Mem.	314	13	336	23	595	842	1
Inst.	339	13	357	23	595	842	1
Investig.	360	13	395	23	595	842	1
Cienc.	398	13	422	23	595	842	1
Salud.	425	13	450	23	595	842	1
2017;15(2):30-36	454	13	527	23	595	842	1
Doi:	295	27	312	38	595	842	1
10.18004/Mem.iics/1812-9528/2017.015(02)30-036	315	27	526	38	595	842	1
Artículo	85	38	131	53	595	842	1
Original/	135	38	187	53	595	842	1
Original	191	38	238	53	595	842	1
Article	242	38	280	53	595	842	1
Estandarización	85	69	210	86	595	842	1
de	214	69	234	86	595	842	1
una	238	69	267	86	595	842	1
técnica	273	69	329	86	595	842	1
de	334	69	353	86	595	842	1
RT-PCR	358	69	416	86	595	842	1
anidada	421	69	483	86	595	842	1
para	488	69	524	86	595	842	1
detección	218	86	293	103	595	842	1
de	298	86	317	103	595	842	1
alfavirus	322	86	390	103	595	842	1
Cynthia	85	115	119	125	595	842	1
Magdalena	122	115	170	125	595	842	1
Bernal	173	115	202	125	595	842	1
Vera	205	115	225	125	595	842	1
I	226	115	228	121	595	842	1
,	228	115	231	125	595	842	1
Fátima	234	115	265	125	595	842	1
María	267	115	292	125	595	842	1
Cardozo	295	115	332	125	595	842	1
Segovia	334	115	370	125	595	842	1
II	370	115	375	121	595	842	1
,	375	115	378	125	595	842	1
Laura	381	115	406	125	595	842	1
Patricia	409	115	443	125	595	842	1
Mendoza	446	115	486	125	595	842	1
Torres	488	115	517	125	595	842	1
II	518	115	523	121	595	842	1
I	85	135	88	144	595	842	1
Estudiante	91	135	134	144	595	842	1
de	137	135	147	144	595	842	1
la	150	135	157	144	595	842	1
Carrera	160	135	190	144	595	842	1
de	193	135	203	144	595	842	1
Bioquímica,	206	135	253	144	595	842	1
Facultad	256	135	289	144	595	842	1
de	293	135	302	144	595	842	1
Ciencias	305	135	338	144	595	842	1
Químicas,	341	135	381	144	595	842	1
Universidad	384	135	431	144	595	842	1
Nacional	434	135	468	144	595	842	1
de	471	135	481	144	595	842	1
Asunción.	484	135	523	144	595	842	1
Paraguay	85	145	122	154	595	842	1
II	85	154	92	164	595	842	1
Departamento	97	154	155	164	595	842	1
de	160	154	170	164	595	842	1
Salud	176	154	198	164	595	842	1
Pública,	204	154	235	164	595	842	1
Instituto	241	154	274	164	595	842	1
de	280	154	290	164	595	842	1
Investigaciones	296	154	358	164	595	842	1
en	363	154	373	164	595	842	1
Ciencias	379	154	412	164	595	842	1
de	417	154	427	164	595	842	1
la	433	154	439	164	595	842	1
Salud,	445	154	471	164	595	842	1
Universidad	476	154	523	164	595	842	1
Nacional	85	164	119	174	595	842	1
de	122	164	131	174	595	842	1
Asunción.	134	164	173	174	595	842	1
Paraguay	176	164	213	174	595	842	1
Cómo	120	193	145	203	595	842	1
referenciar	148	193	198	203	595	842	1
este	200	193	219	203	595	842	1
artículo/	222	193	262	203	595	842	1
How	126	203	146	213	595	842	1
to	148	203	157	213	595	842	1
reference	160	203	203	213	595	842	1
this	206	203	222	213	595	842	1
article:	225	203	257	213	595	842	1
Bernal	312	184	341	193	595	842	1
CM,	353	184	369	193	595	842	1
Cardozo	381	184	418	193	595	842	1
FM,	430	184	446	193	595	842	1
Mendoza	458	184	498	193	595	842	1
LP.	510	184	524	193	595	842	1
Estandarización	312	193	374	203	595	842	1
de	379	193	388	203	595	842	1
una	393	193	407	203	595	842	1
técnica	412	193	440	203	595	842	1
de	444	193	454	203	595	842	1
RT-PCR	458	193	488	203	595	842	1
anidada	492	193	524	203	595	842	1
para	312	203	330	213	595	842	1
detección	335	203	373	213	595	842	1
de	379	203	388	213	595	842	1
alfavirus.	394	203	431	213	595	842	1
Mem.	437	203	459	213	595	842	1
Inst.	465	203	483	213	595	842	1
Investig.	489	203	524	213	595	842	1
Cienc.	312	213	336	222	595	842	1
Salud.	339	213	364	222	595	842	1
2017;	367	213	391	222	595	842	1
15(2):	394	213	420	222	595	842	1
30-36	423	213	447	222	595	842	1
R	85	245	93	257	595	842	1
E	96	245	103	257	595	842	1
S	107	245	114	257	595	842	1
U	117	245	125	257	595	842	1
M	129	245	138	257	595	842	1
Palabras	85	446	134	458	595	842	1
clave:	137	446	170	458	595	842	1
Alphavirus,	174	446	230	458	595	842	1
RT-PCR	234	446	271	458	595	842	1
anidada,	275	446	318	458	595	842	1
estandarización.	321	446	403	458	595	842	1
Standardization	109	470	234	487	595	842	1
of	239	470	254	487	595	842	1
a	259	470	268	487	595	842	1
nested	273	470	326	487	595	842	1
RT-PCR	331	470	390	487	595	842	1
technique	395	470	472	487	595	842	1
for	477	470	499	487	595	842	1
alphavirus	224	487	306	504	595	842	1
detection	311	487	384	504	595	842	1
A	85	514	93	526	595	842	1
B	96	514	104	526	595	842	1
S	107	514	114	526	595	842	1
T	118	514	125	526	595	842	1
R	128	514	136	526	595	842	1
Keywords:	96	702	156	714	595	842	1
Alphavirus,	159	702	216	714	595	842	1
nested	219	702	253	714	595	842	1
RT-PCR,	256	702	298	714	595	842	1
standardization.	301	702	382	714	595	842	1
Fecha	85	729	108	739	595	842	1
de	111	729	121	739	595	842	1
recepción:	124	729	166	739	595	842	1
abril	168	729	186	739	595	842	1
2017.	189	729	212	739	595	842	1
Fecha	215	729	238	739	595	842	1
de	241	729	251	739	595	842	1
aceptación:	254	729	300	739	595	842	1
julio	303	729	320	739	595	842	1
2017	323	729	343	739	595	842	1
Autor	85	739	110	748	595	842	1
correspondiente:	113	739	189	748	595	842	1
Laura	192	739	218	748	595	842	1
Mendoza,	221	739	263	748	595	842	1
Departamento	266	739	324	748	595	842	1
de	327	739	336	748	595	842	1
Salud	339	739	362	748	595	842	1
Pública,	365	739	396	748	595	842	1
Instituto	399	739	432	748	595	842	1
de	435	739	445	748	595	842	1
Investigaciones	448	739	510	748	595	842	1
en	513	739	523	748	595	842	1
Ciencias	198	749	231	758	595	842	1
de	234	749	244	758	595	842	1
la	247	749	253	758	595	842	1
Salud,	256	749	282	758	595	842	1
Universidad	285	749	332	758	595	842	1
Nacional	334	749	368	758	595	842	1
de	371	749	381	758	595	842	1
Asunción,	384	749	422	758	595	842	1
Cecilio	425	749	452	758	595	842	1
Báez,	454	749	476	758	595	842	1
CP	479	749	490	758	595	842	1
930,	492	749	510	758	595	842	1
Campus	198	758	231	768	595	842	1
Universitario,	233	758	287	768	595	842	1
San	290	758	305	768	595	842	1
Lorenzo,	308	758	342	768	595	842	1
Paraguay.	346	758	386	768	595	842	1
Email:	198	768	226	778	595	842	1
lauramendozatorres@gmail.com	229	768	359	778	595	842	1
Bernal	85	28	111	38	595	842	2
et	114	28	121	38	595	842	2
al.	124	28	134	38	595	842	2
Estandarización	301	28	364	38	595	842	2
de	367	28	376	38	595	842	2
una	379	28	394	38	595	842	2
técnica	397	28	425	38	595	842	2
de	428	28	438	38	595	842	2
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	2
anidada	474	28	505	38	595	842	2
INTRODUCCIÓN	85	57	176	69	595	842	2
El	96	75	106	87	595	842	2
género	109	75	144	87	595	842	2
Alphavirus	148	75	201	87	595	842	2
incluye	205	75	240	87	595	842	2
a	244	75	250	87	595	842	2
31	254	75	266	87	595	842	2
especies	270	75	313	87	595	842	2
virales	317	75	349	87	595	842	2
(1)	353	75	369	87	595	842	2
cuyo	373	75	396	87	595	842	2
genoma	400	75	441	87	595	842	2
consiste	445	75	485	87	595	842	2
en	489	75	501	87	595	842	2
una	505	75	524	87	595	842	2
cadena	85	87	121	99	595	842	2
de	125	87	138	99	595	842	2
ARN	142	87	163	99	595	842	2
49S	168	87	187	99	595	842	2
de	192	87	204	99	595	842	2
sentido	208	87	245	99	595	842	2
positivo	249	87	288	99	595	842	2
de	292	87	305	99	595	842	2
aproximadamente	309	87	400	99	595	842	2
11.400	405	87	440	99	595	842	2
nucleótidos	444	87	501	99	595	842	2
que	505	87	524	99	595	842	2
codifica	85	99	123	111	595	842	2
para	127	99	150	111	595	842	2
las	155	99	168	111	595	842	2
proteínas	173	99	220	111	595	842	2
estructurales	224	99	290	111	595	842	2
y	294	99	300	111	595	842	2
no	305	99	317	111	595	842	2
estructurales	322	99	387	111	595	842	2
(2).	391	99	411	111	595	842	2
Se	415	99	428	111	595	842	2
clasifican	432	99	478	111	595	842	2
basados	483	99	524	111	595	842	2
en	85	111	97	124	595	842	2
las	103	111	117	124	595	842	2
características	123	111	194	124	595	842	2
fenotípicas	200	111	254	124	595	842	2
y	259	111	265	124	595	842	2
filogenéticas	271	111	333	124	595	842	2
que	339	111	358	124	595	842	2
los	363	111	377	124	595	842	2
dividen	383	111	419	124	595	842	2
en	425	111	437	124	595	842	2
dos	442	111	460	124	595	842	2
grupos:	465	111	504	124	595	842	2
los	510	111	524	124	595	842	2
virus	85	123	110	136	595	842	2
artríticos	114	123	159	136	595	842	2
o	164	123	170	136	595	842	2
del	174	123	190	136	595	842	2
Viejo	194	123	220	136	595	842	2
Mundo,	224	123	262	136	595	842	2
donde	267	123	297	136	595	842	2
resaltan	302	123	343	136	595	842	2
los	348	123	362	136	595	842	2
virus	367	123	391	136	595	842	2
O´nyong	396	123	441	136	595	842	2
nyong	446	123	477	136	595	842	2
(ONNV),	482	123	524	136	595	842	2
Sindbis	85	136	121	148	595	842	2
(SINV),	126	136	164	148	595	842	2
chikungunya	168	136	231	148	595	842	2
(CHIKV),	235	136	280	148	595	842	2
Semliki	284	136	321	148	595	842	2
Forest	325	136	356	148	595	842	2
(SFV)	360	136	389	148	595	842	2
y	393	136	399	148	595	842	2
Ross	403	136	426	148	595	842	2
River	430	136	456	148	595	842	2
(RRV).	460	136	493	148	595	842	2
Y	497	136	503	148	595	842	2
por	507	136	524	148	595	842	2
otro	85	148	106	160	595	842	2
lado,	111	148	136	160	595	842	2
los	142	148	156	160	595	842	2
virus	162	148	187	160	595	842	2
encefalíticos	193	148	254	160	595	842	2
o	260	148	266	160	595	842	2
del	272	148	287	160	595	842	2
Nuevo	293	148	325	160	595	842	2
Mundo	331	148	365	160	595	842	2
con	371	148	388	160	595	842	2
referentes	394	148	446	160	595	842	2
como	452	148	479	160	595	842	2
el	485	148	493	160	595	842	2
virus	499	148	524	160	595	842	2
Mayaro	85	160	122	172	595	842	2
(MAYV),	127	160	169	172	595	842	2
virus	174	160	199	172	595	842	2
de	205	160	217	172	595	842	2
encefalitis	223	160	273	172	595	842	2
equina	279	160	313	172	595	842	2
venezolana	318	160	375	172	595	842	2
(VEEV),	381	160	420	172	595	842	2
virus	425	160	450	172	595	842	2
de	456	160	468	172	595	842	2
encefalitis	474	160	524	172	595	842	2
equina	85	172	119	184	595	842	2
del	122	172	137	184	595	842	2
este	141	172	162	184	595	842	2
(EEEV)	165	172	200	184	595	842	2
y	203	172	209	184	595	842	2
el	213	172	222	184	595	842	2
virus	225	172	250	184	595	842	2
de	253	172	265	184	595	842	2
encefalitis	269	172	319	184	595	842	2
equina	323	172	356	184	595	842	2
occidental	360	172	410	184	595	842	2
(WEEV)	414	172	452	184	595	842	2
(2).	455	172	475	184	595	842	2
Para	96	184	119	197	595	842	2
establecer	127	184	179	197	595	842	2
y	187	184	193	197	595	842	2
mantener	202	184	250	197	595	842	2
un	259	184	272	197	595	842	2
ciclo	280	184	303	197	595	842	2
de	311	184	323	197	595	842	2
transmisión	332	184	390	197	595	842	2
viral	399	184	421	197	595	842	2
tres	429	184	449	197	595	842	2
factores	457	184	497	197	595	842	2
son	506	184	524	197	595	842	2
esenciales:	85	196	141	209	595	842	2
el	145	196	154	209	595	842	2
virus,	158	196	187	209	595	842	2
un	191	196	204	209	595	842	2
artrópodo	208	196	257	209	595	842	2
que	261	196	280	209	595	842	2
actúa	285	196	312	209	595	842	2
como	316	196	343	209	595	842	2
vector	348	196	379	209	595	842	2
y	384	196	390	209	595	842	2
un	394	196	406	209	595	842	2
vertebrado,	411	196	469	209	595	842	2
que	473	196	492	209	595	842	2
actúa	497	196	524	209	595	842	2
como	85	209	112	221	595	842	2
hospedador	117	209	176	221	595	842	2
(2).	181	209	200	221	595	842	2
Los	205	209	221	221	595	842	2
vectores	227	209	269	221	595	842	2
son	274	209	291	221	595	842	2
casi	297	209	316	221	595	842	2
en	321	209	333	221	595	842	2
su	338	209	349	221	595	842	2
totalidad	354	209	398	221	595	842	2
mosquitos	403	209	455	221	595	842	2
de	460	209	472	221	595	842	2
la	477	209	486	221	595	842	2
familia	490	209	524	221	595	842	2
Culicidae	85	221	130	233	595	842	2
de	135	221	147	233	595	842	2
los	151	221	166	233	595	842	2
géneros	170	221	210	233	595	842	2
Aedes	215	221	245	233	595	842	2
y	250	221	256	233	595	842	2
Culex	260	221	288	233	595	842	2
(3).	293	221	312	233	595	842	2
La	316	221	328	233	595	842	2
mayoría	332	221	373	233	595	842	2
de	378	221	390	233	595	842	2
aquellos	395	221	436	233	595	842	2
transmitidos	440	221	503	233	595	842	2
por	507	221	524	233	595	842	2
Culex	85	233	113	245	595	842	2
tienen	117	233	149	245	595	842	2
reservorios	153	233	209	245	595	842	2
aviares	213	233	250	245	595	842	2
y	254	233	260	245	595	842	2
causan	264	233	299	245	595	842	2
enfermedades	304	233	375	245	595	842	2
similares	380	233	424	245	595	842	2
a	428	233	434	245	595	842	2
encefalitis	439	233	489	245	595	842	2
en	493	233	506	245	595	842	2
los	510	233	524	245	595	842	2
huéspedes	85	245	138	257	595	842	2
(3).	144	245	163	257	595	842	2
Los	168	245	185	257	595	842	2
que	190	245	209	257	595	842	2
son	214	245	232	257	595	842	2
transmitidos	237	245	300	257	595	842	2
por	305	245	321	257	595	842	2
especies	327	245	369	257	595	842	2
del	375	245	390	257	595	842	2
género	395	245	430	257	595	842	2
Aedes	436	245	466	257	595	842	2
tienen	471	245	502	257	595	842	2
por	508	245	524	257	595	842	2
reservorios	85	257	141	269	595	842	2
a	145	257	151	269	595	842	2
primates	154	257	198	269	595	842	2
o	202	257	208	269	595	842	2
circulan	212	257	250	269	595	842	2
entre	254	257	280	269	595	842	2
humanos	284	257	330	269	595	842	2
y	333	257	339	269	595	842	2
mosquitos,	343	257	398	269	595	842	2
sin	402	257	416	269	595	842	2
un	420	257	432	269	595	842	2
reservorio	436	257	487	269	595	842	2
animal	490	257	524	269	595	842	2
adicional	85	269	129	282	595	842	2
en	133	269	145	282	595	842	2
los	149	269	163	282	595	842	2
llamados	166	269	211	282	595	842	2
ciclos	214	269	241	282	595	842	2
selvático	245	269	289	282	595	842	2
o	292	269	298	282	595	842	2
urbano	302	269	337	282	595	842	2
(3).	341	269	360	282	595	842	2
Los	96	282	113	294	595	842	2
síntomas	118	282	164	294	595	842	2
clínicos	169	282	205	294	595	842	2
de	211	282	223	294	595	842	2
las	228	282	242	294	595	842	2
alfavirosis	247	282	298	294	595	842	2
varían	303	282	334	294	595	842	2
de	339	282	352	294	595	842	2
fiebre	357	282	386	294	595	842	2
y	391	282	397	294	595	842	2
sarpullidos	402	282	456	294	595	842	2
a	461	282	467	294	595	842	2
patologías	473	282	524	294	595	842	2
inflamatorias	85	294	150	306	595	842	2
significativas	154	294	219	306	595	842	2
incluyendo	222	294	276	306	595	842	2
encefalitis	279	294	330	306	595	842	2
y	333	294	339	306	595	842	2
artritis	343	294	376	306	595	842	2
severa	379	294	412	306	595	842	2
(2).	416	294	435	306	595	842	2
La	96	306	108	318	595	842	2
distribución	115	306	173	318	595	842	2
de	181	306	193	318	595	842	2
los	200	306	214	318	595	842	2
alfavirus	222	306	264	318	595	842	2
es	272	306	283	318	595	842	2
mundial	290	306	330	318	595	842	2
y	337	306	343	318	595	842	2
han	351	306	369	318	595	842	2
sido	377	306	397	318	595	842	2
reportados	404	306	459	318	595	842	2
en	466	306	478	318	595	842	2
todo	485	306	508	318	595	842	2
el	515	306	524	318	595	842	2
continente	85	318	138	330	595	842	2
americano	144	318	196	330	595	842	2
(4).	202	318	221	330	595	842	2
Entre	227	318	254	330	595	842	2
los	260	318	274	330	595	842	2
de	280	318	292	330	595	842	2
importancia	298	318	358	330	595	842	2
médica	363	318	399	330	595	842	2
detectados	405	318	460	330	595	842	2
en	466	318	478	330	595	842	2
Brasil	484	318	512	330	595	842	2
y	518	318	524	330	595	842	2
Argentina	85	330	134	342	595	842	2
se	138	330	149	342	595	842	2
encuentran	153	330	209	342	595	842	2
el	213	330	222	342	595	842	2
VEEV	226	330	252	342	595	842	2
(Pixuna	256	330	294	342	595	842	2
y	298	330	304	342	595	842	2
Río	308	330	323	342	595	842	2
Negro),	327	330	365	342	595	842	2
EEEV,	369	330	399	342	595	842	2
WEE,	402	330	429	342	595	842	2
MAYV,	432	330	464	342	595	842	2
CHIKV	468	330	501	342	595	842	2
(5).	505	330	524	342	595	842	2
En	85	342	98	355	595	842	2
lo	104	342	113	355	595	842	2
que	120	342	138	355	595	842	2
respecta	145	342	187	355	595	842	2
a	194	342	200	355	595	842	2
Paraguay,	206	342	257	355	595	842	2
en	263	342	276	355	595	842	2
junio	282	342	307	355	595	842	2
del	314	342	328	355	595	842	2
2014	335	342	360	355	595	842	2
se	367	342	378	355	595	842	2
reportó	385	342	421	355	595	842	2
el	428	342	436	355	595	842	2
primer	443	342	476	355	595	842	2
caso	483	342	505	355	595	842	2
de	512	342	524	355	595	842	2
alfavirosis,	85	355	139	367	595	842	2
específicamente	144	355	224	367	595	842	2
atribuido	229	355	273	367	595	842	2
al	277	355	286	367	595	842	2
CHIKV	291	355	323	367	595	842	2
(6),	327	355	346	367	595	842	2
siendo	351	355	383	367	595	842	2
este	388	355	409	367	595	842	2
el	413	355	421	367	595	842	2
único	426	355	453	367	595	842	2
de	457	355	469	367	595	842	2
su	473	355	485	367	595	842	2
género	489	355	524	367	595	842	2
estudiado	85	367	134	379	595	842	2
hasta	139	367	167	379	595	842	2
la	172	367	181	379	595	842	2
fecha	186	367	213	379	595	842	2
en	218	367	230	379	595	842	2
el	236	367	244	379	595	842	2
país.	250	367	274	379	595	842	2
Sin	279	367	295	379	595	842	2
embargo,	300	367	348	379	595	842	2
es	353	367	364	379	595	842	2
de	370	367	382	379	595	842	2
esperar	387	367	425	379	595	842	2
que	431	367	449	379	595	842	2
circulen	454	367	493	379	595	842	2
otros	498	367	524	379	595	842	2
alfavirus	85	379	128	391	595	842	2
debido	133	379	166	391	595	842	2
a	171	379	177	391	595	842	2
la	182	379	191	391	595	842	2
presencia	196	379	244	391	595	842	2
de	249	379	261	391	595	842	2
gran	266	379	289	391	595	842	2
variedad	294	379	337	391	595	842	2
de	342	379	354	391	595	842	2
especies	359	379	402	391	595	842	2
de	407	379	419	391	595	842	2
mosquitos	424	379	475	391	595	842	2
(7)	480	379	496	391	595	842	2
y	501	379	507	391	595	842	2
de	512	379	524	391	595	842	2
aves	85	391	108	403	595	842	2
(8)	119	391	134	403	595	842	2
en	144	391	156	403	595	842	2
el	167	391	175	403	595	842	2
territorio	185	391	230	403	595	842	2
que	240	391	259	403	595	842	2
pueden	269	391	306	403	595	842	2
actuar	316	391	348	403	595	842	2
como	358	391	386	403	595	842	2
vectores	396	391	438	403	595	842	2
y	448	391	454	403	595	842	2
reservorios,	465	391	524	403	595	842	2
respectivamente	85	403	168	415	595	842	2
además	176	403	215	415	595	842	2
de	223	403	236	415	595	842	2
las	244	403	257	415	595	842	2
condiciones	265	403	323	415	595	842	2
climáticas,	331	403	384	415	595	842	2
la	392	403	401	415	595	842	2
deforestación	409	403	476	415	595	842	2
y	484	403	490	415	595	842	2
otros	498	403	524	415	595	842	2
factores	85	415	125	427	595	842	2
favorables	129	415	181	427	595	842	2
(3).	184	415	203	427	595	842	2
La	96	427	108	439	595	842	2
transcripción	116	427	181	439	595	842	2
reversa	189	427	227	439	595	842	2
de	235	427	247	439	595	842	2
ARN	256	427	277	439	595	842	2
seguida	285	427	324	439	595	842	2
de	332	427	344	439	595	842	2
una	353	427	371	439	595	842	2
reacción	380	427	421	439	595	842	2
en	430	427	442	439	595	842	2
cadena	451	427	486	439	595	842	2
de	495	427	507	439	595	842	2
la	515	427	524	439	595	842	2
polimerasa	85	440	140	452	595	842	2
(RT-PCR)	145	440	192	452	595	842	2
anidada	197	440	236	452	595	842	2
es	241	440	253	452	595	842	2
una	258	440	276	452	595	842	2
herramienta	281	440	343	452	595	842	2
rápida,	348	440	383	452	595	842	2
sensible	388	440	428	452	595	842	2
y	433	440	439	452	595	842	2
específica	444	440	493	452	595	842	2
en	498	440	510	452	595	842	2
el	515	440	524	452	595	842	2
estudio	85	452	122	464	595	842	2
de	129	452	141	464	595	842	2
virus	149	452	173	464	595	842	2
(9-11).	181	452	218	464	595	842	2
Los	225	452	242	464	595	842	2
cebadores	249	452	301	464	595	842	2
diseñados	308	452	358	464	595	842	2
por	366	452	382	464	595	842	2
Sánchez	390	452	432	464	595	842	2
Seco	439	452	463	464	595	842	2
et	471	452	481	464	595	842	2
al.	489	452	501	464	595	842	2
(9)	509	452	524	464	595	842	2
amplifican	85	464	137	476	595	842	2
el	143	464	152	476	595	842	2
gen	159	464	177	476	595	842	2
nsP4,	184	464	212	476	595	842	2
altamente	219	464	269	476	595	842	2
conservado	276	464	333	476	595	842	2
en	340	464	352	476	595	842	2
todos	359	464	386	476	595	842	2
los	393	464	407	476	595	842	2
alfavirus	414	464	457	476	595	842	2
(2),	464	464	483	476	595	842	2
lo	489	464	498	476	595	842	2
que	505	464	524	476	595	842	2
permite	85	476	124	488	595	842	2
una	129	476	148	488	595	842	2
detección	153	476	201	488	595	842	2
genérica.	206	476	253	488	595	842	2
Por	258	476	274	488	595	842	2
ello,	280	476	301	488	595	842	2
se	306	476	318	488	595	842	2
diseñó	323	476	356	488	595	842	2
este	361	476	382	488	595	842	2
estudio	387	476	424	488	595	842	2
con	429	476	447	488	595	842	2
el	452	476	461	488	595	842	2
objetivo	466	476	507	488	595	842	2
de	512	476	524	488	595	842	2
estandarizar	85	488	147	500	595	842	2
y	153	488	159	500	595	842	2
determinar	164	488	219	500	595	842	2
el	225	488	233	500	595	842	2
límite	238	488	266	500	595	842	2
de	272	488	284	500	595	842	2
detección	289	488	336	500	595	842	2
de	342	488	354	500	595	842	2
una	359	488	378	500	595	842	2
técnica	383	488	419	500	595	842	2
de	424	488	436	500	595	842	2
RT-PCR	441	488	480	500	595	842	2
anidada	485	488	524	500	595	842	2
para	85	500	108	512	595	842	2
la	111	500	120	512	595	842	2
detección	123	500	171	512	595	842	2
de	175	500	187	512	595	842	2
alfavirus.	190	500	237	512	595	842	2
MATERIALES	85	525	157	537	595	842	2
Y	161	525	168	537	595	842	2
MÉTODOS	172	525	227	537	595	842	2
Diseño	85	543	123	555	595	842	2
y	127	543	133	555	595	842	2
muestras	137	543	189	555	595	842	2
utilizadas	192	543	247	555	595	842	2
Se	96	555	109	567	595	842	2
llevó	113	555	136	567	595	842	2
a	140	555	146	567	595	842	2
cabo	149	555	173	567	595	842	2
un	176	555	189	567	595	842	2
estudio	192	555	229	567	595	842	2
observacional	232	555	301	567	595	842	2
descriptivo	305	555	359	567	595	842	2
de	362	555	375	567	595	842	2
corte	378	555	404	567	595	842	2
transverso.	407	555	464	567	595	842	2
Como	96	567	125	579	595	842	2
control	130	567	165	579	595	842	2
positivo	169	567	208	579	595	842	2
para	213	567	235	579	595	842	2
la	240	567	249	579	595	842	2
optimización	254	567	317	579	595	842	2
de	321	567	333	579	595	842	2
la	338	567	347	579	595	842	2
RT-PCR	351	567	389	579	595	842	2
anidada	394	567	434	579	595	842	2
para	438	567	461	579	595	842	2
alfavirus	466	567	508	579	595	842	2
se	513	567	524	579	595	842	2
utilizaron	85	579	131	591	595	842	2
aislados	136	579	176	591	595	842	2
de	181	579	193	591	595	842	2
las	197	579	211	591	595	842	2
cepas	216	579	244	591	595	842	2
de	249	579	261	591	595	842	2
VEEV	265	579	292	591	595	842	2
IAB	296	579	314	591	595	842	2
(TC-83)	319	579	358	591	595	842	2
y	363	579	369	591	595	842	2
VEEV	373	579	399	591	595	842	2
subtipo	404	579	441	591	595	842	2
VI	445	579	456	591	595	842	2
(AG80-663),	461	579	524	591	595	842	2
que	85	591	104	604	595	842	2
fueron	107	591	140	604	595	842	2
cedidos	144	591	181	604	595	842	2
por	185	591	201	604	595	842	2
el	205	591	214	604	595	842	2
Laboratorio	217	591	275	604	595	842	2
de	278	591	290	604	595	842	2
Arbovirus	294	591	342	604	595	842	2
del	346	591	360	604	595	842	2
Instituto	364	591	407	604	595	842	2
de	410	591	423	604	595	842	2
Virología	426	591	470	604	595	842	2
JM	474	591	487	604	595	842	2
Vanela	490	591	524	604	595	842	2
de	85	603	97	616	595	842	2
la	103	603	112	616	595	842	2
Universidad	118	603	177	616	595	842	2
Nacional	182	603	225	616	595	842	2
de	231	603	243	616	595	842	2
Córdoba,	249	603	294	616	595	842	2
UNC,	300	603	325	616	595	842	2
Argentina.	331	603	383	616	595	842	2
Como	389	603	418	616	595	842	2
control	423	603	458	616	595	842	2
negativo	464	603	507	616	595	842	2
se	513	603	524	616	595	842	2
utilizó	85	616	115	628	595	842	2
agua	119	616	143	628	595	842	2
libre	146	616	168	628	595	842	2
de	172	616	184	628	595	842	2
RNAsa	188	616	220	628	595	842	2
(Amresco,	224	616	275	628	595	842	2
Canadá).	279	616	325	628	595	842	2
Para	96	628	119	640	595	842	2
determinar	125	628	181	640	595	842	2
el	187	628	196	640	595	842	2
límite	202	628	230	640	595	842	2
de	237	628	249	640	595	842	2
detección	255	628	303	640	595	842	2
se	309	628	320	640	595	842	2
utilizó	327	628	357	640	595	842	2
una	363	628	382	640	595	842	2
cepa	388	628	412	640	595	842	2
de	418	628	431	640	595	842	2
VEEV	437	628	463	640	595	842	2
subtipo	470	628	507	640	595	842	2
VI	513	628	524	640	595	842	2
(AG80-663)	85	640	145	652	595	842	2
aislado	149	640	184	652	595	842	2
de	187	640	200	652	595	842	2
mosquitos	203	640	255	652	595	842	2
Culex	259	640	286	652	595	842	2
(Melanoconion)	290	640	367	652	595	842	2
delpontei	371	640	417	652	595	842	2
con	421	640	439	652	595	842	2
título	442	640	468	652	595	842	2
de	471	640	484	652	595	842	2
4,6.10	487	640	520	652	595	842	2
8	520	639	524	647	595	842	2
UFP/mL.	85	652	128	664	595	842	2
En	131	652	144	664	595	842	2
la	147	652	156	664	595	842	2
Figura	160	652	191	664	595	842	2
1	194	652	201	664	595	842	2
se	204	652	215	664	595	842	2
observa	219	652	259	664	595	842	2
un	262	652	275	664	595	842	2
flujograma	278	652	332	664	595	842	2
del	336	652	351	664	595	842	2
trabajo	354	652	390	664	595	842	2
llevado	394	652	430	664	595	842	2
a	433	652	439	664	595	842	2
cabo.	443	652	470	664	595	842	2
Extracción	85	676	144	689	595	842	2
de	147	676	161	689	595	842	2
ARN	164	676	189	689	595	842	2
viral	192	676	217	689	595	842	2
Para	96	689	119	701	595	842	2
extraer	123	689	159	701	595	842	2
ARN	163	689	184	701	595	842	2
a	188	689	194	701	595	842	2
partir	198	689	226	701	595	842	2
de	230	689	242	701	595	842	2
controles	246	689	292	701	595	842	2
positivos	296	689	340	701	595	842	2
se	344	689	356	701	595	842	2
utilizó	360	689	390	701	595	842	2
un	393	689	406	701	595	842	2
kit	410	689	423	701	595	842	2
comercial	427	689	475	701	595	842	2
(QIAamp	479	689	524	701	595	842	2
Viral	85	701	108	713	595	842	2
RNA,	112	701	137	713	595	842	2
USA)	140	701	166	713	595	842	2
de	170	701	182	713	595	842	2
acuerdo	186	701	226	713	595	842	2
a	230	701	236	713	595	842	2
las	239	701	253	713	595	842	2
instrucciones	257	701	323	713	595	842	2
del	326	701	341	713	595	842	2
fabricante.	345	701	399	713	595	842	2
El	407	701	416	713	595	842	2
volumen	420	701	463	713	595	842	2
de	467	701	479	713	595	842	2
muestra	482	701	524	713	595	842	2
utilizado	85	713	127	725	595	842	2
para	131	713	153	725	595	842	2
la	157	713	166	725	595	842	2
extracción	169	713	221	725	595	842	2
fue	224	713	240	725	595	842	2
de	244	713	256	725	595	842	2
140	259	713	278	725	595	842	2
µl	282	713	291	725	595	842	2
y	295	713	301	725	595	842	2
la	304	713	313	725	595	842	2
elución	317	713	352	725	595	842	2
se	355	713	367	725	595	842	2
realizó	370	713	403	725	595	842	2
en	407	713	419	725	595	842	2
un	422	713	435	725	595	842	2
volumen	439	713	482	725	595	842	2
total	485	713	508	725	595	842	2
de	512	713	524	725	595	842	2
60	85	725	98	737	595	842	2
µL	104	725	116	737	595	842	2
de	122	725	134	737	595	842	2
tampón	140	725	178	737	595	842	2
de	184	725	196	737	595	842	2
elución	202	725	238	737	595	842	2
agregado	244	725	291	737	595	842	2
en	296	725	309	737	595	842	2
dos	315	725	332	737	595	842	2
etapas	338	725	372	737	595	842	2
de	378	725	390	737	595	842	2
30	396	725	409	737	595	842	2
µL	415	725	427	737	595	842	2
para	433	725	455	737	595	842	2
aumentar	461	725	510	737	595	842	2
el	515	725	524	737	595	842	2
rendimiento.	85	737	149	749	595	842	2
El	152	737	162	749	595	842	2
ARN	165	737	187	749	595	842	2
extraído	190	737	231	749	595	842	2
fue	234	737	250	749	595	842	2
almacenado	254	737	314	749	595	842	2
a	318	737	324	749	595	842	2
-70°C	327	737	357	749	595	842	2
hasta	361	737	388	749	595	842	2
su	392	737	403	749	595	842	2
procesamiento.	407	737	484	749	595	842	2
Mem.	85	796	107	806	595	842	2
Inst.	110	796	128	806	595	842	2
Investig.	131	796	167	806	595	842	2
Cienc.	169	796	194	806	595	842	2
Salud.	197	796	222	806	595	842	2
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	2
31	507	796	517	806	595	842	2
Bernal	85	28	111	38	595	842	3
et	114	28	121	38	595	842	3
al.	124	28	134	38	595	842	3
Estandarización	301	28	364	38	595	842	3
de	367	28	376	38	595	842	3
una	379	28	394	38	595	842	3
técnica	397	28	425	38	595	842	3
de	428	28	438	38	595	842	3
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	3
anidada	474	28	505	38	595	842	3
Retrotranscripción	85	57	190	69	595	842	3
La	96	69	108	81	595	842	3
retrotranscripción	113	69	202	81	595	842	3
se	207	69	218	81	595	842	3
realizó	223	69	257	81	595	842	3
para	262	69	284	81	595	842	3
la	289	69	298	81	595	842	3
obtención	303	69	352	81	595	842	3
de	357	69	369	81	595	842	3
ADN	374	69	396	81	595	842	3
complementario	401	69	483	81	595	842	3
(ADNc)	487	69	524	81	595	842	3
utilizando	85	81	134	93	595	842	3
cebadores	138	81	189	93	595	842	3
aleatorios	193	81	242	93	595	842	3
que	247	81	265	93	595	842	3
consisten	269	81	316	93	595	842	3
en	321	81	333	93	595	842	3
un	338	81	350	93	595	842	3
ADN	355	81	377	93	595	842	3
sintético	381	81	423	93	595	842	3
de	427	81	440	93	595	842	3
seis	444	81	463	93	595	842	3
nucleótidos	467	81	524	93	595	842	3
con	85	93	103	105	595	842	3
secuencias	106	93	161	105	595	842	3
aleatorias	164	93	213	105	595	842	3
de	216	93	229	105	595	842	3
las	232	93	246	105	595	842	3
bases	250	93	278	105	595	842	3
A,	281	93	292	105	595	842	3
T,	296	93	305	105	595	842	3
C	309	93	316	105	595	842	3
y	319	93	325	105	595	842	3
G	329	93	336	105	595	842	3
(Biodynamics,	340	93	411	105	595	842	3
Argentina).	415	93	472	105	595	842	3
Esta	96	105	118	118	595	842	3
reacción	124	105	166	118	595	842	3
se	171	105	183	118	595	842	3
llevó	188	105	212	118	595	842	3
a	218	105	224	118	595	842	3
cabo	229	105	253	118	595	842	3
de	259	105	271	118	595	842	3
acuerdo	277	105	317	118	595	842	3
a	323	105	329	118	595	842	3
las	334	105	349	118	595	842	3
instrucciones	354	105	420	118	595	842	3
de	426	105	438	118	595	842	3
la	444	105	453	118	595	842	3
transcriptasa	458	105	524	118	595	842	3
reversa	85	117	123	130	595	842	3
(Thermo	127	117	171	130	595	842	3
Scientific	175	117	220	130	595	842	3
RevertAid	225	117	274	130	595	842	3
H	278	117	286	130	595	842	3
Minus	290	117	319	130	595	842	3
Reverse	324	117	364	130	595	842	3
Transcriptasa,	369	117	440	130	595	842	3
EEUU)	445	117	477	130	595	842	3
(12).	481	117	507	130	595	842	3
Se	512	117	524	130	595	842	3
preparó	85	130	124	142	595	842	3
la	128	130	137	142	595	842	3
mezcla	141	130	176	142	595	842	3
de	180	130	192	142	595	842	3
reacción	196	130	238	142	595	842	3
con	242	130	259	142	595	842	3
5	263	130	270	142	595	842	3
µl	274	130	283	142	595	842	3
de	287	130	299	142	595	842	3
la	303	130	312	142	595	842	3
muestra	316	130	357	142	595	842	3
de	361	130	374	142	595	842	3
ARN	377	130	399	142	595	842	3
extraído,	403	130	447	142	595	842	3
4	451	130	458	142	595	842	3
µL	462	130	474	142	595	842	3
de	478	130	491	142	595	842	3
buffer	494	130	524	142	595	842	3
5x,	85	142	101	154	595	842	3
8	105	142	112	154	595	842	3
µL	116	142	128	154	595	842	3
de	132	142	145	154	595	842	3
desoxinucleótidos	149	142	238	154	595	842	3
trifosfato	242	142	288	154	595	842	3
2,5	292	142	308	154	595	842	3
mM	313	142	331	154	595	842	3
(dNTPs:	335	142	375	154	595	842	3
dATP,	379	142	409	154	595	842	3
dTTP,	413	142	441	154	595	842	3
dCTP,	445	142	475	154	595	842	3
dGTP),	479	142	513	154	595	842	3
1	517	142	524	154	595	842	3
µL	85	154	97	166	595	842	3
de	101	154	113	166	595	842	3
cebador	116	154	156	166	595	842	3
aleatorio,	160	154	207	166	595	842	3
1	211	154	217	166	595	842	3
µL	221	154	233	166	595	842	3
de	237	154	249	166	595	842	3
transcriptasa	252	154	318	166	595	842	3
reversa	321	154	359	166	595	842	3
200	362	154	381	166	595	842	3
U/µl,	385	154	410	166	595	842	3
0,5	413	154	430	166	595	842	3
µL	434	154	446	166	595	842	3
de	449	154	461	166	595	842	3
inhibidor	465	154	508	166	595	842	3
de	512	154	524	166	595	842	3
ribonucleasa	85	166	148	178	595	842	3
40	153	166	166	178	595	842	3
U/µL	171	166	195	178	595	842	3
(Termo	200	166	237	178	595	842	3
Scientific	242	166	288	178	595	842	3
RiboLock	293	166	337	178	595	842	3
RNase	343	166	374	178	595	842	3
Inhibitor,	379	166	426	178	595	842	3
USA)	431	166	457	178	595	842	3
y	462	166	468	178	595	842	3
0,5	473	166	489	178	595	842	3
µL	495	166	507	178	595	842	3
de	512	166	524	178	595	842	3
agua	85	178	110	191	595	842	3
libre	114	178	136	191	595	842	3
de	140	178	152	191	595	842	3
ARNsa	156	178	188	191	595	842	3
y	192	178	198	191	595	842	3
de	202	178	215	191	595	842	3
ADNsa	218	178	252	191	595	842	3
(Amresco,	256	178	307	191	595	842	3
Canadá).	311	178	357	191	595	842	3
Los	361	178	378	191	595	842	3
tubos,	382	178	414	191	595	842	3
con	417	178	435	191	595	842	3
un	439	178	452	191	595	842	3
volumen	456	178	499	191	595	842	3
final	503	178	524	191	595	842	3
de	85	190	97	203	595	842	3
20	102	190	114	203	595	842	3
µL,	118	190	134	203	595	842	3
fueron	138	190	171	203	595	842	3
incubados	175	190	225	203	595	842	3
en	229	190	242	203	595	842	3
termociclador	246	190	314	203	595	842	3
Esco	318	190	341	203	595	842	3
Healthcare	345	190	399	203	595	842	3
Swift	404	190	429	203	595	842	3
–	433	190	440	203	595	842	3
Max	444	190	464	203	595	842	3
Pro	469	190	485	203	595	842	3
a	489	190	495	203	595	842	3
25°C	499	190	524	203	595	842	3
por	85	203	102	215	595	842	3
10	105	203	118	215	595	842	3
minutos,	121	203	165	215	595	842	3
luego	169	203	196	215	595	842	3
120	200	203	219	215	595	842	3
minutos	222	203	263	215	595	842	3
a	266	203	272	215	595	842	3
42ºC	276	203	301	215	595	842	3
y	304	203	310	215	595	842	3
10	314	203	326	215	595	842	3
minutos	330	203	370	215	595	842	3
a	374	203	380	215	595	842	3
70ºC	383	203	409	215	595	842	3
(12).	412	203	438	215	595	842	3
Figura	96	567	132	579	595	842	3
1.	135	567	146	579	595	842	3
Flujograma	150	567	206	579	595	842	3
de	210	567	222	579	595	842	3
trabajo	225	567	261	579	595	842	3
Optimización	85	604	159	616	595	842	3
de	162	604	176	616	595	842	3
la	179	604	189	616	595	842	3
PCR	193	604	215	616	595	842	3
anidada	218	604	263	616	595	842	3
La	96	616	108	628	595	842	3
detección	112	616	160	628	595	842	3
del	163	616	178	628	595	842	3
genoma	182	616	222	628	595	842	3
de	226	616	238	628	595	842	3
alfavirus	242	616	285	628	595	842	3
en	289	616	301	628	595	842	3
controles	305	616	350	628	595	842	3
positivos	354	616	398	628	595	842	3
se	402	616	414	628	595	842	3
realizó	417	616	450	628	595	842	3
a	454	616	460	628	595	842	3
través	464	616	495	628	595	842	3
de	499	616	511	628	595	842	3
la	515	616	524	628	595	842	3
reacción	85	628	127	640	595	842	3
de	132	628	145	640	595	842	3
RT-PCR	150	628	187	640	595	842	3
anidada	193	628	232	640	595	842	3
genérica	237	628	280	640	595	842	3
descripta	285	628	331	640	595	842	3
por	336	628	352	640	595	842	3
Sánchez	358	628	400	640	595	842	3
Seco	405	628	429	640	595	842	3
et	435	628	445	640	595	842	3
al.	450	628	462	640	595	842	3
en	467	628	480	640	595	842	3
el	485	628	493	640	595	842	3
2001	499	628	524	640	595	842	3
(10).	85	640	111	652	595	842	3
Posteriormente,	96	652	177	665	595	842	3
los	180	652	194	665	595	842	3
productos	198	652	247	665	595	842	3
de	251	652	263	665	595	842	3
amplificación	267	652	332	665	595	842	3
obtenidos	336	652	385	665	595	842	3
fueron	388	652	421	665	595	842	3
sometidos	424	652	475	665	595	842	3
a	479	652	485	665	595	842	3
corrida	489	652	524	665	595	842	3
electroforética	85	664	157	677	595	842	3
en	162	664	174	677	595	842	3
gel	179	664	193	677	595	842	3
de	198	664	210	677	595	842	3
poliacrilamida	215	664	284	677	595	842	3
al	289	664	298	677	595	842	3
7%	302	664	319	677	595	842	3
seguida	324	664	363	677	595	842	3
de	367	664	379	677	595	842	3
tinción	384	664	417	677	595	842	3
con	422	664	440	677	595	842	3
nitrato	444	664	477	677	595	842	3
de	482	664	494	677	595	842	3
plata	499	664	524	677	595	842	3
descripta	85	677	131	689	595	842	3
por	136	677	153	689	595	842	3
Sanguinetti	158	677	215	689	595	842	3
et	221	677	231	689	595	842	3
al.	236	677	249	689	595	842	3
(13).	254	677	279	689	595	842	3
Para	285	677	307	689	595	842	3
identificar	312	677	362	689	595	842	3
el	367	677	376	689	595	842	3
tamaño	381	677	419	689	595	842	3
de	424	677	436	689	595	842	3
banda	442	677	473	689	595	842	3
se	478	677	489	689	595	842	3
utilizó	494	677	524	689	595	842	3
marcador	85	689	133	701	595	842	3
de	138	689	150	701	595	842	3
100	155	689	174	701	595	842	3
pares	179	689	207	701	595	842	3
de	212	689	224	701	595	842	3
bases	229	689	258	701	595	842	3
(Thermo	263	689	306	701	595	842	3
Scientific,	311	689	360	701	595	842	3
USA).	365	689	394	701	595	842	3
La	399	689	411	701	595	842	3
técnica	416	689	451	701	595	842	3
se	456	689	468	701	595	842	3
probó	473	689	502	701	595	842	3
con	507	689	524	701	595	842	3
concentraciones	85	701	166	713	595	842	3
diferentes	171	701	221	713	595	842	3
de	226	701	238	713	595	842	3
MgCl	243	701	268	713	595	842	3
2	268	706	272	714	595	842	3
y	277	701	283	713	595	842	3
diferentes	288	701	338	713	595	842	3
temperaturas	343	701	411	713	595	842	3
de	416	701	428	713	595	842	3
alineamiento	433	701	498	713	595	842	3
(Ta)	503	701	524	713	595	842	3
para	85	713	108	725	595	842	3
la	111	713	120	725	595	842	3
PCR	124	713	144	725	595	842	3
anidada.	147	713	190	725	595	842	3
Mem.	85	796	107	806	595	842	3
Inst.	110	796	128	806	595	842	3
Investig.	131	796	167	806	595	842	3
Cienc.	169	796	194	806	595	842	3
Salud.	197	796	222	806	595	842	3
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	3
32	507	796	517	806	595	842	3
Bernal	85	28	111	38	595	842	4
et	114	28	121	38	595	842	4
al.	124	28	134	38	595	842	4
Estandarización	301	28	364	38	595	842	4
de	367	28	376	38	595	842	4
una	379	28	394	38	595	842	4
técnica	397	28	425	38	595	842	4
de	428	28	438	38	595	842	4
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	4
anidada	474	28	505	38	595	842	4
Determinación	85	57	167	69	595	842	4
del	171	57	188	69	595	842	4
límite	191	57	223	69	595	842	4
de	226	57	240	69	595	842	4
detección	243	57	298	69	595	842	4
Para	96	69	119	81	595	842	4
hallar	123	69	151	81	595	842	4
el	156	69	165	81	595	842	4
límite	169	69	197	81	595	842	4
de	202	69	214	81	595	842	4
detección	218	69	266	81	595	842	4
fueron	270	69	303	81	595	842	4
preparadas	308	69	364	81	595	842	4
diluciones	368	69	418	81	595	842	4
seriadas	422	69	464	81	595	842	4
tomando	468	69	513	81	595	842	4
5	517	69	524	81	595	842	4
µL	85	81	97	93	595	842	4
del	103	81	118	93	595	842	4
ARN	124	81	146	93	595	842	4
extraído	151	81	193	93	595	842	4
y	198	81	204	93	595	842	4
mezclándolo	210	81	273	93	595	842	4
con	279	81	296	93	595	842	4
45	302	81	315	93	595	842	4
µL	321	81	333	93	595	842	4
de	339	81	351	93	595	842	4
agua	357	81	382	93	595	842	4
libre	388	81	410	93	595	842	4
de	416	81	428	93	595	842	4
ARNsa	434	81	466	93	595	842	4
(Amresco,	472	81	524	93	595	842	4
Canadá).	85	93	131	105	595	842	4
Las	135	93	152	105	595	842	4
diluciones	156	93	206	105	595	842	4
para	210	93	233	105	595	842	4
llevar	237	93	265	105	595	842	4
a	269	93	275	105	595	842	4
cabo	280	93	303	105	595	842	4
la	307	93	316	105	595	842	4
reacción	321	93	362	105	595	842	4
fueron	367	93	399	105	595	842	4
entre	404	93	430	105	595	842	4
10	434	93	447	105	595	842	4
-4	448	92	455	100	595	842	4
hasta	458	93	486	105	595	842	4
10	490	93	503	105	595	842	4
-11	503	92	514	100	595	842	4
a	518	93	524	105	595	842	4
fin	85	105	98	118	595	842	4
de	101	105	114	118	595	842	4
determinar	117	105	172	118	595	842	4
hasta	176	105	204	118	595	842	4
qué	207	105	225	118	595	842	4
título	229	105	255	118	595	842	4
es	258	105	269	118	595	842	4
posible	273	105	308	118	595	842	4
detectar	311	105	353	118	595	842	4
el	357	105	365	118	595	842	4
genoma	369	105	409	118	595	842	4
de	413	105	425	118	595	842	4
alfavirus.	428	105	475	118	595	842	4
Posteriormente	96	117	173	130	595	842	4
se	178	117	190	130	595	842	4
realizó	195	117	228	130	595	842	4
la	234	117	243	130	595	842	4
transcripción	248	117	313	130	595	842	4
reversa,	318	117	359	130	595	842	4
tal	365	117	377	130	595	842	4
como	383	117	410	130	595	842	4
ya	416	117	428	130	595	842	4
se	433	117	444	130	595	842	4
describió,	450	117	498	130	595	842	4
y	504	117	509	130	595	842	4
la	515	117	524	130	595	842	4
amplificación	85	130	150	142	595	842	4
del	154	130	169	142	595	842	4
gen	173	130	191	142	595	842	4
nsP4	195	130	219	142	595	842	4
por	222	130	239	142	595	842	4
la	242	130	251	142	595	842	4
RT-PCR	255	130	292	142	595	842	4
anidada	296	130	335	142	595	842	4
previamente	339	130	402	142	595	842	4
optimizada.	406	130	464	142	595	842	4
El	468	130	477	142	595	842	4
límite	480	130	508	142	595	842	4
de	512	130	524	142	595	842	4
detección	85	142	133	154	595	842	4
se	138	142	149	154	595	842	4
calculó	154	142	189	154	595	842	4
en	194	142	206	154	595	842	4
base	211	142	235	154	595	842	4
a	240	142	246	154	595	842	4
la	251	142	259	154	595	842	4
última	264	142	296	154	595	842	4
dilución	301	142	339	154	595	842	4
donde	345	142	375	154	595	842	4
fue	381	142	397	154	595	842	4
observada	402	142	453	154	595	842	4
amplificación	458	142	524	154	595	842	4
mediante	85	154	132	166	595	842	4
la	138	154	146	166	595	842	4
aparición	152	154	197	166	595	842	4
de	203	154	215	166	595	842	4
las	221	154	235	166	595	842	4
bandas	240	154	276	166	595	842	4
en	282	154	294	166	595	842	4
gel	300	154	315	166	595	842	4
de	320	154	332	166	595	842	4
poliacrilamida	338	154	407	166	595	842	4
teñido	413	154	444	166	595	842	4
con	450	154	467	166	595	842	4
nitrato	473	154	506	166	595	842	4
de	512	154	524	166	595	842	4
plata	85	166	110	178	595	842	4
(13).	114	166	139	178	595	842	4
El	142	166	152	178	595	842	4
ensayo	155	166	191	178	595	842	4
se	194	166	205	178	595	842	4
realizó	209	166	242	178	595	842	4
por	245	166	262	178	595	842	4
triplicado.	265	166	315	178	595	842	4
RESULTADOS	85	190	160	203	595	842	4
Estandarización	96	203	186	215	595	842	4
de	189	203	203	215	595	842	4
la	206	203	216	215	595	842	4
RT-PCR	219	203	261	215	595	842	4
anidada	265	203	309	215	595	842	4
para	313	203	338	215	595	842	4
detección	341	203	396	215	595	842	4
de	399	203	413	215	595	842	4
alfavirus	416	203	465	215	595	842	4
Respecto	96	215	142	227	595	842	4
a	149	215	155	227	595	842	4
la	161	215	170	227	595	842	4
temperatura	177	215	239	227	595	842	4
de	246	215	258	227	595	842	4
alineamiento	265	215	329	227	595	842	4
(Ta),	336	215	361	227	595	842	4
al	368	215	376	227	595	842	4
utilizar	383	215	417	227	595	842	4
el	424	215	432	227	595	842	4
control	439	215	473	227	595	842	4
VEEV	480	215	507	227	595	842	4
VI	513	215	524	227	595	842	4
(AG80-663)	85	227	145	239	595	842	4
se	150	227	161	239	595	842	4
observó	166	227	206	239	595	842	4
amplificación	211	227	276	239	595	842	4
a	281	227	287	239	595	842	4
ambas	292	227	325	239	595	842	4
temperaturas	330	227	398	239	595	842	4
testadas,	403	227	449	239	595	842	4
52ºC	454	227	479	239	595	842	4
y	484	227	490	239	595	842	4
54ºC,	495	227	524	239	595	842	4
sin	85	239	99	251	595	842	4
diferencias	107	239	161	251	595	842	4
en	168	239	181	251	595	842	4
la	188	239	197	251	595	842	4
intensidad	204	239	256	251	595	842	4
de	263	239	275	251	595	842	4
las	282	239	297	251	595	842	4
bandas	304	239	340	251	595	842	4
obtenidas.	347	239	399	251	595	842	4
Por	407	239	423	251	595	842	4
otro	431	239	451	251	595	842	4
lado,	458	239	483	251	595	842	4
con	490	239	508	251	595	842	4
la	515	239	524	251	595	842	4
utilización	85	251	135	263	595	842	4
del	140	251	155	263	595	842	4
control	160	251	195	263	595	842	4
VEEV	200	251	227	263	595	842	4
IAB	231	251	249	263	595	842	4
(TC	254	251	272	263	595	842	4
83)	277	251	294	263	595	842	4
a	300	251	306	263	595	842	4
52ºC	311	251	336	263	595	842	4
se	341	251	352	263	595	842	4
visualizaron	357	251	417	263	595	842	4
bandas,	422	251	462	263	595	842	4
tanto	466	251	493	263	595	842	4
en	498	251	510	263	595	842	4
la	515	251	524	263	595	842	4
amplificación	85	263	150	276	595	842	4
del	155	263	170	276	595	842	4
control	174	263	209	276	595	842	4
puro	213	263	236	276	595	842	4
como	240	263	267	276	595	842	4
de	271	263	283	276	595	842	4
la	287	263	296	276	595	842	4
dilución	301	263	339	276	595	842	4
½,	343	263	357	276	595	842	4
pero	361	263	383	276	595	842	4
fueron	388	263	420	276	595	842	4
más	424	263	445	276	595	842	4
tenues	449	263	483	276	595	842	4
que	487	263	506	276	595	842	4
las	510	263	524	276	595	842	4
obtenidas	85	276	134	288	595	842	4
con	138	276	156	288	595	842	4
el	160	276	169	288	595	842	4
control	173	276	207	288	595	842	4
anterior.	212	276	255	288	595	842	4
Sin	259	276	275	288	595	842	4
embargo,	279	276	328	288	595	842	4
a	332	276	338	288	595	842	4
54ºC	342	276	367	288	595	842	4
no	371	276	384	288	595	842	4
se	388	276	399	288	595	842	4
visualizaron	403	276	463	288	595	842	4
bandas.	467	276	507	288	595	842	4
En	511	276	524	288	595	842	4
la	85	288	94	300	595	842	4
Figura	100	288	131	300	595	842	4
2	137	288	144	300	595	842	4
se	150	288	161	300	595	842	4
observa	167	288	207	300	595	842	4
la	213	288	222	300	595	842	4
corrida	228	288	263	300	595	842	4
electroforética	269	288	340	300	595	842	4
de	346	288	358	300	595	842	4
los	364	288	379	300	595	842	4
productos	385	288	434	300	595	842	4
de	440	288	453	300	595	842	4
amplificación	459	288	524	300	595	842	4
obtenidos	85	300	134	312	595	842	4
en	138	300	150	312	595	842	4
las	153	300	167	312	595	842	4
diferentes	171	300	221	312	595	842	4
temperaturas	224	300	292	312	595	842	4
testadas	296	300	338	312	595	842	4
con	342	300	359	312	595	842	4
los	363	300	377	312	595	842	4
dos	380	300	398	312	595	842	4
controles	401	300	447	312	595	842	4
utilizados.	450	300	501	312	595	842	4
Al	96	312	106	324	595	842	4
comparar	111	312	158	324	595	842	4
los	163	312	177	324	595	842	4
resultados	182	312	234	324	595	842	4
obtenidos	238	312	287	324	595	842	4
con	292	312	309	324	595	842	4
ambos	314	312	347	324	595	842	4
controles	351	312	397	324	595	842	4
se	402	312	413	324	595	842	4
evidenció	418	312	465	324	595	842	4
que	469	312	488	324	595	842	4
en	493	312	505	324	595	842	4
los	509	312	524	324	595	842	4
casos	85	324	113	336	595	842	4
donde	117	324	148	336	595	842	4
se	152	324	164	336	595	842	4
obtenía	168	324	205	336	595	842	4
una	210	324	228	336	595	842	4
banda	233	324	264	336	595	842	4
de	268	324	280	336	595	842	4
amplificación	284	324	349	336	595	842	4
más	354	324	375	336	595	842	4
tenue	379	324	408	336	595	842	4
a	412	324	418	336	595	842	4
52ºC	422	324	447	336	595	842	4
no	452	324	464	336	595	842	4
se	469	324	480	336	595	842	4
observó	484	324	524	336	595	842	4
amplificación	85	336	150	349	595	842	4
a	154	336	160	349	595	842	4
54ºC.	163	336	192	349	595	842	4
Con	196	336	215	349	595	842	4
base	219	336	242	349	595	842	4
en	246	336	258	349	595	842	4
estos	261	336	288	349	595	842	4
resultados	291	336	343	349	595	842	4
la	347	336	356	349	595	842	4
temperatura	359	336	422	349	595	842	4
seleccionada	425	336	489	349	595	842	4
fue	493	336	508	349	595	842	4
de	512	336	524	349	595	842	4
52ºC.	85	349	114	361	595	842	4
Con	96	361	116	373	595	842	4
respecto	121	361	164	373	595	842	4
a	169	361	175	373	595	842	4
la	179	361	188	373	595	842	4
concentración	193	361	263	373	595	842	4
de	268	361	280	373	595	842	4
MgCl	285	361	309	373	595	842	4
2	310	366	314	373	595	842	4
para	319	361	341	373	595	842	4
la	346	361	355	373	595	842	4
reacción	360	361	402	373	595	842	4
de	407	361	419	373	595	842	4
PCR	424	361	444	373	595	842	4
anidada,	449	361	492	373	595	842	4
como	497	361	524	373	595	842	4
puede	85	373	116	385	595	842	4
apreciarse	121	373	173	385	595	842	4
en	177	373	190	385	595	842	4
la	195	373	204	385	595	842	4
Figura	208	373	240	385	595	842	4
3,	244	373	255	385	595	842	4
al	259	373	268	385	595	842	4
no	273	373	286	385	595	842	4
observarse	290	373	345	385	595	842	4
diferencias	350	373	404	385	595	842	4
en	409	373	422	385	595	842	4
la	426	373	435	385	595	842	4
definición	440	373	488	385	595	842	4
de	493	373	505	385	595	842	4
las	510	373	524	385	595	842	4
bandas	85	385	121	397	595	842	4
a	125	385	131	397	595	842	4
dos	135	385	153	397	595	842	4
diferentes	157	385	207	397	595	842	4
concentraciones,	211	385	296	397	595	842	4
se	300	385	311	397	595	842	4
optó	315	385	337	397	595	842	4
por	341	385	358	397	595	842	4
utilizar	362	385	396	397	595	842	4
la	400	385	409	397	595	842	4
concentración	413	385	482	397	595	842	4
final	486	385	508	397	595	842	4
de	512	385	524	397	595	842	4
2,0	85	397	101	409	595	842	4
mM.	105	397	127	409	595	842	4
Figura	96	593	129	604	595	842	4
2.	132	593	142	604	595	842	4
Electroforesis	146	593	206	604	595	842	4
en	210	593	221	604	595	842	4
gel	224	593	238	604	595	842	4
de	242	593	253	604	595	842	4
poliacrilamida	256	593	319	604	595	842	4
al	322	593	330	604	595	842	4
7%	334	593	349	604	595	842	4
de	353	593	364	604	595	842	4
los	368	593	380	604	595	842	4
productos	384	593	429	604	595	842	4
amplificados	432	593	488	604	595	842	4
para	492	593	512	604	595	842	4
el	516	593	524	604	595	842	4
fragmento	85	604	132	615	595	842	4
del	136	604	149	615	595	842	4
gen	153	604	170	615	595	842	4
nsP4	174	604	195	615	595	842	4
de	199	604	210	615	595	842	4
alfavirus	214	604	252	615	595	842	4
probado	256	604	293	615	595	842	4
a	297	604	302	615	595	842	4
diferentes	306	604	352	615	595	842	4
temperaturas.	355	604	420	615	595	842	4
Carriles	423	604	458	615	595	842	4
1	462	604	467	615	595	842	4
al	471	604	479	615	595	842	4
5	483	604	489	615	595	842	4
control	493	604	524	615	595	842	4
VEEV	85	615	109	626	595	842	4
IAB	115	615	131	626	595	842	4
(TC	137	615	153	626	595	842	4
83).	159	615	178	626	595	842	4
(1)	184	615	198	626	595	842	4
Control	204	615	237	626	595	842	4
puro,	242	615	266	626	595	842	4
Ta=	272	615	291	626	595	842	4
52°C.	297	615	323	626	595	842	4
(2)	328	615	342	626	595	842	4
Dilución	348	615	384	626	595	842	4
1:2,	390	615	409	626	595	842	4
Ta=	415	615	433	626	595	842	4
52°C.	439	615	465	626	595	842	4
(3)	471	615	485	626	595	842	4
Control	491	615	524	626	595	842	4
negativo,	85	626	127	637	595	842	4
Ta=	133	626	151	637	595	842	4
52ºC.	157	626	183	637	595	842	4
(4)	189	626	203	637	595	842	4
Control	208	626	241	637	595	842	4
positivo	246	626	281	637	595	842	4
puro,	287	626	311	637	595	842	4
Ta=	317	626	335	637	595	842	4
54°C	341	626	363	637	595	842	4
(5)	369	626	383	637	595	842	4
Dilución	389	626	424	637	595	842	4
1:2,	430	626	449	637	595	842	4
Ta=	455	626	473	637	595	842	4
54°C.	479	626	505	637	595	842	4
(6)	510	626	524	637	595	842	4
marcador	85	637	128	648	595	842	4
de	132	637	143	648	595	842	4
100	146	637	163	648	595	842	4
pb.	167	637	181	648	595	842	4
Carriles	185	637	219	648	595	842	4
7	223	637	229	648	595	842	4
al	232	637	240	648	595	842	4
10	244	637	255	648	595	842	4
control	259	637	290	648	595	842	4
VEEV	294	637	317	648	595	842	4
VI	321	637	331	648	595	842	4
(AG80-663).	334	637	392	648	595	842	4
(7)	395	637	409	648	595	842	4
Control	412	637	445	648	595	842	4
puro,	449	637	473	648	595	842	4
Ta=	477	637	495	648	595	842	4
52ºC.	498	637	524	648	595	842	4
(8)	85	648	99	659	595	842	4
Control	103	648	136	659	595	842	4
diluido,	140	648	173	659	595	842	4
Ta=52ºC.	178	648	222	659	595	842	4
(9)	226	648	240	659	595	842	4
Control	244	648	277	659	595	842	4
puro,	281	648	305	659	595	842	4
Ta=54ºC.	309	648	354	659	595	842	4
(10)	358	648	378	659	595	842	4
Control	382	648	415	659	595	842	4
diluido,	419	648	452	659	595	842	4
Ta=54ºC.	456	648	501	659	595	842	4
(11)	505	648	524	659	595	842	4
Control	85	659	118	670	595	842	4
negativo	121	659	160	670	595	842	4
Ta=	163	659	181	670	595	842	4
54ºC.	185	659	210	670	595	842	4
Mem.	85	796	107	806	595	842	4
Inst.	110	796	128	806	595	842	4
Investig.	131	796	167	806	595	842	4
Cienc.	169	796	194	806	595	842	4
Salud.	197	796	222	806	595	842	4
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	4
33	507	796	517	806	595	842	4
Bernal	85	28	111	38	595	842	5
et	114	28	121	38	595	842	5
al.	124	28	134	38	595	842	5
Estandarización	301	28	364	38	595	842	5
de	367	28	376	38	595	842	5
una	379	28	394	38	595	842	5
técnica	397	28	425	38	595	842	5
de	428	28	438	38	595	842	5
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	5
anidada	474	28	505	38	595	842	5
Finalmente,	96	57	156	69	595	842	5
para	160	57	183	69	595	842	5
la	187	57	196	69	595	842	5
electroforesis	201	57	268	69	595	842	5
en	273	57	285	69	595	842	5
gel	290	57	305	69	595	842	5
de	310	57	322	69	595	842	5
poliacrilamida	327	57	396	69	595	842	5
al	401	57	409	69	595	842	5
7%,	414	57	435	69	595	842	5
efectuada	440	57	489	69	595	842	5
según	494	57	524	69	595	842	5
Sanguinetti	85	69	142	81	595	842	5
et	150	69	160	81	595	842	5
al.	163	69	176	81	595	842	5
(13),	180	69	205	81	595	842	5
el	209	69	217	81	595	842	5
tiempo	221	69	256	81	595	842	5
de	259	69	272	81	595	842	5
corrida	275	69	310	81	595	842	5
fue	314	69	330	81	595	842	5
optimizado	333	69	388	81	595	842	5
a	392	69	398	81	595	842	5
120	402	69	421	81	595	842	5
minutos,	425	69	469	81	595	842	5
ya	472	69	484	81	595	842	5
que	488	69	506	81	595	842	5
así	510	69	524	81	595	842	5
se	85	81	96	93	595	842	5
mejoró	100	81	135	93	595	842	5
la	139	81	148	93	595	842	5
visualización	151	81	214	93	595	842	5
de	218	81	230	93	595	842	5
las	233	81	248	93	595	842	5
bandas.	251	81	291	93	595	842	5
Figura	85	295	117	306	595	842	5
3.	122	295	131	306	595	842	5
Electroforesis	136	295	197	306	595	842	5
en	201	295	212	306	595	842	5
gel	216	295	230	306	595	842	5
de	234	295	245	306	595	842	5
poliacrilamida	250	295	312	306	595	842	5
al	317	295	325	306	595	842	5
7%	329	295	344	306	595	842	5
de	349	295	360	306	595	842	5
los	364	295	377	306	595	842	5
productos	381	295	426	306	595	842	5
amplificados	431	295	487	306	595	842	5
para	491	295	511	306	595	842	5
el	516	295	524	306	595	842	5
fragmento	85	306	132	317	595	842	5
del	135	306	149	317	595	842	5
gen	152	306	169	317	595	842	5
nsP4	172	306	194	317	595	842	5
de	197	306	208	317	595	842	5
alfavirus	211	306	250	317	595	842	5
utilizando	253	306	297	317	595	842	5
el	300	306	308	317	595	842	5
control	311	306	342	317	595	842	5
VEEV	345	306	369	317	595	842	5
VI	373	306	383	317	595	842	5
(AG80-663).	386	306	444	317	595	842	5
(1)	447	306	461	317	595	842	5
Control	464	306	497	317	595	842	5
puro,	500	306	524	317	595	842	5
[MgCl	85	317	111	328	595	842	5
2	111	321	115	328	595	842	5
]=	115	317	127	328	595	842	5
2,5	130	317	145	328	595	842	5
mM.	148	317	167	328	595	842	5
(2)	171	317	184	328	595	842	5
Dilución	188	317	224	328	595	842	5
1:2,	227	317	245	328	595	842	5
[MgCl	249	317	275	328	595	842	5
2	275	321	279	328	595	842	5
]=	279	317	290	328	595	842	5
2,5	293	317	308	328	595	842	5
mM	311	317	328	328	595	842	5
(3)	331	317	345	328	595	842	5
Control	348	317	381	328	595	842	5
negativo.	384	317	426	328	595	842	5
(5)	429	317	443	328	595	842	5
marcador	446	317	490	328	595	842	5
de	492	317	504	328	595	842	5
100	507	317	524	328	595	842	5
pb.	85	327	100	338	595	842	5
(4)	105	327	119	338	595	842	5
control	124	327	156	338	595	842	5
puro	161	327	182	338	595	842	5
[MgCl	187	327	213	338	595	842	5
2	213	332	217	339	595	842	5
]=	217	327	229	338	595	842	5
2,0	234	327	249	338	595	842	5
mM.	254	327	274	338	595	842	5
(5)	279	327	293	338	595	842	5
dilución	298	327	333	338	595	842	5
1:2	338	327	354	338	595	842	5
del	359	327	373	338	595	842	5
control,	378	327	413	338	595	842	5
[MgCl	418	327	444	338	595	842	5
2	444	332	448	339	595	842	5
]=	448	327	460	338	595	842	5
2,0	465	327	480	338	595	842	5
mM.	485	327	505	338	595	842	5
(6)	510	327	524	338	595	842	5
Control	85	338	118	350	595	842	5
negativo.	121	338	163	350	595	842	5
Límite	85	374	120	386	595	842	5
de	123	374	137	386	595	842	5
detección	140	374	195	386	595	842	5
El	85	386	94	398	595	842	5
límite	99	386	127	398	595	842	5
de	132	386	145	398	595	842	5
detección	150	386	197	398	595	842	5
obtenido	202	386	246	398	595	842	5
fue	251	386	267	398	595	842	5
de	272	386	284	398	595	842	5
0,46	289	386	312	398	595	842	5
UFP/mL	317	386	356	398	595	842	5
o	361	386	367	398	595	842	5
5,36.10	372	386	411	398	595	842	5
-3	412	385	419	393	595	842	5
UFP/reacción.	424	386	493	398	595	842	5
En	498	386	511	398	595	842	5
la	516	386	524	398	595	842	5
Figura	85	398	116	410	595	842	5
4	121	398	128	410	595	842	5
se	132	398	144	410	595	842	5
puede	149	398	179	410	595	842	5
observar	184	398	228	410	595	842	5
que	233	398	251	410	595	842	5
el	256	398	265	410	595	842	5
control	270	398	304	410	595	842	5
de	309	398	321	410	595	842	5
alfavirus	326	398	369	410	595	842	5
de	374	398	386	410	595	842	5
la	391	398	400	410	595	842	5
cepa	404	398	428	410	595	842	5
VEEV	432	398	459	410	595	842	5
(AG86-663)	464	398	524	410	595	842	5
con	85	410	103	423	595	842	5
título	106	410	132	423	595	842	5
de	136	410	148	423	595	842	5
4,6.10	151	410	184	423	595	842	5
8	184	410	188	417	595	842	5
UFP/mL	192	410	231	423	595	842	5
resultó	234	410	269	423	595	842	5
positivo	272	410	311	423	595	842	5
hasta	314	410	342	423	595	842	5
la	345	410	354	423	595	842	5
dilución	358	410	396	423	595	842	5
10	399	410	412	423	595	842	5
-9	412	410	419	417	595	842	5
.	419	410	423	423	595	842	5
Figura	85	606	117	617	595	842	5
4.	121	606	131	617	595	842	5
Límite	135	606	162	617	595	842	5
de	166	606	177	617	595	842	5
detección	181	606	224	617	595	842	5
de	228	606	239	617	595	842	5
la	243	606	251	617	595	842	5
RT-PCR	255	606	289	617	595	842	5
anidada	293	606	328	617	595	842	5
para	332	606	353	617	595	842	5
alfavirus	356	606	395	617	595	842	5
utilizando	399	606	443	617	595	842	5
los	447	606	459	617	595	842	5
cebadores	463	606	509	617	595	842	5
de	513	606	524	617	595	842	5
Sánchez	85	617	123	628	595	842	5
Seco	129	617	151	628	595	842	5
et	158	617	167	628	595	842	5
al.	173	617	184	628	595	842	5
(9).	191	617	208	628	595	842	5
Electroforesis	215	617	275	628	595	842	5
en	282	617	293	628	595	842	5
gel	300	617	313	628	595	842	5
de	319	617	331	628	595	842	5
poliacrilamida	337	617	400	628	595	842	5
al	406	617	414	628	595	842	5
7%	421	617	436	628	595	842	5
de	443	617	454	628	595	842	5
los	460	617	473	628	595	842	5
productos	479	617	524	628	595	842	5
amplificados	85	628	141	639	595	842	5
para	145	628	165	639	595	842	5
el	169	628	177	639	595	842	5
fragmento	181	628	228	639	595	842	5
del	231	628	245	639	595	842	5
gen	248	628	265	639	595	842	5
nsP4	269	628	290	639	595	842	5
de	294	628	305	639	595	842	5
alfavirus.	309	628	351	639	595	842	5
Carril	354	628	379	639	595	842	5
1:	383	628	392	639	595	842	5
marcador	396	628	439	639	595	842	5
de	443	628	454	639	595	842	5
100	458	628	475	639	595	842	5
pb	479	628	490	639	595	842	5
(Mpb).	494	628	524	639	595	842	5
Carriles	85	639	119	650	595	842	5
2	123	639	129	650	595	842	5
al	132	639	140	650	595	842	5
9:	143	639	153	650	595	842	5
diluciones	156	639	201	650	595	842	5
del	205	639	218	650	595	842	5
control	221	639	253	650	595	842	5
positivo	256	639	291	650	595	842	5
de	295	639	306	650	595	842	5
VEEV	309	639	332	650	595	842	5
663	336	639	353	650	595	842	5
desde	356	639	383	650	595	842	5
10	387	639	398	650	595	842	5
-11	399	638	409	645	595	842	5
al	412	639	420	650	595	842	5
10	424	639	435	650	595	842	5
-4	435	638	442	645	595	842	5
(ensayo	444	639	480	650	595	842	5
realizado	484	639	524	650	595	842	5
por	85	650	100	661	595	842	5
triplicado).	103	650	152	661	595	842	5
DISCUSIÓN	85	673	151	685	595	842	5
Los	96	691	113	704	595	842	5
alfavirus	117	691	160	704	595	842	5
son	164	691	182	704	595	842	5
considerados	185	691	251	704	595	842	5
un	255	691	267	704	595	842	5
problema	271	691	319	704	595	842	5
de	322	691	335	704	595	842	5
importante	339	691	394	704	595	842	5
impacto	398	691	438	704	595	842	5
en	442	691	454	704	595	842	5
salud	458	691	485	704	595	842	5
pública	488	691	524	704	595	842	5
pudiendo	85	703	131	716	595	842	5
causar	139	703	172	716	595	842	5
desde	179	703	209	716	595	842	5
casos	216	703	244	716	595	842	5
febriles	251	703	288	716	595	842	5
hasta	296	703	323	716	595	842	5
casos	331	703	358	716	595	842	5
fatales	366	703	399	716	595	842	5
(2,	407	703	421	716	595	842	5
14,	429	703	445	716	595	842	5
15).	453	703	474	716	595	842	5
También	481	703	524	716	595	842	5
constituyen	85	716	143	728	595	842	5
un	147	716	160	728	595	842	5
desafío	164	716	199	728	595	842	5
en	203	716	215	728	595	842	5
sanidad	219	716	258	728	595	842	5
animal	262	716	295	728	595	842	5
(16).	299	716	325	728	595	842	5
Esta	328	716	350	728	595	842	5
técnica	354	716	389	728	595	842	5
fue	393	716	409	728	595	842	5
seleccionada	413	716	477	728	595	842	5
debido	480	716	514	728	595	842	5
a	518	716	524	728	595	842	5
que	85	728	104	740	595	842	5
ha	108	728	120	740	595	842	5
demostrado	124	728	184	740	595	842	5
ser	188	728	203	740	595	842	5
útil	207	728	223	740	595	842	5
para	227	728	250	740	595	842	5
detectar	258	728	299	740	595	842	5
alfavirus	304	728	346	740	595	842	5
de	350	728	363	740	595	842	5
varias	366	728	397	740	595	842	5
especies	401	728	443	740	595	842	5
(9,	447	728	462	740	595	842	5
10,	466	728	483	740	595	842	5
11).	486	728	508	740	595	842	5
En	511	728	524	740	595	842	5
este	85	740	106	752	595	842	5
trabajo	114	740	150	752	595	842	5
fueron	157	740	189	752	595	842	5
incluidas	197	740	240	752	595	842	5
algunas	248	740	287	752	595	842	5
modificaciones	294	740	368	752	595	842	5
a	375	740	381	752	595	842	5
la	389	740	398	752	595	842	5
reacción	405	740	447	752	595	842	5
descripta	454	740	500	752	595	842	5
por	507	740	524	752	595	842	5
Sánchez	85	752	127	764	595	842	5
Seco	136	752	161	764	595	842	5
et	170	752	180	764	595	842	5
al.	189	752	202	764	595	842	5
(9),	211	752	230	764	595	842	5
como	239	752	267	764	595	842	5
la	276	752	285	764	595	842	5
utilización	294	752	344	764	595	842	5
de	353	752	366	764	595	842	5
cebadores	375	752	426	764	595	842	5
aleatorios	435	752	484	764	595	842	5
en	494	752	506	764	595	842	5
la	515	752	524	764	595	842	5
retrotranscripción,	85	764	178	776	595	842	5
lo	183	764	192	776	595	842	5
cual	197	764	218	776	595	842	5
confiere	223	764	263	776	595	842	5
ciertas	268	764	302	776	595	842	5
ventajas	307	764	350	776	595	842	5
como	355	764	382	776	595	842	5
el	387	764	396	776	595	842	5
aprovechamiento	401	764	488	776	595	842	5
de	493	764	506	776	595	842	5
un	511	764	524	776	595	842	5
Mem.	85	796	107	806	595	842	5
Inst.	110	796	128	806	595	842	5
Investig.	131	796	167	806	595	842	5
Cienc.	169	796	194	806	595	842	5
Salud.	197	796	222	806	595	842	5
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	5
34	507	796	517	806	595	842	5
Bernal	85	28	111	38	595	842	6
et	114	28	121	38	595	842	6
al.	124	28	134	38	595	842	6
Estandarización	301	28	364	38	595	842	6
de	367	28	376	38	595	842	6
una	379	28	394	38	595	842	6
técnica	397	28	425	38	595	842	6
de	428	28	438	38	595	842	6
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	6
anidada	474	28	505	38	595	842	6
mismo	85	57	119	69	595	842	6
ADNc	123	57	150	69	595	842	6
para	155	57	178	69	595	842	6
otros	182	57	208	69	595	842	6
fines	213	57	236	69	595	842	6
como	241	57	268	69	595	842	6
el	273	57	281	69	595	842	6
estudio	286	57	323	69	595	842	6
de	327	57	339	69	595	842	6
otros	344	57	370	69	595	842	6
arbovirus,	374	57	425	69	595	842	6
ahorrando	430	57	481	69	595	842	6
de	486	57	498	69	595	842	6
esta	503	57	524	69	595	842	6
forma	85	69	115	81	595	842	6
tiempo	126	69	161	81	595	842	6
y	173	69	179	81	595	842	6
reactivos.	191	69	239	81	595	842	6
Otra	251	69	273	81	595	842	6
ventaja	285	69	322	81	595	842	6
es	334	69	345	81	595	842	6
que	357	69	375	81	595	842	6
se	387	69	398	81	595	842	6
evitan	410	69	441	81	595	842	6
los	452	69	467	81	595	842	6
múltiples	478	69	524	81	595	842	6
descongelamientos	85	81	181	93	595	842	6
que	185	81	203	93	595	842	6
pueden	207	81	243	93	595	842	6
conducir	247	81	290	93	595	842	6
a	293	81	299	93	595	842	6
la	302	81	311	93	595	842	6
degradación	315	81	376	93	595	842	6
del	380	81	394	93	595	842	6
ARN	398	81	419	93	595	842	6
viral.	423	81	448	93	595	842	6
Al	96	93	106	105	595	842	6
utilizar	111	93	145	105	595	842	6
la	150	93	159	105	595	842	6
temperatura	163	93	226	105	595	842	6
de	231	93	243	105	595	842	6
alineamiento	248	93	313	105	595	842	6
de	318	93	330	105	595	842	6
52ºC	335	93	360	105	595	842	6
con	365	93	382	105	595	842	6
el	387	93	396	105	595	842	6
control	401	93	436	105	595	842	6
VEEV	441	93	467	105	595	842	6
VI	472	93	483	105	595	842	6
(AG80-	488	93	524	105	595	842	6
663),	85	105	112	118	595	842	6
se	123	105	134	118	595	842	6
observó	145	105	185	118	595	842	6
amplificación	196	105	261	118	595	842	6
con	272	105	289	118	595	842	6
bandas	300	105	336	118	595	842	6
de	347	105	359	118	595	842	6
intensidad	370	105	422	118	595	842	6
fuerte	433	105	463	118	595	842	6
a	474	105	480	118	595	842	6
ambas	491	105	524	118	595	842	6
temperaturas,	85	117	157	130	595	842	6
sin	162	117	176	130	595	842	6
embargo,	180	117	229	130	595	842	6
al	234	117	242	130	595	842	6
utilizar	247	117	281	130	595	842	6
el	286	117	295	130	595	842	6
control	299	117	334	130	595	842	6
VEEV	339	117	366	130	595	842	6
IAB	370	117	388	130	595	842	6
(TC	393	117	411	130	595	842	6
83)	415	117	433	130	595	842	6
se	438	117	449	130	595	842	6
evidenció	454	117	501	130	595	842	6
una	506	117	524	130	595	842	6
amplificación	85	130	150	142	595	842	6
con	154	130	172	142	595	842	6
bandas	180	130	216	142	595	842	6
tenues	224	130	258	142	595	842	6
a	262	130	268	142	595	842	6
52ºC	272	130	297	142	595	842	6
y	301	130	307	142	595	842	6
no	311	130	324	142	595	842	6
se	327	130	338	142	595	842	6
observó	343	130	382	142	595	842	6
amplificación	390	130	456	142	595	842	6
a	460	130	466	142	595	842	6
54ºC.	470	130	499	142	595	842	6
Esto	503	130	524	142	595	842	6
podría	85	142	117	154	595	842	6
sugerir	122	142	157	154	595	842	6
que	162	142	181	154	595	842	6
a	186	142	192	154	595	842	6
52ºC	197	142	222	154	595	842	6
la	227	142	236	154	595	842	6
sensibilidad	241	142	300	154	595	842	6
es	305	142	316	154	595	842	6
favorecida	321	142	373	154	595	842	6
pero,	378	142	405	154	595	842	6
para	410	142	432	154	595	842	6
confirmarlo	437	142	495	154	595	842	6
debe	500	142	524	154	595	842	6
hacerse	85	154	124	166	595	842	6
el	133	154	142	166	595	842	6
ensayo	150	154	186	166	595	842	6
con	195	154	212	166	595	842	6
controles	221	154	267	166	595	842	6
de	276	154	288	166	595	842	6
carga	297	154	324	166	595	842	6
viral	333	154	355	166	595	842	6
conocida.	364	154	411	166	595	842	6
La	420	154	431	166	595	842	6
temperatura	440	154	503	166	595	842	6
de	512	154	524	166	595	842	6
alineamiento	85	166	150	178	595	842	6
elegida	153	166	189	178	595	842	6
finalmente	193	166	246	178	595	842	6
fue	249	166	265	178	595	842	6
de	269	166	281	178	595	842	6
52ºC,	284	166	313	178	595	842	6
tal	317	166	329	178	595	842	6
como	333	166	360	178	595	842	6
lo	364	166	373	178	595	842	6
describieron	376	166	437	178	595	842	6
Sánchez	441	166	483	178	595	842	6
Seco	487	166	511	178	595	842	6
et	515	166	524	178	595	842	6
al.	85	178	98	191	595	842	6
(9).	101	178	120	191	595	842	6
Con	96	190	116	203	595	842	6
respecto	120	190	163	203	595	842	6
a	168	190	174	203	595	842	6
la	178	190	187	203	595	842	6
concentración	192	190	261	203	595	842	6
final	266	190	287	203	595	842	6
de	292	190	304	203	595	842	6
MgCl	308	190	333	203	595	842	6
2	333	195	337	203	595	842	6
para	340	190	363	203	595	842	6
la	368	190	376	203	595	842	6
PCR	381	190	401	203	595	842	6
anidada,	405	190	449	203	595	842	6
la	453	190	462	203	595	842	6
reacción	467	190	508	203	595	842	6
se	513	190	524	203	595	842	6
probó	85	203	114	215	595	842	6
a	122	203	128	215	595	842	6
2,0	136	203	153	215	595	842	6
mM	161	203	179	215	595	842	6
y	187	203	193	215	595	842	6
a	201	203	207	215	595	842	6
2,5	215	203	231	215	595	842	6
mM.	239	203	261	215	595	842	6
Las	269	203	286	215	595	842	6
bandas	294	203	330	215	595	842	6
obtenidas	338	203	387	215	595	842	6
presentaron	395	203	455	215	595	842	6
las	463	203	477	215	595	842	6
mismas	485	203	524	215	595	842	6
características	85	215	157	227	595	842	6
a	162	215	168	227	595	842	6
ambas	173	215	206	227	595	842	6
concentraciones	211	215	292	227	595	842	6
por	297	215	314	227	595	842	6
lo	319	215	328	227	595	842	6
que	333	215	351	227	595	842	6
se	356	215	368	227	595	842	6
optó	373	215	395	227	595	842	6
por	400	215	416	227	595	842	6
utilizar	421	215	456	227	595	842	6
la	460	215	469	227	595	842	6
menor	474	215	507	227	595	842	6
de	512	215	524	227	595	842	6
ellas	85	227	108	239	595	842	6
a	111	227	117	239	595	842	6
diferencia	121	227	170	239	595	842	6
del	173	227	188	239	595	842	6
trabajo	192	227	228	239	595	842	6
de	231	227	243	239	595	842	6
Sánchez	247	227	289	239	595	842	6
Seco	292	227	316	239	595	842	6
et	320	227	330	239	595	842	6
al.	333	227	346	239	595	842	6
(9),	350	227	369	239	595	842	6
donde	372	227	403	239	595	842	6
se	406	227	418	239	595	842	6
utilizó	421	227	451	239	595	842	6
2,5	454	227	471	239	595	842	6
mM.	474	227	496	239	595	842	6
El	96	239	106	251	595	842	6
límite	113	239	141	251	595	842	6
de	148	239	160	251	595	842	6
detección	167	239	214	251	595	842	6
obtenido	222	239	265	251	595	842	6
para	272	239	295	251	595	842	6
la	302	239	311	251	595	842	6
RT-PCR	318	239	356	251	595	842	6
anidada	363	239	403	251	595	842	6
fue	410	239	425	251	595	842	6
de	433	239	445	251	595	842	6
0,47	452	239	474	251	595	842	6
UFP/mL,	481	239	524	251	595	842	6
(5,36.10	85	251	129	263	595	842	6
-3	129	250	136	258	595	842	6
UFP/reacción)	143	251	213	263	595	842	6
que	220	251	238	263	595	842	6
resulta	245	251	280	263	595	842	6
menor	287	251	319	263	595	842	6
al	326	251	335	263	595	842	6
obtenido	342	251	385	263	595	842	6
por	392	251	409	263	595	842	6
otros	416	251	441	263	595	842	6
autores,	448	251	490	263	595	842	6
como	497	251	524	263	595	842	6
Sánchez	85	263	127	276	595	842	6
Seco	132	263	157	276	595	842	6
et	162	263	172	276	595	842	6
al.	177	263	190	276	595	842	6
(9)	195	263	211	276	595	842	6
con	216	263	233	276	595	842	6
un	239	263	251	276	595	842	6
valor	257	263	282	276	595	842	6
de	287	263	300	276	595	842	6
25	305	263	318	276	595	842	6
UFP/tubo	323	263	369	276	595	842	6
para	375	263	397	276	595	842	6
una	402	263	421	276	595	842	6
RT-PCR	427	263	465	276	595	842	6
anidada,	470	263	513	276	595	842	6
y	518	263	524	276	595	842	6
Pfeffer	85	276	118	288	595	842	6
et	123	276	133	288	595	842	6
al.	138	276	150	288	595	842	6
con	155	276	173	288	595	842	6
una	178	276	197	288	595	842	6
sensibilidad	202	276	260	288	595	842	6
1,2	265	276	281	288	595	842	6
UFP/mL	286	276	325	288	595	842	6
para	330	276	353	288	595	842	6
una	358	276	377	288	595	842	6
RT-PCR	382	276	420	288	595	842	6
semi	425	276	448	288	595	842	6
anidada	453	276	493	288	595	842	6
(10);	498	276	524	288	595	842	6
ambos	85	288	118	300	595	842	6
trabajos	124	288	165	300	595	842	6
también	170	288	211	300	595	842	6
para	217	288	240	300	595	842	6
detección	245	288	292	300	595	842	6
genérica	298	288	340	300	595	842	6
de	346	288	358	300	595	842	6
alfavirus.	364	288	410	300	595	842	6
Este	416	288	437	300	595	842	6
resultado	442	288	489	300	595	842	6
indica	494	288	524	300	595	842	6
que	85	300	104	312	595	842	6
la	108	300	117	312	595	842	6
técnica	121	300	156	312	595	842	6
podría	160	300	192	312	595	842	6
ser	196	300	211	312	595	842	6
capaz	216	300	244	312	595	842	6
de	248	300	261	312	595	842	6
detectar	265	300	306	312	595	842	6
cargas	310	300	343	312	595	842	6
virales	347	300	380	312	595	842	6
muy	384	300	407	312	595	842	6
bajas	411	300	437	312	595	842	6
en	442	300	454	312	595	842	6
una	458	300	477	312	595	842	6
variedad	481	300	524	312	595	842	6
de	85	312	97	324	595	842	6
muestras	101	312	148	324	595	842	6
humanas	152	312	198	324	595	842	6
y	202	312	208	324	595	842	6
animales	212	312	257	324	595	842	6
y	261	312	267	324	595	842	6
además,	271	312	314	324	595	842	6
en	318	312	330	324	595	842	6
el	335	312	343	324	595	842	6
estudio	348	312	384	324	595	842	6
de	388	312	400	324	595	842	6
sus	404	312	422	324	595	842	6
vectores	426	312	469	324	595	842	6
mosquitos	473	312	524	324	595	842	6
(2,	85	324	100	336	595	842	6
10,	103	324	120	336	595	842	6
12).	123	324	144	336	595	842	6
REFERENCIAS	85	349	164	361	595	842	6
BIBLIOGRÁFICAS	167	349	266	361	595	842	6
1.	85	367	95	379	595	842	6
King	99	367	122	379	595	842	6
A,	133	367	144	379	595	842	6
Adams	156	367	190	379	595	842	6
M,	202	367	214	379	595	842	6
Carsten	226	367	265	379	595	842	6
E,	276	367	287	379	595	842	6
Lefkowitz	85	379	132	391	595	842	6
E.	148	379	158	391	595	842	6
Virus	189	379	214	391	595	842	6
Taxonomy:	230	379	287	391	595	842	6
Classification	85	391	151	403	595	842	6
and	163	391	182	403	595	842	6
Nomenclature	194	391	264	403	595	842	6
of	277	391	286	403	595	842	6
Viruses.	85	403	125	415	595	842	6
Ninth	144	403	171	415	595	842	6
Report	190	403	223	415	595	842	6
of	242	403	251	415	595	842	6
the	270	403	286	415	595	842	6
International	85	415	150	427	595	842	6
Committee	156	415	211	427	595	842	6
on	216	415	229	427	595	842	6
Taxonomy	234	415	286	427	595	842	6
of	85	427	95	439	595	842	6
Viruses.	98	427	139	439	595	842	6
Elsevier	142	427	181	439	595	842	6
Inc;	185	427	205	439	595	842	6
2012.	208	427	238	439	595	842	6
2.	85	440	95	452	595	842	6
Mahalingam	99	440	160	452	595	842	6
S,	183	440	193	452	595	842	6
Herrero	216	440	254	452	595	842	6
L.	277	440	287	452	595	842	6
Alphavirus:	85	452	142	464	595	842	6
Current	148	452	186	464	595	842	6
Biology.	192	452	232	464	595	842	6
Ilustrada.	238	452	287	464	595	842	6
Florida:	85	464	124	476	595	842	6
Caister	127	464	162	476	595	842	6
Academic	166	464	214	476	595	842	6
Press;	217	464	248	476	595	842	6
2016.	252	464	281	476	595	842	6
3.	85	476	95	488	595	842	6
Kuno	99	476	125	488	595	842	6
G,	140	476	151	488	595	842	6
Chang	166	476	198	488	595	842	6
G.	213	476	224	488	595	842	6
Biological	239	476	286	488	595	842	6
transmission	85	488	149	500	595	842	6
of	182	488	191	500	595	842	6
arboviruses:	224	488	287	500	595	842	6
Reexamination	85	500	160	512	595	842	6
of	164	500	173	512	595	842	6
and	178	500	196	512	595	842	6
new	200	500	221	512	595	842	6
insights	225	500	263	512	595	842	6
into	267	500	287	512	595	842	6
components,	85	512	150	525	595	842	6
mechanisms,	156	512	222	525	595	842	6
and	228	512	247	525	595	842	6
unique	253	512	286	525	595	842	6
traits	85	525	111	537	595	842	6
as	121	525	132	537	595	842	6
well	142	525	161	537	595	842	6
as	171	525	182	537	595	842	6
their	191	525	215	537	595	842	6
evolutionary	224	525	286	537	595	842	6
trends.	85	537	121	549	595	842	6
Clinical	128	537	164	549	595	842	6
Microbiology	172	537	234	549	595	842	6
Reviews.	242	537	287	549	595	842	6
2005;	85	549	115	561	595	842	6
18:	119	549	136	561	595	842	6
608–37.	139	549	181	561	595	842	6
4.	85	561	95	573	595	842	6
Weaver	99	561	137	573	595	842	6
S,	143	561	154	573	595	842	6
Reisen	160	561	193	573	595	842	6
W.	199	561	212	573	595	842	6
Present	224	561	262	573	595	842	6
and	268	561	287	573	595	842	6
future	85	573	115	585	595	842	6
of	125	573	134	585	595	842	6
arboviral	143	573	188	585	595	842	6
threats.	197	573	236	585	595	842	6
Antiviral	245	573	287	585	595	842	6
Res.	85	585	107	598	595	842	6
2010;	110	585	140	598	595	842	6
85(2):328–45.	144	585	219	598	595	842	6
5.	85	597	95	610	595	842	6
Mahan	99	597	132	610	595	842	6
D,	142	597	153	610	595	842	6
Howley	162	597	199	610	595	842	6
P,	208	597	218	610	595	842	6
Virology	227	597	268	610	595	842	6
F,	277	597	287	610	595	842	6
Griffin	85	610	116	622	595	842	6
DE,	123	610	141	622	595	842	6
Aura	148	610	172	622	595	842	6
A,	179	610	189	622	595	842	6
Morgan	196	610	234	622	595	842	6
F.	241	610	251	622	595	842	6
Fields	258	610	286	622	595	842	6
Virology	85	622	126	634	595	842	6
Alphaviruses	133	622	197	634	595	842	6
Fields	210	622	239	634	595	842	6
Virology	246	622	287	634	595	842	6
encephalitis.	85	634	148	646	595	842	6
Lippincott	162	634	211	646	595	842	6
Williams	224	634	266	646	595	842	6
&	279	634	286	646	595	842	6
Wilkins	85	646	121	658	595	842	6
2012.	124	646	153	658	595	842	6
6.	85	658	95	671	595	842	6
Epidemiol	99	658	148	671	595	842	6
S,	155	658	165	671	595	842	6
Bolet	172	658	197	671	595	842	6
E,	204	658	214	671	595	842	6
Internacional	220	658	286	671	595	842	6
RS.	85	670	103	683	595	842	6
Boletín;	106	670	145	683	595	842	6
2014.	149	670	178	683	595	842	6
7.	85	683	95	695	595	842	6
Belkin	99	683	130	695	595	842	6
J,	138	683	146	695	595	842	6
Schick	153	683	186	695	595	842	6
R,	193	683	204	695	595	842	6
Heinemann	211	683	268	695	595	842	6
S.	276	683	287	695	595	842	6
Mosquito	85	695	130	707	595	842	6
studies	139	695	175	707	595	842	6
(Diptera,	183	695	229	707	595	842	6
Culicidae)	237	695	286	707	595	842	6
XI.	85	707	100	719	595	842	6
Mosquitoes	112	707	168	719	595	842	6
originally	180	707	226	719	595	842	6
described	239	707	287	719	595	842	6
from	85	719	109	731	595	842	6
Argentina,	129	719	181	731	595	842	6
Bolivia,	201	719	238	731	595	842	6
Chile,	258	719	287	731	595	842	6
Paraguay,	85	731	136	743	595	842	6
Peru,	147	731	173	743	595	842	6
and	184	731	202	743	595	842	6
Uruguay.	213	731	259	743	595	842	6
Am	270	731	286	743	595	842	6
Entomol	85	743	126	756	595	842	6
Inst.	130	743	153	756	595	842	6
1968;	157	743	187	756	595	842	6
17(4):	190	743	223	756	595	842	6
9-29.	226	743	254	756	595	842	6
Mem.	85	796	107	806	595	842	6
Inst.	110	796	128	806	595	842	6
Investig.	131	796	167	806	595	842	6
Cienc.	169	796	194	806	595	842	6
Salud.	197	796	222	806	595	842	6
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	6
8.	323	367	333	379	595	842	6
Narosky	337	367	378	379	595	842	6
T,	388	367	398	379	595	842	6
Yzurieta	407	367	448	379	595	842	6
D.	458	367	469	379	595	842	6
Guía	479	367	502	379	595	842	6
de	512	367	524	379	595	842	6
identificación	323	379	389	391	595	842	6
de	398	379	410	391	595	842	6
aves	420	379	443	391	595	842	6
de	452	379	464	391	595	842	6
Paraguay.	474	379	524	391	595	842	6
Buenos	323	391	360	403	595	842	6
Aires:	363	391	393	403	595	842	6
Vazquez	396	391	438	403	595	842	6
Mazzini;	442	391	483	403	595	842	6
2006.	486	391	516	403	595	842	6
9.	323	403	333	415	595	842	6
Sánchez	337	403	379	415	595	842	6
M,	387	403	400	415	595	842	6
Rosario	408	403	445	415	595	842	6
D,	453	403	465	415	595	842	6
Quiroz	473	403	506	415	595	842	6
E,	514	403	524	415	595	842	6
Guzmán	323	415	364	427	595	842	6
G,	375	415	387	427	595	842	6
Tenorio	398	415	436	427	595	842	6
A.	447	415	458	427	595	842	6
A	469	415	476	427	595	842	6
generic	488	415	524	427	595	842	6
nested-RT-PCR	323	427	399	439	595	842	6
followed	423	427	464	439	595	842	6
by	512	427	524	439	595	842	6
sequencing	323	440	379	452	595	842	6
for	401	440	415	452	595	842	6
detection	437	440	484	452	595	842	6
and	506	440	524	452	595	842	6
identification	323	452	387	464	595	842	6
of	401	452	411	464	595	842	6
members	424	452	471	464	595	842	6
of	485	452	494	464	595	842	6
the	508	452	524	464	595	842	6
alphavirus	323	464	375	476	595	842	6
genus.	385	464	419	476	595	842	6
J	430	464	435	476	595	842	6
Virol	445	464	468	476	595	842	6
Methods.	479	464	524	476	595	842	6
2001;	323	476	353	488	595	842	6
95	356	476	369	488	595	842	6
(1–2):153–61.	373	476	447	488	595	842	6
10.	323	488	339	500	595	842	6
Pfeffer	344	488	377	500	595	842	6
M,	385	488	397	500	595	842	6
Wiedmann	404	488	458	500	595	842	6
M,	465	488	477	500	595	842	6
Batt	485	488	506	500	595	842	6
C.	514	488	524	500	595	842	6
Applications	323	500	383	512	595	842	6
of	398	500	408	512	595	842	6
DNA	423	500	445	512	595	842	6
amplification	460	500	524	512	595	842	6
techniques	323	512	377	525	595	842	6
in	386	512	395	525	595	842	6
veterinary	404	512	456	525	595	842	6
diagnostics.	465	512	524	525	595	842	6
Veterinary	323	525	375	537	595	842	6
Research	385	525	431	537	595	842	6
Communications	441	525	524	537	595	842	6
1995;	323	537	353	549	595	842	6
19:	356	537	374	549	595	842	6
375–407.	377	537	425	549	595	842	6
11.	323	549	339	561	595	842	6
Grywna	344	549	383	561	595	842	6
K,	390	549	400	561	595	842	6
Kupfer	407	549	441	561	595	842	6
B,	448	549	458	561	595	842	6
Panning	465	549	505	561	595	842	6
M,	512	549	524	561	595	842	6
Drexler	323	561	360	573	595	842	6
J,	369	561	377	573	595	842	6
Emmerich	386	561	437	573	595	842	6
P,	446	561	456	573	595	842	6
Drosten	465	561	504	573	595	842	6
C.	514	561	524	573	595	842	6
Detection	323	573	371	585	595	842	6
of	375	573	385	585	595	842	6
all	389	573	401	585	595	842	6
species	405	573	442	585	595	842	6
of	451	573	460	585	595	842	6
the	469	573	485	585	595	842	6
genus	494	573	524	585	595	842	6
Alphavirus	323	585	375	598	595	842	6
by	386	585	398	598	595	842	6
reverse	409	585	446	598	595	842	6
transcription-	456	585	524	598	595	842	6
PCR	323	597	343	610	595	842	6
with	352	597	373	610	595	842	6
diagnostic	382	597	433	610	595	842	6
sensitivity.	438	597	492	610	595	842	6
J	497	597	501	610	595	842	6
Clin	506	597	524	610	595	842	6
Microbiol.	323	610	371	622	595	842	6
2010;	375	610	405	622	595	842	6
48(9):3386–7.	408	610	483	622	595	842	6
12.	323	622	339	634	595	842	6
Thermo	344	622	383	634	595	842	6
Scientific.	410	622	459	634	595	842	6
Thermo	486	622	524	634	595	842	6
Scientific	323	634	368	646	595	842	6
Revert	374	634	407	646	595	842	6
Aid	413	634	429	646	595	842	6
H	435	634	443	646	595	842	6
Minus	449	634	478	646	595	842	6
Reverse	484	634	524	646	595	842	6
Transcriptase.	323	646	394	658	595	842	6
Thermo	398	646	437	658	595	842	6
Fisher	441	646	471	658	595	842	6
Scientific.	475	646	524	658	595	842	6
2000;	323	658	353	671	595	842	6
(3):3–6.	356	658	399	671	595	842	6
13.	323	670	339	683	595	842	6
Sanguinetti	344	670	401	683	595	842	6
C,	407	670	417	683	595	842	6
Neto	422	670	446	683	595	842	6
E,	451	670	461	683	595	842	6
Simpson	466	670	509	683	595	842	6
A.	514	670	524	683	595	842	6
Rapid	323	683	351	695	595	842	6
silver	358	683	385	695	595	842	6
staining	392	683	432	695	595	842	6
and	439	683	457	695	595	842	6
recovery	464	683	508	695	595	842	6
of	515	683	524	695	595	842	6
PCR	323	695	343	707	595	842	6
products	368	695	412	707	595	842	6
separated	437	695	487	707	595	842	6
on	512	695	524	707	595	842	6
polyacrylamide	323	707	399	719	595	842	6
gels.	413	707	437	719	595	842	6
Biotechniques.	451	707	524	719	595	842	6
1994;	323	719	353	731	595	842	6
17	356	719	369	731	595	842	6
(5):914-21.	373	719	433	731	595	842	6
14.	323	731	339	743	595	842	6
Delfraro	344	731	385	743	595	842	6
A,	395	731	406	743	595	842	6
Burgueño	417	731	465	743	595	842	6
A,	476	731	486	743	595	842	6
Morel	497	731	524	743	595	842	6
N,	323	743	334	756	595	842	6
Gonzalez	342	743	388	756	595	842	6
G,	396	743	407	756	595	842	6
Garcia	415	743	448	756	595	842	6
A,	456	743	466	756	595	842	6
Morelli	474	743	508	756	595	842	6
J,	516	743	524	756	595	842	6
et	323	756	333	768	595	842	6
al.	345	756	357	768	595	842	6
Fatal	369	756	394	768	595	842	6
human	400	756	434	768	595	842	6
case	440	756	463	768	595	842	6
of	469	756	478	768	595	842	6
western	484	756	524	768	595	842	6
35	507	796	517	806	595	842	6
Bernal	85	28	111	38	595	842	7
et	114	28	121	38	595	842	7
al.	124	28	134	38	595	842	7
equine	85	57	119	69	595	842	7
encephalitis,	125	57	188	69	595	842	7
Uruguay.	195	57	241	69	595	842	7
Emerg	254	57	286	69	595	842	7
Infect	85	69	114	81	595	842	7
Dis	118	69	133	81	595	842	7
2011;	137	69	167	81	595	842	7
17:	170	69	188	81	595	842	7
952–4.	191	69	227	81	595	842	7
15.	85	81	102	93	595	842	7
Jones	106	81	135	93	595	842	7
E,	149	81	159	93	595	842	7
Patel	174	81	198	93	595	842	7
N,	213	81	224	93	595	842	7
Levy	238	81	261	93	595	842	7
A,	276	81	286	93	595	842	7
Storeygard	85	93	141	105	595	842	7
A,	151	93	161	105	595	842	7
Balk	171	93	193	105	595	842	7
D,	203	93	214	105	595	842	7
Gittleman	219	93	268	105	595	842	7
J.	278	93	286	105	595	842	7
Global	85	105	117	118	595	842	7
trends	125	105	157	118	595	842	7
in	165	105	174	118	595	842	7
emerging	183	105	230	118	595	842	7
infectious	239	105	287	118	595	842	7
diseases.	85	117	131	130	595	842	7
Nature.	141	117	179	130	595	842	7
2008;	189	117	219	130	595	842	7
451(7181):	229	117	287	130	595	842	7
990–3.	85	130	121	142	595	842	7
Mem.	85	796	107	806	595	842	7
Inst.	110	796	128	806	595	842	7
Investig.	131	796	167	806	595	842	7
Cienc.	169	796	194	806	595	842	7
Salud.	197	796	222	806	595	842	7
2017;15(2):30-36	225	796	299	806	595	842	7
Estandarización	301	28	364	38	595	842	7
de	367	28	376	38	595	842	7
una	379	28	394	38	595	842	7
técnica	397	28	425	38	595	842	7
de	428	28	438	38	595	842	7
RT-PCR	441	28	471	38	595	842	7
anidada	474	28	505	38	595	842	7
16.	323	57	339	69	595	842	7
Zacks	344	57	374	69	595	842	7
M,	380	57	392	69	595	842	7
Paessler	399	57	440	69	595	842	7
S.	447	57	458	69	595	842	7
Encephalitic	465	57	525	69	595	842	7
alphaviruses.	323	69	389	81	595	842	7
Veterinary	398	69	450	81	595	842	7
Microbiology.	458	69	524	81	595	842	7
2010;	323	81	353	93	595	842	7
140:	356	81	380	93	595	842	7
281–6.	383	81	419	93	595	842	7
17.	323	93	339	105	595	842	7
Pfeffer	344	93	377	105	595	842	7
M,	382	93	394	105	595	842	7
Dobler	399	93	432	105	595	842	7
G.	437	93	449	105	595	842	7
Emergence	454	93	510	105	595	842	7
of	515	93	524	105	595	842	7
zoonotic	323	105	365	118	595	842	7
arboviruses	372	105	430	118	595	842	7
by	438	105	450	118	595	842	7
animal	457	105	490	118	595	842	7
trade	498	105	524	118	595	842	7
and	323	117	341	130	595	842	7
migration.	348	117	400	130	595	842	7
Parasit	406	117	440	130	595	842	7
Vectors.	447	117	488	130	595	842	7
2010;	494	117	524	130	595	842	7
3(1):35.	323	130	366	142	595	842	7
36	507	796	517	806	595	842	7
