788	4
.	516	377	519	389	581	788	4
En	296	388	307	400	581	788	4
el	310	388	317	400	581	788	4
estado	320	388	346	400	581	788	4
Aragua	349	388	376	400	581	788	4
(Venezuela),	380	388	427	400	581	788	4
funciona	430	388	463	400	581	788	4
el	466	388	473	400	581	788	4
Laboratorio	476	388	519	400	581	788	4
Regional	296	400	330	412	581	788	4
de	335	400	345	412	581	788	4
Diagnóstico	350	400	394	412	581	788	4
e	399	400	404	412	581	788	4
Investigación	409	400	459	412	581	788	4
del	464	400	475	412	581	788	4
dengue	480	400	509	412	581	788	4
y	514	400	519	412	581	788	4
otras	296	411	315	423	581	788	4
Enfermedades	318	411	374	423	581	788	4
Virales,	377	411	405	423	581	788	4
donde	408	411	432	423	581	788	4
se	435	411	445	423	581	788	4
realiza	448	411	473	423	581	788	4
diagnóstico	476	411	519	423	581	788	4
molecular	296	423	333	435	581	788	4
de	335	423	345	435	581	788	4
alfavirus	347	423	378	435	581	788	4
(13)	379	424	388	431	581	788	4
y	390	423	395	435	581	788	4
flavivirus	397	423	430	435	581	788	4
(14)	432	424	440	431	581	788	4
;	440	423	443	435	581	788	4
DENV	445	423	469	435	581	788	4
(15)	471	424	480	431	581	788	4
,	480	423	482	435	581	788	4
así	484	423	496	435	581	788	4
como	498	423	519	435	581	788	4
del	296	434	308	446	581	788	4
fragmento	310	434	348	446	581	788	4
5´UTR-C	350	434	385	446	581	788	4
de	387	434	396	446	581	788	4
DENV,	398	434	424	446	581	788	4
utilizado	426	434	457	446	581	788	4
para	459	434	476	446	581	788	4
síntesis	478	434	507	446	581	788	4
de	509	434	519	446	581	788	4
proteínas	296	446	332	458	581	788	4
de	334	446	344	458	581	788	4
DENV	346	446	371	458	581	788	4
(16)	373	446	382	453	581	788	4
.	382	446	384	458	581	788	4
Con	387	446	403	458	581	788	4
la	405	446	412	458	581	788	4
puesta	414	446	440	458	581	788	4
en	443	446	452	458	581	788	4
marcha	455	446	484	458	581	788	4
de	486	446	496	458	581	788	4
estas	498	446	519	458	581	788	4
metodologías,	296	457	350	469	581	788	4
surgió	354	457	377	469	581	788	4
la	381	457	387	469	581	788	4
necesidad	392	457	430	469	581	788	4
de	434	457	444	469	581	788	4
preparar	448	457	480	469	581	788	4
controles	484	457	519	469	581	788	4
positivos,	296	469	331	481	581	788	4
comúnmente	341	469	390	481	581	788	4
obtenidos	400	469	437	481	581	788	4
mediante	446	469	481	481	581	788	4
cultivos	491	469	519	481	581	788	4
celulares,	296	480	332	492	581	788	4
cuyas	337	480	359	492	581	788	4
desventajas	364	480	409	492	581	788	4
se	414	480	423	492	581	788	4
asocian	427	480	457	492	581	788	4
a	461	480	466	492	581	788	4
laboriosidad,	471	480	519	492	581	788	4
costos	296	491	321	503	581	788	4
y	323	491	327	503	581	788	4
riesgos	329	491	357	503	581	788	4
de	359	491	368	503	581	788	4
infección.	370	491	406	503	581	788	4
La	296	514	306	526	581	788	4
tecnología	311	514	351	526	581	788	4
de	355	514	365	526	581	788	4
ADN	370	514	388	526	581	788	4
recombinante	393	514	445	526	581	788	4
permite	450	514	479	526	581	788	4
solventar	484	514	519	526	581	788	4
estas	296	526	317	538	581	788	4
limitaciones	321	526	365	538	581	788	4
con	369	526	383	538	581	788	4
la	387	526	394	538	581	788	4
clonación	397	526	434	538	581	788	4
de	437	526	447	538	581	788	4
secuencias	451	526	494	538	581	788	4
diana	498	526	519	538	581	788	4
amplificadas	296	537	344	549	581	788	4
mediante	352	537	387	549	581	788	4
RT-PCR	396	537	428	549	581	788	4
(13-16)	436	538	452	545	581	788	4
.	452	537	454	549	581	788	4
Estas,	462	537	486	549	581	788	4
fueron	494	537	519	549	581	788	4
insertadas	296	549	336	561	581	788	4
en	344	549	354	561	581	788	4
pGEM®-T	363	549	402	561	581	788	4
Easy,	411	549	432	561	581	788	4
representando	440	549	495	561	581	788	4
una	504	549	519	561	581	788	4
estrategia	296	560	334	572	581	788	4
de	339	560	348	572	581	788	4
clonación	353	560	390	572	581	788	4
sencilla,	395	560	425	572	581	788	4
comprobada	430	560	478	572	581	788	4
mediante	483	560	519	572	581	788	4
PCR	296	572	315	584	581	788	4
de	317	572	327	584	581	788	4
colonias	329	572	360	584	581	788	4
y	362	572	366	584	581	788	4
PCR	368	572	387	584	581	788	4
de	389	572	399	584	581	788	4
ADNp,	400	572	426	584	581	788	4
inédita	428	572	453	584	581	788	4
en	455	572	465	584	581	788	4
el	467	572	473	584	581	788	4
diagnóstico	475	572	519	584	581	788	4
de	296	583	306	595	581	788	4
estas	308	583	329	595	581	788	4
infecciones	331	583	374	595	581	788	4
virales,	376	583	403	595	581	788	4
asegurando	406	583	451	595	581	788	4
un	453	583	463	595	581	788	4
posible	466	583	493	595	581	788	4
banco	495	583	519	595	581	788	4
de	296	594	306	606	581	788	4
controles	307	594	342	606	581	788	4
positivos	343	594	377	606	581	788	4
permanente,	378	594	426	606	581	788	4
evitando	428	594	460	606	581	788	4
la	461	594	468	606	581	788	4
dependencia	469	594	519	606	581	788	4
tecnológica	296	606	339	618	581	788	4
de	341	606	351	618	581	788	4
otros	353	606	372	618	581	788	4
países	373	606	399	618	581	788	4
para	401	606	418	618	581	788	4
la	420	606	426	618	581	788	4
adquisición	428	606	471	618	581	788	4
de	472	606	482	618	581	788	4
controles	484	606	519	618	581	788	4
y	296	617	301	629	581	788	4
minimizando	304	617	352	629	581	788	4
la	356	617	362	629	581	788	4
ejecución	366	617	402	629	581	788	4
de	405	617	415	629	581	788	4
procedimientos	418	617	476	629	581	788	4
laboriosos	480	617	519	629	581	788	4
para	296	629	314	641	581	788	4
obtener	319	629	348	641	581	788	4
cepas	354	629	377	641	581	788	4
virales	383	629	408	641	581	788	4
como	413	629	435	641	581	788	4
controles,	441	629	478	641	581	788	4
mediante	483	629	519	641	581	788	4
cultivos	296	640	325	652	581	788	4
celulares	327	640	361	652	581	788	4
y/o	363	640	375	652	581	788	4
inoculación	377	640	419	652	581	788	4
en	421	640	431	652	581	788	4
ratones	433	640	462	652	581	788	4
lactantes	464	640	498	652	581	788	4
(19)	500	641	509	648	581	788	4
.	509	640	512	652	581	788	4
Los	296	663	311	675	581	788	4
resultados	317	663	359	675	581	788	4
obtenidos	366	663	405	675	581	788	4
sugieren	412	663	447	675	581	788	4
que	453	663	468	675	581	788	4
el	474	663	482	675	581	788	4
uso	488	663	502	675	581	788	4
de	509	663	519	675	581	788	4
técnicas	296	675	330	687	581	788	4
de	334	675	344	687	581	788	4
ADN	348	675	367	687	581	788	4
recombinante,	371	675	430	687	581	788	4
podrían	434	675	465	687	581	788	4
favorecer	469	675	507	687	581	788	4
la	512	675	519	687	581	788	4
implementación	296	686	360	698	581	788	4
de	363	686	373	698	581	788	4
estrategias	376	686	421	698	581	788	4
para	423	686	442	698	581	788	4
preparar	444	686	479	698	581	788	4
controles	481	686	519	698	581	788	4
positivos	296	698	332	710	581	788	4
para	338	698	357	710	581	788	4
validación	363	698	404	710	581	788	4
de	410	698	420	710	581	788	4
técnicas	427	698	460	710	581	788	4
moleculares.	467	698	519	710	581	788	4
Estos	296	709	319	721	581	788	4
serán	330	709	353	721	581	788	4
posteriormente	363	709	425	721	581	788	4
empleados	435	709	480	721	581	788	4
en	491	709	501	721	581	788	4
el	512	709	519	721	581	788	4
laboratorio	296	720	340	732	581	788	4
para	343	720	361	732	581	788	4
valorar	365	720	393	732	581	788	4
su	397	720	406	732	581	788	4
aplicabilidad	410	720	460	732	581	788	4
en	464	720	474	732	581	788	4
el	477	720	485	732	581	788	4
análisis	488	720	519	732	581	788	4
Diagnóstico	404	38	446	49	581	788	5
de	448	38	457	49	581	788	5
alfavirus	460	38	490	49	581	788	5
y	492	38	496	49	581	788	5
flavivirus	499	38	530	49	581	788	5
Rev	62	39	77	48	581	788	5
Peru	80	39	99	48	581	788	5
Med	102	39	120	48	581	788	5
Exp	123	39	136	48	581	788	5
Salud	139	39	164	48	581	788	5
Publica.	166	39	200	48	581	788	5
2016;33(2):269-73.	202	39	269	48	581	788	5
de	62	83	72	95	581	788	5
muestras	78	83	115	95	581	788	5
obtenidas	121	83	160	95	581	788	5
de	166	83	176	95	581	788	5
pacientes	181	83	220	95	581	788	5
con	226	83	240	95	581	788	5
sospecha	246	83	285	95	581	788	5
clínica	62	93	88	105	581	788	5
de	94	93	105	105	581	788	5
infección	110	93	147	105	581	788	5
por	153	93	166	105	581	788	5
miembros	172	93	212	105	581	788	5
de	218	93	228	105	581	788	5
los	234	93	246	105	581	788	5
géneros	252	93	285	105	581	788	5
alfavirus	62	104	97	116	581	788	5
y	100	104	105	116	581	788	5
flavivirus,	108	104	147	116	581	788	5
abriendo	150	104	186	116	581	788	5
además	190	104	222	116	581	788	5
la	226	104	233	116	581	788	5
oportunidad	236	104	285	116	581	788	5
de	62	115	72	127	581	788	5
que	75	115	90	127	581	788	5
otros	93	115	113	127	581	788	5
laboratorios	116	115	164	127	581	788	5
de	167	115	177	127	581	788	5
la	179	115	186	127	581	788	5
región	189	115	214	127	581	788	5
puedan	217	115	248	127	581	788	5
preparar	250	115	285	127	581	788	5
sus	62	126	77	138	581	788	5
propios	79	126	109	138	581	788	5
controles.	112	126	152	138	581	788	5
Agradecimientos:	62	143	130	154	581	788	5
al	134	143	140	154	581	788	5
Instituto	144	143	172	154	581	788	5
“Ricardo	176	143	206	154	581	788	5
Jorge”	210	143	233	154	581	788	5
de	237	143	246	154	581	788	5
Aguas	249	143	272	154	581	788	5
de	276	143	285	154	581	788	5
Moura	62	153	85	164	581	788	5
(Portugal)	87	153	122	164	581	788	5
por	124	153	135	164	581	788	5
la	137	153	143	164	581	788	5
gentil	145	153	164	164	581	788	5
donación	166	153	199	164	581	788	5
de	201	153	209	164	581	788	5
la	211	153	218	164	581	788	5
cepa	219	153	237	164	581	788	5
de	239	153	247	164	581	788	5
referencia	249	153	285	164	581	788	5
del	62	163	73	174	581	788	5
virus	76	163	93	174	581	788	5
Zika	95	163	110	174	581	788	5
MR766	113	163	139	174	581	788	5
(Uganda,	141	163	174	174	581	788	5
1947,	177	163	197	174	581	788	5
N°	200	163	209	174	581	788	5
acceso:AY632545)	211	163	278	174	581	788	5
y	281	163	285	174	581	788	5
al	62	173	69	184	581	788	5
Instituto	71	173	99	184	581	788	5
de	102	173	111	184	581	788	5
Salud	114	173	134	184	581	788	5
Carlos	137	173	160	184	581	788	5
III	163	173	169	184	581	788	5
(España)	172	173	205	184	581	788	5
por	207	173	219	184	581	788	5
la	222	173	228	184	581	788	5
gentil	231	173	250	184	581	788	5
donación	252	173	285	184	581	788	5
del	62	183	73	194	581	788	5
control	77	183	101	194	581	788	5
de	105	183	114	194	581	788	5
CHIKV	117	183	142	194	581	788	5
(genotipo	146	183	179	194	581	788	5
ECSA	183	183	205	194	581	788	5
,	208	183	210	194	581	788	5
cepa	214	183	231	194	581	788	5
DRC	235	183	252	194	581	788	5
1721)	256	183	277	194	581	788	5
a	280	183	285	194	581	788	5
través	62	193	84	204	581	788	5
de	86	193	95	204	581	788	5
VIRORED-CYTED.	97	193	166	204	581	788	5
Contribuciones	62	208	118	219	581	788	5
de	123	208	132	219	581	788	5
autoría:	136	208	164	219	581	788	5
DC,	168	208	182	219	581	788	5
EF	186	208	196	219	581	788	5
y	200	208	204	219	581	788	5
JR	208	208	218	219	581	788	5
participaron	222	208	262	219	581	788	5
en	266	208	275	219	581	788	5
la	279	208	285	219	581	788	5
concepción	62	218	101	228	581	788	5
y	106	218	110	228	581	788	5
diseño	116	218	138	228	581	788	5
del	144	218	154	228	581	788	5
artículo,	159	218	186	228	581	788	5
recolección,	192	218	232	228	581	788	5
obtención	238	218	271	228	581	788	5
de	276	218	285	228	581	788	5
resultados,	308	83	345	93	581	788	5
análisis	346	83	371	93	581	788	5
e	372	83	377	93	581	788	5
interpretación	378	83	424	93	581	788	5
de	425	83	434	93	581	788	5
datos,	435	83	456	93	581	788	5
redacción	457	83	490	93	581	788	5
del	492	83	502	93	581	788	5
artículo,	503	83	530	93	581	788	5
aprobación	308	93	345	104	581	788	5
de	348	93	357	104	581	788	5
su	359	93	367	104	581	788	5
versión	370	93	395	104	581	788	5
final	397	93	411	104	581	788	5
y	414	93	418	104	581	788	5
obtención	420	93	453	104	581	788	5
de	456	93	465	104	581	788	5
financiamiento.	467	93	518	104	581	788	5
LF	521	93	530	104	581	788	5
participó	308	104	336	114	581	788	5
en	340	104	348	114	581	788	5
el	352	104	358	114	581	788	5
análisis	361	104	386	114	581	788	5
e	390	104	394	114	581	788	5
interpretación	398	104	444	114	581	788	5
de	447	104	456	114	581	788	5
datos,	459	104	480	114	581	788	5
redacción	483	104	516	114	581	788	5
del	520	104	530	114	581	788	5
artículo,	308	114	334	125	581	788	5
revisión	337	114	363	125	581	788	5
crítica	365	114	385	125	581	788	5
del	387	114	397	125	581	788	5
artículo,	399	114	426	125	581	788	5
aprobación	428	114	466	125	581	788	5
de	468	114	477	125	581	788	5
su	479	114	487	125	581	788	5
versión	489	114	514	125	581	788	5
final	516	114	530	125	581	788	5
y	308	124	312	135	581	788	5
aporte	315	124	336	135	581	788	5
de	339	124	348	135	581	788	5
pacientes	351	124	384	135	581	788	5
o	387	124	391	135	581	788	5
material	394	124	421	135	581	788	5
de	424	124	433	135	581	788	5
estudio.	436	124	463	135	581	788	5
GC	466	124	478	135	581	788	5
participó	481	124	509	135	581	788	5
en	512	124	521	135	581	788	5
el	524	124	530	135	581	788	5
análisis	308	135	333	145	581	788	5
e	335	135	340	145	581	788	5
interpretación	343	135	388	145	581	788	5
de	391	135	400	145	581	788	5
datos,	402	135	423	145	581	788	5
redacción	426	135	459	145	581	788	5
del	462	135	472	145	581	788	5
artículo,	474	135	501	145	581	788	5
revisión	504	135	530	145	581	788	5
crítica	308	145	328	156	581	788	5
del	330	145	340	156	581	788	5
artículo	342	145	366	156	581	788	5
y	368	145	372	156	581	788	5
la	374	145	380	156	581	788	5
aprobación	382	145	420	156	581	788	5
de	422	145	430	156	581	788	5
su	432	145	440	156	581	788	5
versión	442	145	467	156	581	788	5
final.	469	145	485	156	581	788	5
Fuentes	308	165	338	177	581	788	5
de	342	165	351	177	581	788	5
financiamiento:	355	165	414	177	581	788	5
Ayuda	417	166	439	176	581	788	5
Menor	443	166	465	176	581	788	5
CDCH-UC	469	166	506	176	581	788	5
0440-	510	166	530	176	581	788	5
10,	308	176	319	186	581	788	5
FONACIT	321	176	356	186	581	788	5
(Misión	358	176	384	186	581	788	5
Ciencia.	386	176	415	186	581	788	5
Incentivo	417	176	449	186	581	788	5
Institucional	452	176	494	186	581	788	5
Proyecto:	496	176	530	186	581	788	5
UC-200900434).	308	186	367	197	581	788	5
Conflictos	308	207	347	218	581	788	5
de	348	207	358	218	581	788	5
Interés:	360	207	389	218	581	788	5
Los	390	207	403	217	581	788	5
autores	405	207	432	217	581	788	5
declaran	434	207	464	217	581	788	5
no	466	207	475	217	581	788	5
tener	477	207	495	217	581	788	5
conflictos	497	207	530	217	581	788	5
de	308	217	316	228	581	788	5
interés.	319	217	345	228	581	788	5
Referencias	62	245	143	260	581	788	5
Bibliográficas	147	245	248	260	581	788	5
1.	62	270	69	281	581	788	5
Gubler	77	270	101	281	581	788	5
DJ,	107	270	119	281	581	788	5
Kuno	126	270	145	281	581	788	5
G,	152	270	160	281	581	788	5
Markoff	167	270	195	281	581	788	5
L.	202	270	209	281	581	788	5
Flaviviruses.	77	281	117	292	581	788	5
En:	121	281	133	292	581	788	5
Knipe	137	281	158	292	581	788	5
DM,	162	281	178	292	581	788	5
Howley	182	281	209	292	581	788	5
PM,	77	291	91	302	581	788	5
eds.	98	291	111	302	581	788	5
Fields	118	291	138	302	581	788	5
Virology.	145	291	176	302	581	788	5
5	183	291	188	302	581	788	5
th	188	292	192	298	581	788	5
ed.	199	291	209	302	581	788	5
Philadelphia:	77	302	122	313	581	788	5
Lippincott	124	302	161	313	581	788	5
Williams	163	302	194	313	581	788	5
and	196	302	209	313	581	788	5
Wilkins;	77	312	106	323	581	788	5
2007.p.	108	312	134	323	581	788	5
1153–1252.	135	312	177	323	581	788	5
2.	62	326	69	337	581	788	5
Strauss	77	326	98	337	581	788	5
JH,	101	326	112	337	581	788	5
Strauss	114	326	136	337	581	788	5
EG.	139	326	151	337	581	788	5
The	154	326	166	337	581	788	5
alphaviruses:	169	326	209	337	581	788	5
gene	77	336	91	347	581	788	5
expression,	93	336	127	347	581	788	5
replication	128	336	162	347	581	788	5
and	163	336	176	347	581	788	5
evolution.	177	336	209	347	581	788	5
Microbiol	77	347	109	358	581	788	5
Rev.	110	347	124	358	581	788	5
1994;	125	347	143	358	581	788	5
58(3):491-562.	145	347	193	358	581	788	5
3.	62	360	69	371	581	788	5
Organización	77	360	123	371	581	788	5
Panamericana	131	360	178	371	581	788	5
de	187	360	195	371	581	788	5
la	203	360	209	371	581	788	5
Salud.	77	370	97	382	581	788	5
Organización	107	370	153	382	581	788	5
Mundial	162	370	192	382	581	788	5
de	201	370	209	382	581	788	5
la	77	381	82	392	581	788	5
Salud.	87	381	108	392	581	788	5
Guías	113	381	133	392	581	788	5
para	138	381	152	392	581	788	5
el	157	381	163	392	581	788	5
diagnóstico,	168	381	209	392	581	788	5
tratamiento,	77	391	118	403	581	788	5
prevención	122	391	160	403	581	788	5
y	163	391	167	403	581	788	5
control.	170	391	197	403	581	788	5
La	200	391	209	403	581	788	5
Paz:	77	402	91	413	581	788	5
OPS/OMS;	93	402	135	413	581	788	5
2009.	136	402	156	413	581	788	5
4.	62	415	69	427	581	788	5
paho.org	77	415	105	427	581	788	5
[internet].	120	415	153	427	581	788	5
Washington,	168	415	209	427	581	788	5
D.C.:	77	426	95	437	581	788	5
Organización	107	426	151	437	581	788	5
Panamericana	164	426	209	437	581	788	5
de	77	436	84	448	581	788	5
la	91	436	97	448	581	788	5
Salud.	103	436	123	448	581	788	5
Organización	130	436	174	448	581	788	5
Mundial	181	436	209	448	581	788	5
de	77	447	84	458	581	788	5
la	88	447	94	458	581	788	5
Salud.	98	447	118	458	581	788	5
[actualizado	122	447	161	458	581	788	5
el	165	447	170	458	581	788	5
7	174	447	179	458	581	788	5
de	183	447	190	458	581	788	5
abril	194	447	209	458	581	788	5
de	77	457	84	469	581	788	5
2016;	89	457	108	469	581	788	5
citado	113	457	133	469	581	788	5
el	138	457	144	469	581	788	5
17	149	457	158	469	581	788	5
de	163	457	170	469	581	788	5
marzo	176	457	196	469	581	788	5
de	201	457	209	469	581	788	5
2014].	77	468	98	479	581	788	5
Disponible	108	468	143	479	581	788	5
en:	153	468	163	479	581	788	5
http://www.	173	468	209	479	581	788	5
paho.org/hq/index.php?option=com_	77	478	209	490	581	788	5
content&view=article&id=264&Itemid=363	77	489	206	500	581	788	5
5.	62	502	69	513	581	788	5
Monath	77	502	104	513	581	788	5
TP.	108	502	120	513	581	788	5
Yellow	123	502	146	513	581	788	5
fever:	149	502	168	513	581	788	5
an	172	502	180	513	581	788	5
update.	184	502	209	513	581	788	5
Lancet	77	513	100	524	581	788	5
Infect	102	513	122	524	581	788	5
Dis.	123	513	137	524	581	788	5
2001;1(1):11-20.	139	513	198	524	581	788	5
6.	62	526	69	537	581	788	5
Briese	77	526	97	537	581	788	5
T,	100	526	107	537	581	788	5
Jia	110	526	118	537	581	788	5
XY,	121	526	134	537	581	788	5
Huang	137	526	161	537	581	788	5
C,	163	526	172	537	581	788	5
Grady	175	526	196	537	581	788	5
LJ,	199	526	209	537	581	788	5
Lipkin	77	536	100	548	581	788	5
WI.	102	536	116	548	581	788	5
Identification	118	536	164	548	581	788	5
of	166	536	173	548	581	788	5
a	175	536	179	548	581	788	5
Kunjin/	181	536	209	548	581	788	5
West	77	547	94	558	581	788	5
Nile-like	98	547	127	558	581	788	5
flavivirus	131	547	162	558	581	788	5
in	166	547	173	558	581	788	5
brains	177	547	198	558	581	788	5
of	202	547	209	558	581	788	5
patients	77	557	103	569	581	788	5
with	107	557	123	569	581	788	5
New	127	557	143	569	581	788	5
York	147	557	163	569	581	788	5
encephalitis.	167	557	209	569	581	788	5
Lancet.	77	568	102	579	581	788	5
1999;	103	568	123	579	581	788	5
354(9186):1261–1262.	125	568	206	579	581	788	5
7.	62	581	69	593	581	788	5
Campos	77	581	105	593	581	788	5
GS,	109	581	122	593	581	788	5
Bandeira	126	581	156	593	581	788	5
AC,	160	581	174	593	581	788	5
Sardi	178	581	196	593	581	788	5
SI.	200	581	209	593	581	788	5
Zika	77	592	92	603	581	788	5
virus	98	592	115	603	581	788	5
outbreak,	121	592	153	603	581	788	5
Bahia,	159	592	181	603	581	788	5
Brazil.	187	592	209	603	581	788	5
Emerg	77	602	99	614	581	788	5
Infect	102	602	122	614	581	788	5
Dis;	125	602	140	614	581	788	5
2015;21(10):1885-	143	602	209	614	581	788	5
6.	77	613	83	624	581	788	5
doi:	85	613	98	624	581	788	5
10.3201/eid2110.150847.	100	613	189	624	581	788	5
8.	62	626	69	637	581	788	5
Organización	77	626	119	637	581	788	5
Panamericana	122	626	165	637	581	788	5
de	168	626	176	637	581	788	5
la	179	626	185	637	581	788	5
Salud/	188	626	209	637	581	788	5
Organización	77	637	119	648	581	788	5
Mundial	120	637	147	648	581	788	5
de	148	637	155	648	581	788	5
la	156	637	161	648	581	788	5
Salud	162	637	180	648	581	788	5
[Internet].	180	637	209	647	581	788	5
Alerta	77	647	96	658	581	788	5
epidemiológica.	98	647	147	658	581	788	5
Infección	149	647	178	658	581	788	5
por	180	647	192	658	581	788	5
virus	194	647	209	658	581	788	5
Zika.	77	658	93	669	581	788	5
Washington,	94	658	133	669	581	788	5
D.C.:	134	658	152	669	581	788	5
OPS/OMS;	152	658	192	669	581	788	5
2015	192	658	209	669	581	788	5
[citando	77	668	103	679	581	788	5
el	104	668	109	679	581	788	5
21	110	668	118	679	581	788	5
de	119	668	127	679	581	788	5
mayo	128	668	145	679	581	788	5
de	146	668	153	679	581	788	5
2015]	154	668	173	679	581	788	5
Disponible	174	668	209	679	581	788	5
en:	77	679	86	690	581	788	5
http://www.paho.org/hq/index.	111	679	209	690	581	788	5
9.	223	294	229	305	581	788	5
10.	223	318	234	329	581	788	5
11.	223	384	234	395	581	788	5
12.	223	461	234	472	581	788	5
13.	223	548	233	559	581	788	5
14.	223	614	233	625	581	788	5
php?option=com_docman&task=doc_vie	237	270	369	281	581	788	5
w&Itemid=270&gid=30076&lang=es	237	281	356	292	581	788	5
Dengue	237	294	263	305	581	788	5
hemorrhagic	265	294	306	305	581	788	5
fever	309	294	324	305	581	788	5
in	326	294	333	305	581	788	5
Venezuela.	335	294	369	305	581	788	5
Epidemiol	237	305	271	316	581	788	5
Bull.	272	305	287	316	581	788	5
1990;	289	305	307	316	581	788	5
11(2):7-9.	309	305	342	316	581	788	5
Uzcátegui	237	318	271	329	581	788	5
NY,	275	318	289	329	581	788	5
Comach	292	318	321	329	581	788	5
G,	325	318	333	329	581	788	5
Camacho	337	318	369	329	581	788	5
D,	237	329	246	340	581	788	5
Salcedo	250	329	276	340	581	788	5
M,	280	329	290	340	581	788	5
Cabello	294	329	320	340	581	788	5
de	325	329	333	340	581	788	5
Quintana	337	329	369	340	581	788	5
M,	237	339	247	350	581	788	5
Jimenez	255	339	282	350	581	788	5
M	290	339	298	350	581	788	5
,	298	340	300	350	581	788	5
et	307	340	312	351	581	788	5
al.	319	340	327	351	581	788	5
Molecular	335	339	369	350	581	788	5
epidemiology	237	350	284	361	581	788	5
of	286	350	292	361	581	788	5
dengue	294	350	319	361	581	788	5
virus	321	350	337	361	581	788	5
type	339	350	354	361	581	788	5
3	356	350	361	361	581	788	5
in	363	350	369	361	581	788	5
Venezuela.	237	360	273	372	581	788	5
J	275	360	278	372	581	788	5
Gen	280	360	295	372	581	788	5
Virol.	297	360	317	372	581	788	5
2003;84:1569-	319	360	369	372	581	788	5
75.	237	371	248	382	581	788	5
doi:	251	371	265	382	581	788	5
10.1099/vir.0.18807-0	267	371	344	382	581	788	5
Van	237	384	250	395	581	788	5
Bortel	254	384	276	395	581	788	5
W,	279	384	289	395	581	788	5
Dorleans	293	384	324	395	581	788	5
F,	328	384	334	395	581	788	5
Rosine	338	384	361	395	581	788	5
J,	365	384	369	395	581	788	5
Blateau	237	395	262	406	581	788	5
A,	267	395	275	406	581	788	5
Rousseau	280	395	312	406	581	788	5
D,	316	395	325	406	581	788	5
Matheus	329	395	359	406	581	788	5
S,	363	395	369	406	581	788	5
et	237	405	243	417	581	788	5
al.	248	405	256	417	581	788	5
Chikungunya	261	405	307	417	581	788	5
outbreak	312	405	342	417	581	788	5
in	347	405	354	417	581	788	5
the	359	405	369	417	581	788	5
Caribbean	237	416	273	427	581	788	5
region,	276	416	300	427	581	788	5
December	303	416	338	427	581	788	5
2013	342	416	359	427	581	788	5
to	362	416	369	427	581	788	5
March	237	426	260	438	581	788	5
2014,	263	426	282	438	581	788	5
and	286	426	299	438	581	788	5
the	302	426	313	438	581	788	5
significance	316	426	356	438	581	788	5
for	359	426	369	438	581	788	5
Europe.	237	437	264	448	581	788	5
Euro	269	437	285	448	581	788	5
Surveill.	291	437	319	448	581	788	5
2014;19(13).	324	437	369	448	581	788	5
pii:20759.	237	447	272	459	581	788	5
Ministerio	237	461	273	472	581	788	5
del	277	461	287	472	581	788	5
Poder	291	461	311	472	581	788	5
Popular	315	461	341	472	581	788	5
para	345	461	360	472	581	788	5
la	364	461	369	472	581	788	5
Salud	237	471	256	483	581	788	5
(MPPS).	263	471	293	483	581	788	5
Información	300	471	342	483	581	788	5
oficial	349	471	369	483	581	788	5
de	237	482	245	493	581	788	5
los	252	482	262	493	581	788	5
casos	269	482	286	493	581	788	5
de	293	482	301	493	581	788	5
Chikungunya	308	482	354	493	581	788	5
en	361	482	369	493	581	788	5
Venezuela	237	493	271	504	581	788	5
[internet].	274	493	310	504	581	788	5
Caracas:	313	493	342	504	581	788	5
MPPS;	345	493	369	504	581	788	5
2014	237	503	255	514	581	788	5
[Citado	261	503	287	514	581	788	5
12	293	503	302	514	581	788	5
de	308	503	316	514	581	788	5
noviembre	322	503	356	514	581	788	5
de	362	503	369	514	581	788	5
2014]	237	514	257	525	581	788	5
Disponible	264	514	300	525	581	788	5
en:	308	514	318	525	581	788	5
http://www.	333	514	369	525	581	788	5
mpps.gob.ve/index.php?option=com_	237	524	369	535	581	788	5
content&view=article&id=6645&Itemid=18.	237	535	369	546	581	788	5
Sánchez-Seco	237	548	283	559	581	788	5
MP,	286	548	300	559	581	788	5
Rosario	304	548	329	559	581	788	5
D,	333	548	342	559	581	788	5
Quiroz	345	548	369	559	581	788	5
E,	237	559	244	570	581	788	5
Guzmán	248	559	277	570	581	788	5
G,	281	559	289	570	581	788	5
Tenorio	293	559	320	570	581	788	5
A.	324	559	332	570	581	788	5
A	336	559	342	570	581	788	5
generic	346	559	369	570	581	788	5
nested-RT-PCR	237	569	291	580	581	788	5
followed	293	569	322	580	581	788	5
by	323	569	331	580	581	788	5
sequencing	333	569	369	580	581	788	5
for	237	580	247	591	581	788	5
detection	254	580	285	591	581	788	5
and	292	580	304	591	581	788	5
identification	311	580	356	591	581	788	5
of	363	580	369	591	581	788	5
members	237	590	268	602	581	788	5
of	269	590	276	602	581	788	5
the	278	590	288	602	581	788	5
alphavirus	290	590	324	602	581	788	5
genus.	325	590	346	602	581	788	5
J	347	590	350	602	581	788	5
Virol	352	590	369	602	581	788	5
Methods.	237	601	269	612	581	788	5
2001;	271	601	290	612	581	788	5
95(1-2):153-61.	292	601	345	612	581	788	5
Sánchez-Seco	237	614	284	625	581	788	5
MP,	296	614	310	625	581	788	5
Rosario	322	614	349	625	581	788	5
D,	361	614	369	625	581	788	5
Domingo	237	625	270	636	581	788	5
C,	273	625	282	636	581	788	5
Hernández	285	625	323	636	581	788	5
L,	326	625	333	636	581	788	5
Valdés	336	625	358	636	581	788	5
K,	361	625	369	636	581	788	5
Guzmán	237	635	267	647	581	788	5
MG,	268	635	284	647	581	788	5
et	286	635	292	647	581	788	5
al.	293	635	302	647	581	788	5
Generic	303	635	330	647	581	788	5
RT-nested-	332	635	369	647	581	788	5
PCR	237	646	255	657	581	788	5
for	257	646	267	657	581	788	5
detection	269	646	301	657	581	788	5
of	303	646	310	657	581	788	5
ﬂaviviruses	312	646	349	657	581	788	5
using	352	646	369	657	581	788	5
degenerated	237	656	278	668	581	788	5
primers	287	656	313	668	581	788	5
and	322	656	334	668	581	788	5
internal	343	656	369	668	581	788	5
control	237	667	262	678	581	788	5
followed	267	667	297	678	581	788	5
by	303	667	311	678	581	788	5
sequencing	316	667	354	678	581	788	5
for	359	667	369	678	581	788	5
speciﬁc	237	677	262	689	581	788	5
identiﬁcation.	264	677	311	689	581	788	5
J	313	677	316	689	581	788	5
Virol	317	677	335	689	581	788	5
Methods.	337	677	369	689	581	788	5
15.	384	294	394	305	581	788	5
16.	384	360	394	371	581	788	5
17.	384	436	394	447	581	788	5
18.	384	481	394	492	581	788	5
19.	384	514	394	525	581	788	5
2005;126(1-2):101–9.	398	270	475	281	581	788	5
doi:10.1016/j.	481	270	530	281	581	788	5
jviromet.2005.01.025.	398	281	473	292	581	788	5
Lanciotti	398	294	427	305	581	788	5
RS,	430	294	442	305	581	788	5
Calisher	445	294	472	305	581	788	5
CH,	475	294	490	305	581	788	5
Gubler	493	294	516	305	581	788	5
DJ,	519	294	530	305	581	788	5
Chang	398	304	420	316	581	788	5
GJ,	421	304	432	316	581	788	5
Vorn­dam	434	304	464	316	581	788	5
AV.	465	304	477	316	581	788	5
Rapid	479	304	498	316	581	788	5
detection	500	304	530	316	581	788	5
and	398	315	410	326	581	788	5
typing	412	315	432	326	581	788	5
of	434	315	441	326	581	788	5
dengue	442	315	465	326	581	788	5
viruses	467	315	488	326	581	788	5
from	490	315	506	326	581	788	5
clinical	508	315	530	326	581	788	5
samples	398	325	422	337	581	788	5
by	427	325	435	337	581	788	5
using	440	325	457	337	581	788	5
reverse	462	325	483	337	581	788	5
transcriptase-	488	325	530	337	581	788	5
polymerase	398	336	434	347	581	788	5
chain	440	336	458	347	581	788	5
reaction.	465	336	492	347	581	788	5
J	499	336	502	347	581	788	5
Clin	515	336	530	347	581	788	5
Microbiol	398	346	430	358	581	788	5
1992;30(3):545–51.	431	346	496	358	581	788	5
Camacho	398	360	429	371	581	788	5
DE,	430	360	444	371	581	788	5
Ferrer	445	360	464	371	581	788	5
E,	465	360	472	371	581	788	5
Triana-Alonso	473	360	519	371	581	788	5
JL,	520	360	530	371	581	788	5
Ferreras	398	370	423	382	581	788	5
AC,	425	370	439	382	581	788	5
Graterol	442	370	469	382	581	788	5
H,	472	370	481	382	581	788	5
Comach	483	370	511	382	581	788	5
G,	514	370	522	382	581	788	5
et	525	370	530	382	581	788	5
al.	398	381	405	393	581	788	5
Amplificación	408	381	453	392	581	788	5
de	455	381	463	392	581	788	5
la	466	381	471	392	581	788	5
región	473	381	494	392	581	788	5
5	496	381	501	392	581	788	5
UTR-C	503	381	530	392	581	788	5
del	398	391	407	403	581	788	5
genoma	412	391	437	403	581	788	5
de	441	391	449	403	581	788	5
los	453	391	462	403	581	788	5
cuatro	466	391	486	403	581	788	5
serotipos	490	391	518	403	581	788	5
de	522	391	530	403	581	788	5
Virus	398	402	416	413	581	788	5
Dengue.	420	402	448	413	581	788	5
Salus.	453	402	470	413	581	788	5
2012;16(3):40-4.	475	402	530	413	581	788	5
Disponible	398	412	433	424	581	788	5
en:	438	412	448	424	581	788	5
http://www.redalyc.org/	452	412	530	424	581	788	5
articulo.oa?id=375939022009	398	423	495	434	581	788	5
Sambrook	398	436	433	447	581	788	5
J,	438	436	442	447	581	788	5
Russel	447	436	469	447	581	788	5
DW.	474	436	490	447	581	788	5
Molecular	495	436	530	447	581	788	5
Cloning:	398	447	429	458	581	788	5
a	436	447	440	458	581	788	5
laboratory	447	447	482	458	581	788	5
manual.	489	447	516	458	581	788	5
3	524	447	528	458	581	788	5
a	528	447	530	454	581	788	5
ed.	398	457	408	468	581	788	5
New	412	457	428	468	581	788	5
York:	433	457	452	468	581	788	5
Cold	456	457	474	468	581	788	5
Spring	478	457	500	468	581	788	5
Harbor	505	457	530	468	581	788	5
Laboratory	398	468	436	479	581	788	5
Press;	438	468	457	479	581	788	5
2001.	459	468	478	479	581	788	5
Ogden	398	481	420	492	581	788	5
RC,	423	481	436	492	581	788	5
Adams	439	481	462	492	581	788	5
DA.	464	481	479	492	581	788	5
Electrophoresis	482	481	530	492	581	788	5
in	398	492	404	503	581	788	5
agarose	409	492	432	503	581	788	5
y	436	492	440	503	581	788	5
acrylamide	444	492	479	503	581	788	5
gels.	483	492	497	503	581	788	5
Methods	501	492	530	503	581	788	5
Enzymol	398	502	427	513	581	788	5
1987;152:61-87.	428	502	481	513	581	788	5
Guzmán	398	514	427	525	581	788	5
MG,	431	514	447	525	581	788	5
Kourí	451	514	471	525	581	788	5
G.	475	514	483	525	581	788	5
Advances	487	514	519	525	581	788	5
in	523	514	530	525	581	788	5
dengue	398	523	422	535	581	788	5
diagnosis.	429	523	462	535	581	788	5
Clin	468	523	484	535	581	788	5
Diagn	490	523	511	535	581	788	5
Lab	517	523	530	535	581	788	5
Immunol.	398	532	431	544	581	788	5
1996;3(6):621-7.	433	532	492	544	581	788	5
Correspondencia:	384	604	441	616	581	788	5
Daría	442	604	461	616	581	788	5
Elena	463	604	481	616	581	788	5
Camacho.	483	604	514	616	581	788	5
Dirección:	384	614	416	626	581	788	5
Laboratorio	417	614	454	626	581	788	5
Regional	456	614	483	626	581	788	5
de	485	614	492	626	581	788	5
Diagnóstico	494	614	530	626	581	788	5
e	384	625	387	637	581	788	5
Investigación	388	625	428	637	581	788	5
del	429	625	438	637	581	788	5
Dengue	440	625	464	637	581	788	5
y	465	625	469	637	581	788	5
otras	470	625	485	637	581	788	5
Enfermedades	486	625	530	637	581	788	5
Virales,	384	635	407	647	581	788	5
Instituto	409	635	435	647	581	788	5
de	438	635	445	647	581	788	5
Investigaciones	448	635	493	647	581	788	5
Biomédicas	495	635	530	647	581	788	5
de	384	646	391	658	581	788	5
la	393	646	399	658	581	788	5
Universidad	400	646	439	658	581	788	5
de	440	646	448	658	581	788	5
Carabobo	449	646	480	658	581	788	5
(LARDIDEV/	482	646	530	658	581	788	5
BIOMED-UC),	384	656	436	668	581	788	5
Maracay,	438	656	467	668	581	788	5
Venezuela.	468	656	501	668	581	788	5
Teléfono:	384	667	411	679	581	788	5
+58-243-2425822.	414	667	477	679	581	788	5
Correo	384	677	405	689	581	788	5
electrónico:	406	677	440	689	581	788	5
darycamacho@yahoo.com	442	677	522	689	581	788	5
273	513	757	530	769	581	788	5
