無糖練乳及び無糖脱脂練乳は調製した一〇倍希釈液一〇ｍｌを二ｍｌずつ滅菌ペトリー皿五枚に採り、以下牛乳と同様に実施する。
細菌数算定は、次の要領による。
無糖練乳及び無糖脱脂練乳を除いては一平板の集落数三〇個から三〇〇個までの場合及び拡散集落があってもその部分が平板の二分の一以下で他の集落がよく分散していて、算定に支障のないものを選び出し、集落計算器を用いて常に一定した光線の下で集落数を計測し、一平板の集落数又は二枚以上の平均集落数に希釈倍数を乗じた数字を記載する場合、高位から三けた目を四捨五入して二けたのみを記載しそれ以下は〇を附する。
次の場合はこれを試験室内事故とする。
イ
集落の発生のなかった場合（無糖練乳、無糖脱脂練乳及び摂氏一一五度で一五分間以上加熱殺菌した乳飲料の場合を除く。）
ロ
拡散集落の部分が平板の二分の一を超えた場合
ハ
汚染されたことが明らかなもの
ニ
その他不適当と思われるもの
〇培地
標準寒天培養基
ペプトン五ｇ、酵母エキス二・五ｇ、ブドウ糖一ｇ及び寒天一五ｇを精製水一、〇〇〇ｍｌに合して加熱して溶かし、高圧滅菌する（滅菌後のｐＨは七・〇から七・二までとする。）。
９
乳及び乳製品の大腸菌群の測定法
本試験における大腸菌群とは、グラム陰性、無芽胞性の
桿
かん
菌で乳糖を分解してガスを発生するすべての好気性及び通性嫌気性の細菌をいう。
ａ
検体の採取及び試料の調製法
（１）
乳及び乳製品の８
乳及び乳製品の細菌数の測定法のｂ（標準平板培養法）のＡに準ずる。
ｂ
測定法
検体一ｍｌ及びその一〇倍希釈液、一〇〇倍希釈液の各一ｍｌを二本ずつＢ・Ｇ・Ｌ・Ｂ・発酵管に接種し、三二度から三五度までの温度で四八時間（前後三時間の余裕を認める。）培養してガス発生の有無を観察する。
ガス発生を認めないものは、大腸菌群陰性とし、ガス発生を認めた場合には、その発酵管を採り、一白金耳を遠藤培養基又はＥ・Ｍ・Ｂ・培養基にかく線培養して、独立した集落を発生せしめる。三二度から三五度までの温度で二四時間（前後二時間の余裕を認める。）培養後遠藤培養基又はＥ・Ｍ・Ｂ・培養基から定型的大腸菌群集落又は二個以上の非定型的集落を
釣
ちよう
菌して、乳糖ブイヨン発酵管及び寒天斜面にそれぞれ移植する。
乳糖ブイヨン発酵管は三二度から三五度までの温度で四八時間（前後三時間の余裕を認める。）、寒天斜面は三二度から三五度までの温度で二四時間培養し、乳糖ブイヨン発酵管においてガス発生を確認した場合に、これと相対する寒天斜面培養について鏡検し、グラム陰性無芽胞
桿
かん
菌を認めた場合を大腸菌群陽性とする。
〇培地
Ａ
Ｂ・Ｇ・Ｌ・Ｂ・発酵管
ペプトン一〇ｇ及び乳糖一〇ｇを蒸留水五〇〇ｍｌに溶解し、これに新鮮な牛胆汁二〇〇ｍｌ（又は乾燥牛胆末二〇ｇを水二〇〇ｍｌに溶解したものでｐＨ七・〇から七・五までのもの）を加えて約九七五ｍｌとしｐＨ七・四に修正し、これに〇・一％のブリリアントグリーン水溶液一三・三ｍｌを加えて、全量を一、〇〇〇ｍｌとし、綿ろ過し、ダーラム管を入れた試験管に約一〇ｍｌずつ分注して後間けつ滅菌する（滅菌後のｐＨは七・一から七・四までとする。）。
Ｂ
遠藤培養基
三％の普通寒天（ｐＨ七・四から七・八までのもの）一、〇〇〇ｍｌを加温溶解し、これにあらかじめ少量の水に溶した乳糖一五ｇを加えてよく混和する。さらにこれにフクシンのエタノール飽和溶液（エタノール一〇〇ｍｌにフクシン約一一ｇを溶かしたもの）一・〇ｍｌを加え冷却して約五〇度になつたとき、新たに製した一〇％の亜硫酸ナトリウム溶液を少量ずつ加える。フクシンの色が淡桃色になつたとき滴加を止める。
これを試験管又はフラスコに四〇ｍｌから一〇〇ｍｌまでを分注し、間けつ滅菌し、用に臨み溶かして平板とする。
Ｃ
Ｅ・Ｍ・Ｂ・培養基
ペプトン一〇ｇリン酸二カリウム（Ｋ
２
ＨＰＯ
４
）二ｇ及び寒天二五ｇから三〇ｇまでを蒸液水一、〇〇〇ｍｌに加え加熱溶解し、沸騰後蒸発水量を補正する（ｐＨの修正不要。）。これに乳糖一〇ｇ二％エオジン水溶液（エオジン黄）二〇ｍｌ及び〇・五％メチレンブルー水溶液一三ｍｌを加えてよく混和し、分注し、間けつ滅菌して用に臨み平板とする。
Ｄ
乳糖ブイヨン発酵管
普通ブイヨンに乳糖を〇・五％の割合に加えて、ダーラム管を入れた試験管に約一〇ｍｌずつ分注し、間けつ滅菌する（滅菌後のｐＨは六・四から七・〇までとする。）。
別記一
全乳比重補正表
→牛乳温度
０
１
２
３
４
５
６
７
８
９
１０
１１
１２
１３
↓乳稠計度数
１４
１２．９
１２．９
１２．９
１３．０
１３．０
１３．１
１３．１
１３．１
１３．２
１３．３
１３．４
１３．５
１３．６
１３．７
１５
１３．９
１３．９
１３．９
１４．０
１４．０
１４．１
１４．１
１４．１
１４．２
１４．３
１４．４
１４．５
１４．６
１４．７
１６
１４．９
１４．９
１４．９
１５．０
１５．０
１５．１
１５．１
１５．１
１５．２
１５．３
１５．４
１５．５
１５．６
１５．７
１７
１５．９
１５．９
１５．９
１６．０
１６．０
１６．１
１６．１
１６．１
１６．２
１６．３
１６．４
１６．５
１６．６
１６．７
１８
１６．９
１６．９
１６．９
１７．０
１７．０
１７．１
１７．１
１７．１
１７．２
１７．３
１７．４
１７．５
１７．６
１７．７
１９
１７．８
１７．８
１７．８
１７．９
１７．９
１８．０
１８．１
１８．１
１８．２
１８．３
１８．４
１８．５
１８．６
１８．７
２０
１８．７
１８．７
１８．７
１８．８
１８．８
１８．９
１９．０
１９．０
１９．１
１９．２
１９．３
１９．４
１９．５
１９．６
２１
１９．６
１９．６
１９．７
１９．７
１９．７
１９．８
１９．９
２０．０
２０．１
２０．２
２０．３
２０．４
２０．５
２０．６
２２
２０．６
２０．６
２０．７
２０．７
２０．７
２０．８
２０．９
２１．０
２１．１
２１．２
２１．３
２１．４
２１．５
２１．６
２３
２１．５
２１．５
２１．６
２１．７
２１．７
２１．８
２１．９
２２．０
２２．１
２２．２
２２．３
２２．４
２２．５
２２．６
２４
２２．４
２２．４
２２．５
２２．６
２２．７
２２．８
２２．９
２３．０
２３．１
２３．２
２３．３
２３．４
２３．５
２３．６
２５
２３．３
２３．３
２３．４
２３．５
２３．６
２３．７
２３．８
２３．９
２４．０
２４．１
２４．２
２４．３
２４．５
２４．６
２６
２４．３
２４．３
２４．４
２４．５
２４．６
２４．７
２４．８
２４．９
２５．０
２５．１
２５．２
２５．３
２５．５
２５．６
２７
２５．２
２５．３
２５．４
２５．５
２５．６
２５．７
２５．８
２５．９
２６．０
２６．１
２６．２
２６．３
２６．５
２６．６
２８
２６．１
２６．２
２６．３
２６．４
２６．５
２６．６
２６．７
２６．８
２６．９
２７．０
２７．１
２７．２
２７．４
２７．６
２９
２７．０
２７．１
２７．２
２７．３
２７．４
２７．５
２７．６
２７．７
２７．８
２７．９
２８．１
２８．２
２８．４
２８．６
３０
２７．９
２８．０
２８．１
２８．２
２８．３
２８．４
２８．５
２８．６
２８．７
２８．８
２９．０
２９．２
２９．４
２９．６
３１
２８．８
２８．９
２９．０
２９．１
２９．２
２９．３
２９．５
２９．６
２９．７
２９．８
３０．０
３０．２
３０．４
３０．６
３２
２９．７
２９．８
２９．９
３０．０
３０．１
３０．３
３０．４
３０．５
３０．６
３０．８
３１．０
３１．２
３１．４
３１．６
３３
３０．６
３０．７
３０．８
３０．９
３１．０
３１．２
３１．３
３１．４
３１．６
３１．８
３２．０
３２．２
３２．４
３２．６
３４
３１．５
３１．６
３１．７
３１．８
３１．９
３２．１
３２．２
３２．３
３２．５
３２．７
３２．９
３３．１
３３．３
３３．５
３５
３２．４
３２．５
３２．６
３２．７
３２．８
３３．０
３３．１
３３．２
３３．４
３３．６
３３．８
３４．０
３４．２
３４．４
１４
１５
１６
１７
１８
１９
２０
２１
２２
２３
２４
２５
２６
２７
２８
２９
３０
１３．８
１４．０
１４．１
１４．２
１４．４
１４．６
１４．８
１５．０
１５．２
１５．４
１５．６
１５．８
１６．０
１６．２
１６．４
１６．６
１６．８
１４．８
１５．０
１５．１
１５．２
１５．４
１５．６
１５．８
１６．０
１６．２
１６．４
１６．６
１６．８
１７．０
１７．２
１７．４
１７．６
１７．８
１５．８
１６．０
１６．１
１６．３
１６．５
１６．７
１６．９
１７．１
１７．３
１７．５
１７．７
１７．９
１８．１
１８．３
１８．５
１８．７
１８．９
１６．８
１７．０
１７．１
１７．３
１７．５
１７．７
１７．９
１８．１
１８．３
１８．５
１８．７
１８．９
１９．１
１９．３
１９．５
１９．７
２０．０
１７．８
１８．０
１８．１
１８．３
１８．５
１８．７
１８．９
１９．１
１９．３
１９．５
１９．７
１９．９
２０．１
２０．３
２０．５
２０．７
２１．０
１８．８
１９．０
１９．１
１９．３
１９．５
１９．７
１９．９
２０．１
２０．３
２０．５
２０．７
２０．９
２１．１
２１．３
２１．５
２１．７
２２．０
１９．８
