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Bakterieller Stoffwechsel von Resorcinylverbindungen: Reinigung und Eigenschaften von Orcinolhydroxylase und Resorcinolhydroxylase aus Pseudomonas putida ORC. Die Hydroxylaseaktivitäten, die in Extrakten von Pseudomonas putida ORC nach dem Wachstum auf Orcinol und Resorcinol als einzige Kohlenstoffquelle beobachtet wurden, wurden zu Homogenität gereinigt. Beide Enzyme zeigten sich als Flavoproteine und enthalten für jede Polypeptidkette ungefähr 1 Mol FAD, S20,W-Werte für jedes Enzym sind 4,1 +/- 0,1 und sind unabhängig von der Anwesenheit ihrer aromatischen Substrate. Molekulargewichtsbestimmungen unter nativen (etwa 68.000) und denaturierenden (etwa 70.000) Bedingungen zeigten, dass sie monomerisch sind. Das sichtbare Absorptionsspektrum ist identisch, aber das kreisförmige dichroische Spektrum der beiden Proteine kann unterschieden werden. Obwohl jedes Protein die NAD(P)H- und O2-abhängige Hydroxylation von Orcinol und Resorcinol katalysiert, ist die Effizienz der Transformationen der Substrate durch die beiden Enzyme radikal unterschiedlich; außerdem ist Resorcinol-Hydroxylase in den aromatischen Verbindungen, die es als Substrate und Effektoren verwenden kann, viel vielseitiger. Andere Eigenschaften der Enzyme, die eindeutig ihre eigene Identität etablieren, sind ihre serologischen Eigenschaften und Aminosäurezusammensetzung; letztere Eigenschaft ist besonders offensichtlich, wenn die Mengen von Valin- und Alaninrückständen verglichen werden. Die Synthese jedes Enzyms unterliegt auch unterschiedlichen regulatorischen Beschränkungen, die durch das für das Wachstum verwendete Substrat kontrolliert werden.
[Mögliche strukturelle und funktionelle Organisation des Systems der lokalen Blutflussregulierung des Gehirns]. rCBF unter normalen Bedingungen im Kaninchen-, Katzen- und Affenhirn wurde gefunden, eine spontane Periodizität zu haben, während rCBF-Antworten auf afferente Flicker-Stimulation in der Regel ein zweiphasiges schwankendes Muster zeigten. Dies deutet darauf hin, dass das regulatorische System des rCBF aus nicht weniger als zwei regulatorischen Ketten mit unterschiedlichen Zeitkonstanzen und einem Feedback besteht. Die Daten über die vaskulären Reaktionen des Gehirns auf die Mikroanwendung von mCSF-Lösungen mit verschiedenen pH-, Kalium- und Katecholaminekonzentrationen deuten darauf hin, dass schnelle regulatorische Ketten durch Kalium- und neurogene vaskuläre Effekte bedingt sein können, während langsame durch CO2 und verwandte pH-Veränderungen vermittelt werden könnten.
[Differenzen in den Reaktionen der Geschmacksrezeptoren auf organische und anorganische Säuren mit Veränderungen der Konzentration von Bicarbonat in der Lösung]. Die pH-Schwellenwerte für Zitronensäure (pH = 4,9) wurden bei 1,2 mmol/1 Bicarbonat in der Lösung bei 1,4 pH-Schwellenwerte für HC1 (3,5) überschritten. Die Reaktion auf Zitronensäure war höher als auf HC1 bei gleichem pH. Die Abnahme des Bicarbonats von 1,2 mmol/1 auf 0 reduzierte die pH-Schwelle nur für Zitronsäure von 4,90 auf 3,15. Die pH-Schwelle für HC1 blieb 3,5 Die Chordata tympani-Reaktion auf Stimulation mit Lösungen, die Bicarbonat enthielten (1,2 mmol/1) war höher als in Abwesenheit von Bicarbonat. Die erhaltenen Daten deuten auf zwei Bereiche der Säuren in Aktion hin.
[Regulierung der lokalen Gewebe PO2 in der Hirnrinde der Katze]. Lokale PO2 wurde in der Katzenschale an angrenzenden Stellen mit einer Platin-Multiwire-Oberflächenelektrode sowohl unter stabilen Zustandsbedingungen als auch bei variierender arterieller Sauerstoffversorgung gemessen. Gleichzeitig wurde PO2 im Sinus sagittalis kontinuierlich durch die Gefäßwand aufgezeichnet. Unter normoxischen und stabilen Zustandsbedingungen variierten die lokalen Gewebe-PO2-Werte zwischen O Torr und fast arteriellen Niveaus von 85 Torr nach theoretischen Berechnungen. Bei erhöhter arterieller Sauerstoffversorgung reagierte das lokale Gewebe PO2, gemessen an angrenzenden Stellen, ziemlich anders. Lineare Erhöhungen des lokalen Gewebe-PO2 im Vergleich zu arteriellem PO2 sowie konstante oder nur sehr geringe Erhöhungen wurden aufgezeichnet. Die Konstanz der lokalen PO2 (=lokale PO2-Autoregulation) wurde durch lokale Vasokonstriktion verursacht. Bei verminderter Sauerstoffversorgung der Arterien fiel jedoch das Gewebe PO2 an allen untersuchten Stellen auf Hypoxie und Anoxie. PO2-Autoregulation während einer Abnahme der arteriellen PO2, wie von Bicher (1973) beschrieben, konnte nicht gefunden werden.
Analyse von Hauttransplantaten über die MSA-Barriere bei Mäusen, die mit Serum von spezifisch oder syngeisch transplantierten Spendern vorbehandelt wurden. Das verlängerte Überleben von schwach inkompatiblen Hautallografen bei Mäusen (durch die von der MSA dargestellte Barriere) kann durch die Vorbehandlung der Empfänger nicht nur mit einem spezifischen Anti-MSA-Serum (auf Tag 5 nach einem einzelnen MSA-kompatiblen Hauttransplantat erhalten), sondern auch durch ein Kontrollserum, das auf ähnliche Weise von den Empfängern voll kompatibler (syngenischer) Hauttransplantate erhalten wird, induziert werden. Die Verabreichung von Serum von nicht-gravierten Mäusen hatte keine Auswirkungen auf das Überleben von Graft. Die ähnliche biologische Wirkung beider Seren hatte einen Gegenwert in ihrem ähnlichen Gehalt und Spektrum von Glykosaminoglykanen. Auch in den Hauttransplantaten selbst war der Verlauf der qualitativen und quantitativen Veränderungen von GAG in der frühen Postgrafting-Periode in der allogenen und syngenen Situation ähnlich. Die mögliche Rolle dieser Substanzen im Serum und an der Stelle des Implantats und ihre Wirkung auf das Ergebnis der Allograft-Reaktion werden diskutiert.
Wirkung der normalen und ulzerösen Ernährung auf die Säure des Mageninhaltes bei Patienten mit Zwölffingerdarmgeschwüren. Patienten mit unkompliziertem Zwölffingerdarmgeschwür erhielten zwei Arten von Diäten - eine normale und eine Ulzer-Typ-Diät. Die erhaltenen Daten zeigten keinen statistisch signifikanten Unterschied zwischen der Wirkung der beiden Diäten. Es wurde dann keine Beweise gefunden, die die immer noch weit verbreitete eingeschränkte Diät bei der Behandlung von Magengeschwüren unterstützen.
Beeinträchtigte Sertoli-Zellfunktion bei experimentellem Kryptorchidismus bei Ratten. Die Produktion von testikulärem androgenbindendem Protein (ABP), als Maßstab für die Sertoli-Zellfunktion, wurde nach einseitiger oder bilateraler experimenteller Kryptorchidismus bei erwachsenen Ratten untersucht. Zwei oder vier Wochen nach der Translokation der Hoden in den Bauch wurden keine wesentlichen Veränderungen in der Konzentration von ABP pro mg Protein festgestellt, obwohl es eine deutliche und progressive Abnahme des ABP-Gehalts pro Hoden gab. Allerdings wurde die Rate der ABP-Produktion stark reduziert, gemessen durch die Anhäufung von ABP während der 16-stündigen Ligation der efferenten Kanäle oder durch die Produktion von ABP durch Hoden in einem In-vitro-System. Dies deutet darauf hin, dass die Funktion der Sertoli-Zelle durch die intraabdominale Position stark beeinträchtigt ist.
Das Sauerstofftransportsystem der roten Blutkörperchen während der diabetischen Ketoazidose und Erholung. Tägliche Bewertungen von 8 neu entdeckten ketoazidotischen Diabetikern zeigten, dass der Bohr-Effekt von Hämoglobin um 50% verringert wurde, während die Erythrozyten 2,3-DPG unter 10 mumoles / g Hb verringert wurde. 2,3-DPG korrelierte stark mit dem pH-Wert während der Acidose und mit dem anorganischen Phosphat (Pi) im Plasma nach der ersten Insulinverabreichung. Die Sauerstoffaffinität des Hämoglobins, gemessen als pH-Wert von P50, blieb bei der Ketoazidose im Vergleich zur Zeit unverändert, jedoch fiel der pH-Wert von P50 bemerkenswert (p weniger als 0,001) und blieb bis zu 7 Tage abhängig von der Resynthese von 2,3-DPG in Bezug auf Pi. Der Hill-Koeffizient, der die Neigung der Sauerstoff-Dissoziationskurve widerspiegelt, wurde bei der Ketoazidose (p weniger als 0,005) verringert und nach der pH-Normalisierung (p weniger als 0,005) weiter verringert. Es gab eine enge Assoziation von n mit 2,3-DPG (p weniger als 0,001) und zusätzlich mit Pi bei 2,3-DPG-Ebenen unter 10 mumoles/g Hb. Basierend auf diesen Erkenntnissen kann eine verminderte Sauerstofffreisetzung der Erythrozyten von einem Fünftel während der Acidose und mehr als einem Drittel nach der pH-Korrektur angenommen werden. Angesichts der engen Beziehung von Pi zum Sauerstofftransportsystem wird vorgeschlagen, dass die Behandlung der Ketoazidose die Pi-Substitution einschließen sollte.
Fluoreszenz oxidierter Flavoproteine aus peripheren isolierten Pankreasinseln. In peripheren Pankreasinseln wurde die Fluoreszenz oxidierter Flavoproteine (FAD) kontinuierlich aufgezeichnet. Die Erhöhung der Glukosekonzentration in der mittleren Form 0 oder 5 mM auf 20 mM führte zu einer Abnahme der FAD-Fluoreszenz, die 10 Sekunden nach dem Wechsel des Mediums begann. L-Leucin (10 mM), (+/-)-B-BCH (20 mM) und Alpha-Ketoisokaproinsäure (10 mM) verursachten typische Kinetik der FAD-Fluoreszenzabnahme. Die Ergebnisse werden interpretiert, um schnelle Veränderungen des funktionellen Zustands der B-Zell-Mitochondrien anzuzeigen, die durch die oben genannten Stimulatoren der Insulinfreisetzung induziert werden.
Vergleich von Aminosäuren, die den Bereich der oxyntischen Drüse bei der Stimulation der Magensekretion baden. Diese Studie wurde durchgeführt, um die Fähigkeit von L- und D-Isomeren von Aminosäuren zu vergleichen, die den Bereich der oxyntischen Drüse baden, um die Säure-Sekretion bei bewussten Hunden mit Heidenhain-Tasche (HP), Magenfisteln (GF) und Pankreasfisteln (PF) zu stimulieren. Die Säureausgaben von HP wurden durch eine intragastrische Titrierungsmethode bestimmt, wenn Aminosäurelösungen bei verschiedenen Konzentrationen, pH-Werten und Distenzdruck in HP infundiert wurden. Es wurde festgestellt, dass nur L-Isomere aller natürlichen Aminosäuren die Säure-Sekretion stimulieren, während D-Isomere der getesteten Aminosäuren in dieser Hinsicht völlig inert waren. Der Vergleich der sekretagogischen Aktivität von Aminosäuren zeigt, dass L-Histidin unter den essentiellen Aminosäuren und Glycin unter den nicht-essentiellen Aminosäuren die stärkste Stimulation von Säureausgaben aufwies, die jeweils 52 und 40% der maximalen Antwort auf Histamin erreichten. Die Abnahme des pH-Wertes der in HP infundierten L-Histidin-Lösung in sequentieller Reihenfolge von 5.0 auf 1.0 führte zu einer schrittweisen Reduktion der Säureausgabe, die bei pH 1.0 auf etwa 40% der bei pH 5.0 erzielten Spitzenreaktion fiel. Die örtliche Bewässerung von HP mit 2% Xylocain und die intravenöse Infusion von Atropin (100 mug pro kg pro Stunde) oder Methyamid (2.9 mg pro kg pro Stunde) reduzierten die HP-Reaktion auf chemische Stimulation und die pH-Abhängigkeit dieser Reaktion. Wir schließen, dass nur L- und nicht D-Isomere von Aminosäuren, die den Bereich der oxyntischen Drüse baden, die Säure-Sekretion durch einen lokalen, gastrinunabhängigen Mechanismus stimulieren, der empfindlich auf den Distenzdruck und den pH-Wert reagiert.
Beweis für die Tandem-Duplizierung von Genen in einer merodiploiden Region von Pneumokokken-Mutaten, die resistent gegen Sulfonamid sind. Ein Pneumokokken-Mutant, sulr-c, resistent gegen Sulfonamide, und drei Transformatoren mit assoziierten d oder d + Resistenzmarkern wurden zuvor als instabil gemeldet und zeigen unterschiedliche Muster und Frequenzen der Segregation stabiler Nachkommen fehlt der c-Marker. Jeder der vier Stämme zeigte eine charakteristische Dosierung der Gene, die an der Merodiploidy beteiligt waren. Komplementäre Stränge von DNA aus diesen stabilen und instabilen Stämmen wurden gelöst und Homoduplex- und Heteroduplex-Hybriden aus den getrennten DNA-Strängen wurden als Spender in genetischen Transformationen verwendet. Die Aktivitäten eines normalen Markers (Streptomycinresistenz) und diejenigen, die an der Heterozygosität (c, d und d+) beteiligt waren, wurden quantitativ gemessen. Von diesen Heteroduplexen, die aus entgegengesetzten Strängen bestehen, die aus einem heterozygoten und einem stabilen Stamm abgeleitet werden, wird der normale Marker effizient übertragen, aber die heterozygoten Marker sind nicht. Auf der anderen Seite, wenn beide Stränge eines Heteroduplexes aus verschiedenen heterozygotischen Stämmen abgeleitet sind, können alle Marker mit üblicher Effizienz zu einem stabilen Empfängerstamm übertragen werden. Die verminderte Effizienz in der früheren Art von Heteroduplex wird einer Inhomologie zugeschrieben, die aus einer Tandem-Duplikation in den Merodiploidstämmen und einem postulierten DNA-Reparaturprozess resultiert, der von ihm stimuliert wird, während er in Form des Spender-Duplexs ist. Die Inhomologie umfasst wahrscheinlich (a) eine Mikroheterogenität zwischen dem c-Site und dem Wildtyp-Locus, und (b) eine umfangreichere Inkompatibilität, die einem zusätzlichen Segment des Genom in einer Tandem-Duplizierung zugeschrieben wird, die die c- und d-Sites abdeckt. Die erste dieser Inhomologien erzeugt eine verringerte Effizienz der Übertragung von allen Konfigurationen des bestimmten d-Allels, die mit dem mutanten c-Marker verbunden sind, und berücksichtigt daher die charakteristischen Übertragungsmuster auch von der nativen merodiploiden DNA.
Eine Studie von Pneumokokkenmerodiploiden auf molekularer Ebene. Die DNA eines sulfonamidresistenten Pneumokokkenstammes (heterozygous für sulr-c) und die von drei hochresistenten und persistent heterozygous cd-Transformanten, die durch die Einführung des sulr-c-Marker in einen stabilen sulfonamidresistenten Stamm (sulr-d) abgeleitet wurden, wurden untersucht, um die genetische Basis ihrer Merodiploidy zu analysieren. Die physikalischen Eigenschaften der nativen und denaturierten DNA von den heterozygotischen und den nicht-heterozygotischen Stämmen waren nicht zu unterscheiden. Die Denaturierbarkeit und die Renaturierbarkeit der biologischen Aktivität für die heterosexuellen Marker waren im Wesentlichen identisch mit denen der normalen Marker. Die Heterozygosität erstreckt sich auf den eng miteinander verbundenen Locus, der vier verschiedene Konfigurationen von CD- und CD+-Transformatoren hervorruft, die durch ihre Frequenzen der Segregation und Spender-Marker-Aktivitäten gekennzeichnet sind. Die Marker-Aktivitäts-Verhältnisse und die Häufigkeit der Co-Transfer von heterozygous Marker wurden in jedem beobachtet, dass die gleiche bleiben, wenn die Spender-DNA nativ war, denaturiert oder reannealed ohne Fraktionierung oder reannealed nach Remixing von gelöschten Stränge. Mögliche Modelle wurden gegen diese Beobachtungen gewogen und diese Überlegungen führten zu der Annahme, dass die Tandem-Duplizierung einer Gene-Region für die Heterosygosität und Instabilität dieser Region verantwortlich sein könnte. Eine detailliertere Prüfung dieses Modells wird in einem Begleitdokument vorgestellt.
Genetische Hybridisierung an den unverbundenen Thy und Str Loci von Streptococcus. Die Sanguis- und Pneumoniae-Arten von Streptococcus wurden als Empfänger in Transformationen von str+ zu str-r und von thy- zu thy+ verwendet. Die str-r-Mutationen in den beiden Arten hatten sich zuvor als allelisch erwiesen. Die Homologie der Thy-Mutationen in den beiden Arten wurde in den ähnlichen phenotypischen Eigenschaften, die sie verliehen demonstriert (Tod in Abwesenheit von Thymidin, Mangel an Thymidylat-Synthetase). Die str und thy loci sind in jeder art unverbunden.--- Wenn die beiden arten sowohl durch homospezifische als auch durch heterospezifische dna transformiert werden, ist die effizienz in der heterospezifischen kreuzung immer niedriger. Die Effizienz der heterospezifischen Transformation ist bei der thy deutlich niedriger als bei der str locus. DNA wurde von Empfängern extrahiert, die integrierte Marker heterospezifischer Herkunft hatten. Wenn eine solche hybride DNA auf den ursprünglichen Empfängerarten getestet wird, sind die heterospezifischen Marker in der Regel so effektiv wie homospezifische Marker. Bei Tests an den ursprünglichen Spenderarten ist die hybride DNA jedoch in der Regel effizienter als die heterospezifische DNA. Das gilt sowohl für deine als auch für die Str-Transformation. -- -- Vierzig unabhängige thy+ Hybride wurden im Kreuz von sanguis thy-Empfängern mit pneumoniae thy+ DNA erhalten. Diese Hybriden fallen in eine Reihe von Klassen basierend auf der relativen Effizienz, mit der ihre extrahierte DNA in der Lage ist, den thy+-Marker in Pneumoniae thy-Zellen zu übertragen. Die effizienteste dieser DNAs zeigt etwa 20% der Effizienz der homospezifischen Pneumoniae thy+ DNA und drei Größenordnungen größere Effizienz als die heterospezifische sanguis thy+ DNA. So ist sehr wenig von der Ineffizienz der heterospezifischen Transformation des Thy Locus einem klassischen Beschränkungsmechanismus zuzuschreiben. Vielmehr scheinen die Wildtyp thy+ Loci in den beiden Arten an mehreren Standorten zu unterscheiden, und unabhängige heterospezifische Übertragungen führen zu unterschiedlichen Ausmaßen der Integration dieser Standorte. Auf dieser Grundlage unterscheiden sich die thy+ Loci der beiden Arten in einer größeren Anzahl von Standorten als die jeweiligen str+ Loci.
Die Fibrin-Plattenmethode mit Reagenzien, die durch Affinitätschromatographie gereinigt wurden, und ihre Verwendung zur Bestimmung der fibrinolytischen und anderen proteolytischen Aktivität im Speichel, Galle und Plasma. Eine Modifikation der Fibrin-Platte-Methode wird vorgestellt. Plasminogen-freies menschliches Fibrinogen und Plasminogen, das durch Affinitätschromatographie gereinigt wurde, wurden verwendet. Fibrinplatten ohne und mit einer konstanten Menge an Plasminogen und mit Agarose als Stabilisierungsmedium wurden zur Einschätzung der Aktivität von Plasmin und Plasminogen-Aktivator verwendet. Die Aktivatoraktivität konnte in steriler Galle und Speichel nachgewiesen werden. Bei Plasmin-Aktivität waren die Schätzungen des Plasminogen-Aktivators ungefähr. Die Methode ist empfindlich, kleine Mengen von Reagenzien und Proben sind erforderlich. Der Fehler der Methode ist vergleichsweise gering und die Wiederholbarkeit ist gut.
[Diebstahl ohne Motiv des Gewinns als psychopathologisches Syndrom (Autor's transl)]. Diebstahl ohne Schmerzmotiv ist seit dem frühen 19. Jahrhundert bekannt. Das Problem wurde aber nicht gelöst. Obwohl sie früher als eine psychische Erkrankung angesehen wurden, werden sie heute nicht als etwas Besonderes angesehen. Aber sie geschehen immer noch. Nur ein kleiner Prozentsatz des gemeinsamen Shop-Lifting kann als psychopathologisches Syndrom bezeichnet werden. Es wurden zahlreiche Erklärungen und Analysen veröffentlicht, die ausführlich diskutiert werden. In einer hier beschriebenen Gruppe werden umfassend schwierige eheliche Situationen mit Konflikten, sexueller Frustration, Depressionen, körperlicher und geistiger Erschöpfung sowie aggressiven und suizidalen Tendenzen gefunden. Diebstahl scheint eng miteinander verbunden zu sein. Aber das Muster von Motivation und Kausalität ist keineswegs stereotyp. Um solche Handlungen zu klären, muss man so genau wie möglich die biographische Verbindung und was während der Handlung geschieht - ganz abgesehen von somatischen Bedingungen - berücksichtigen. Die aktuelle Bewertung in den Berichten ist völlig unbefriedigend. Es ist dringend notwendig, um die umstrittenen Fragen zu klären.
Die Strukturen des Phytochromschromophores in beiden photoreversiblen Formen. Spektrale Messungen des Phytochroms werden nach der Entfaltung der Peptidkette durchgeführt. Durch den Vergleich mit Gallenpigmenten bekannter Struktur wird Struktur 1a, die einen hydrogenierten Ring A enthält, für den PR-Chromophor abgezogen. Seine spektralen Eigenschaften deuten darauf hin, dass das Chromophor der physiologisch aktiven PFR-Form die Doppelbindung der Brücke, die die Ringe A und B verbindet, verloren hat.
Eine Mikro-Methode zur quantitativen Bestimmung von Acylneuraminesäuren aus Erythrozytenmembranen. Eine Mikro-Methode wird vorgestellt, die die schnelle und genaue Bestimmung von sauerhydrolysierten Acylneuraminsäuren in den Erythrozytenmembranen ermöglicht. Erythrozyten aus 1 ml menschlichem und kaninchenhaften Blut, das ACD-Buffer enthält, werden auf Millipore-Filtern mit einer Porengröße von 1,2 mu gewaschen und hemolysiert. Acylneuraminic Säuren werden aus den Erythrozytenmembranen, die noch auf den Filtern unter den optimalen Bedingungen von 0,1 N HCl bei 80 Grad C für 50 min freigesetzt. Eine Voraussetzung für die Bestimmung der wahren Menge an Acylneuraminesäuren unter Verwendung des periodischen Säure-/Thiobarbitursäure-Analyses ist die Kleinmasse-Extraktion von Lipiden aus der Hydrolysat- und Anion-Austauschchromatographie von Acylneuraminesäuren. Die auf diese Weise erhaltenen Werte müssen korrigiert werden, da während der Säurehydrolyse 20% der Acylneuraminsäuren zerstört werden. In menschlichen Blutproben von 10 gesunden Individuen wurden durchschnittlich 223 nmol Acylneuraminesäuren pro ml verpackter Erythrozyten gefunden, und in der gleichen Menge von Kaninchen-Erythrozyten wird die 1. Methode für eine Screening des Acylneuraminesäuregehalts der Erythrozytenmembranen bei hämolytischen Erkrankungen oder anderer Zellmembranen diskutiert.
Phosphatasen der menschlichen Lebersäure. Die menschliche Leber enthält drei chromatographisch unterschiedliche Formen der nichtspezifischen Säurephosphatase (EC 3.1.3.2). Säurephosphatasen I, II und III haben ein Molekulargewicht von jeweils mehr als 200 000, von 107 000 und von 13 400. Nach der teilweisen Reinigung wurde Isoenzym II als ein einzelnes Aktivitätsband erhalten, wie durch Aktivitätsbeschichtung mit P-Nitrophenylphosphat und Alpha-Nafthylphosphat auf Polyacrylamid-Gelen bei mehreren pH-Werten bewertet. Mit 50mM p-Nitrophenylphosphat als Substrat zeigen Enzyme II und III Aktivitätsplateaus über dem pH-Bereich 3 - 5 und 3,5 - 6 entsprechend. Säurephosphatase II wird nicht signifikant durch 0,5% Formaldehyd gehemmt. Die Aktivität der menschlichen Lebersäurephosphatase II und der menschlichen Prostatasäurephosphatase gegenüber mehreren Substraten wird verglichen. Das Leberenzym, das einen markanten Kontrast zum Prostata-Enzym aufweist, hydrolysiert kein O-Phosphorylcholin.
Isolierung und Charakterisierung von Pepsin-behandeltem Typ III-Collagen aus Fleischhaut. Calf-Haut-Collagen wurde durch die Inkubation von saurextraktierter Calf-Haut mit Pepsin bei pH 2.0 und 25 Grad C gelöst, Bedingungen, die keinen Abbau der dreifachen Helix-Region von Kollagen verursachten. Typ III-Kollagen wurde von Typ I-Kollagen durch differenzielle Salzabfälle bei pH 7,5 getrennt. Das isolierte Kollagen Typ III enthielt hauptsächlich Gamma- und höhere Molekulargewichtskomponenten, die durch reduzierbare und/oder nicht-reduzierbare Bindungen gekreuzt wurden. Die isolierten alpha1 (III) Ketten hatten eine Aminosäurezusammensetzung, die für Kollagen Typ III charakteristisch ist. Denaturiertes, aber nicht reduziertes Typ III-Collagen, chromatographiert auf Carboxymethyl-Cellulose, in der Alpha-2-Region eludiert, während nach Reduktion und Alkylierung die Alpha1 (III) -Ketten zwischen den Positionen von Alpha1 (I) und Alpha2 eludiert wurden. Die mittelpunktliche Schmelztemperatur (tm) von Typ III-Collagen (35,1 Grad C) in einem Zitratpuffer bei pH 3,7 war etwas niedriger als das von Typ I-Collagen (35,9 Grad C). Renaturationsexperimente bei 25 Grad C zeigten, dass denaturierte Typ III-Collagenmoleküle mit intakten intramolekularen Disulfidbrücken (Gamma-Komponenten) die dreifache spirale Struktur von Kollagen viel schneller als reduzierte und carboxymethylierte alpha1 (III) Ketten reformieren.
Hohe Dosis und vielseitige Medikamententherapie bei behandlungsresistenten psychotischen Patienten. Der Autor glaubt, dass viele der chronischen Patienten in psychiatrischen Einrichtungen und psychiatrischen Einrichtungen geholfen werden könnten, wenn Ärzte mehr bereit wären, verschiedene Kombinationen und höhere Dosen von psychotropen Medikamenten zu versuchen, als in der Regel verwendet wird. Er präsentiert Fallstudien von zwei chronischen Patienten, denen der innovative Einsatz von Medikamenten geholfen hat, und diskutiert Faktoren, die bei der Implementierung einer hohen Dosis- und vielseitigen Medikamententherapie zu berücksichtigen sind.
Eine neue Variante von Glucosephosphate Isomerase-Mangel. Eine neue Variante von Glucose-6-Phosphat-Isomerase-Mangel wird beschrieben. Die Enzymkinetik und -eigenschaften wurden untersucht. Genetische und elektrophoretische Daten deuten auf einen doppelten heterozygous Zustand bei dem Patienten hin. Diese Daten werden mit den bisher in der Literatur beschriebenen Varianten verglichen.
[Infusionsbehandlung bei Schock] Heutzutage stehen vor allem Dextran, Gelatine und Stärke-Lösungen für die Infusionstherapie der verschiedenen Schockformen zur Verfügung. Die Anwendung dieser Volumenersatzstoffe muss streng kontrolliert werden, um insbesondere kardiale und pulmonale Komplikationen zu vermeiden. Eine Bluttransfusion in Kombination mit einem Volumenersatzstoff sollte nur bei schwerem Blutverlust angewendet werden. Die Behandlung der metabolischen Acidose, die normalerweise gleichzeitig auftritt, wird mit einer alkalischen Lösung durchgeführt.
Unterdrücker T-Zellen und Wirtresistenz gegen 111 Pneumokokken nach der Behandlung mit Anti-Lymphozyten-Serum. Die Antikörperreaktion gegen Pneumokokkenpolysaccharid Typ III (SS-II) wurde bei Mäusen, die mit Anti-Lymphozyten-Serum (ALS) behandelt wurden, signifikant erhöht. BALG/c Mäuse gegeben 0,25 ml ALS an den Tagen -1, 0, und 1 im Vergleich zu den Tagen der Immunisierung mit 0,5 Schimmel von SSS-II hatte einen 20-fachen Anstieg (11,383 erhöht auf 199,917) in der Anzahl der splenischen plaque-forming Zellen aufgeführt am Tag 5 im Vergleich zu unbehandelten, immunisierten Kontrollen. Dieser Effekt wurde der Beseitigung der Subpopulation von Thymus-abgeleiteten Lymphozyten (T-Zellen) zugeschrieben, die eine suppressive Funktion haben. Die aktuelle Reihe von Experimenten bezieht die erhöhte Antikörperreaktion auf SSS-II bei ALS-behandelten Mäusen auf eine erhöhte Hostresistenz nach Infektion mit Streptococcus pneumoniae, Typ III (Pn-II). Die 50-prozentige tödliche Dosis von Pn-III bei nicht immunisierten Mäusen betrug 102 und die 100-prozentige tödliche Dosis betrug 103 Organismen. Mäuse, die mit 0,5 Schuppen von SSS-III immunisiert wurden und 5 Tage später mit Pn-III herausgefordert wurden, wurden vollständig gegen eine Dosis von bis zu 108 Organismen geschützt. Mäuse, die mit 0,25 ml ALS an den Tagen -1, 0 und 1 behandelt wurden, die am Tag 0 mit SSS-III geimpft wurden und am Tag 5 mit 2,5 x 10(9) Pn-III herausgefordert wurden, hatten eine durchschnittliche Überlebenszeit von mehr als 100 h im Vergleich zu 16 h für immunisierte nicht-serumbehandelte Kontrollen. Tiere, die vor der Immunisierung eine einzige Injektion von ALS erhielten, zeigten keine Erhöhung der Resistenz, während Mäuse, die nach der Immunisierung behandelt wurden, eine signifikante Verlängerung der Überlebenszeiten zeigten. Unbehandelte, immunisierte Mäuse, die mit 5 X 10(9), 1 X 5 X 10(8) Pn-II herausgefordert wurden, überlebten 14 bis 19 Stunden, während ALS-behandelte Tiere durchschnittliche Überlebenszeiten von 48, 174 und 222 Stunden hatten. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass immunoregulatorische T-Zellen eine biologisch signifikante Wirkung in einer engen Zone haben können, in der die normale Immunantwort des Gastgebers unzureichend ist, aber immer noch potenziell in der Lage ist, einen gewissen zusätzlichen Grad des Schutzes zu bieten, wenn Unterdrückerzellen eliminiert werden.
[Vergangene und gegenwärtige Aspekte von Diarrhoe-Erkrankungen in der Kindheit. Klinische Studie und Behandlung (Autor's transl)]. Die im ersten Teil dieses Artikels beschriebenen ätiologischen und pathophysiologischen Erkenntnisse haben wichtige Konsequenzen: Die Erkennung der spezifischen Ätiologie von Durchfall erfordert neue Labormethoden: Die meisten davon sind jedoch technisch leicht durchzuführen und erfordern kein großes Labor. Eine langfristige Folge dieses veränderten Konzepts ist eine fundierte Änderung der Therapie. Die wichtigste Entdeckung war, dass in einer gut ausgewogenen Glukose-Elektrolytlösung Natrium und Glukose ihre Absorption gegenseitig verbessern und die Absorption von Wasser durch Lösungsmittelziehen erhöhen. Da bei den meisten akuten Durchfall die Mechanismen der Absorption von Glukose und Elektrolyten beibehalten werden, kann dieser Mechanismus für die schnelle orale Rehydrierung und Wiederherstellung der normalen Darmhomöostase eingesetzt werden. Die sofortige Einführung einer Diät, die aus der zuvor erwähnten Glucose-Elektrolytlösung besteht, verhindert in der Regel schwere Dehydrierung und die Notwendigkeit einer stationären Behandlung. Die Beseitigung von Laktose und langkettigen Fettsäuren aus der Ernährung verhindert die Fortsetzung der pathologischen osmotischen und chemischen Zustände im Darm. Antibiotika sind bei akuter Durchfall nicht indiziert, mit Ausnahme von Durchfall, der durch enteroinvasive E. Coli oder Shigella verursacht wird, im Falle von Salmonella-Gastroenteritis sogar kontraindiziert. Weitere Forschungen konzentrieren sich auf die Entwicklung von Medikamenten zur Neutralisierung von E. coli Enterotoxin und die Vorbeugung von Durchfall durch die Entwicklung wirksamer Impfstoffe.
Bevölkerungswachstum – eine Bedrohung für was? Ursprünglich hatten viele der Initiatoren der Weltbevölkerungskonferenz, die 1974 in Bukarest stattfand, gehofft, dass die Konferenz einen endgültigen Durchbruch für die Ansicht bedeuten würde, dass Familienplanungsmaßnahmen in allen weniger entwickelten Ländern oberste Priorität haben sollten. In der Tat enthält der von der Konferenz verabschiedete Aktionsplan jedoch sehr wenig, was sich auf Bevölkerung und Familienplanung bezieht. Stattdessen wird das Dokument von wörtlichen Sätzen über die Notwendigkeit der sozialen und wirtschaftlichen Entwicklung in diesen Ländern beherrscht. Wird die Erkenntnis, dass Familienplanungsprogramme nur dann effizient funktionieren, wenn sie ein integraler Bestandteil von Programmen für die soziale und wirtschaftliche Entwicklung eines Landes sind, dazu führen, dass solche Programme verwirklicht werden? Es gibt jeden Grund zu zweifeln, dass der Aktionsplan eine solche Wirkung haben wird. Die Gründe für die Unterentwicklung der Länder der Dritten Welt können nicht durch solche Resolutionen der Vereinten Nationen beseitigt werden. In der Volksrepublik China ist Familienplanung weit verbreitet, vor allem in den Städten, und jetzt auch unter der ländlichen Bevölkerung. Die Begrenzung der Zahl der Kinder gilt als Bestandteil chinesischer Entwicklungsmaßnahmen. China ist ein weniger entwickeltes Land, das sich in einem Prozess der raschen sozialen und wirtschaftlichen Entwicklung befindet. Die Frage, die in anderen Ländern der Dritten Welt auf dem Spiel steht, ist, wie eine ähnliche Entwicklung erzielt werden kann. Sobald dieses Ziel erreicht ist, sind Familienplanungsmaßnahmen sinnvoll und haben eine Chance auf Erfolg. Die Erfahrung Chinas zeigt, dass es auch dort eine Weile gedauert hat, bis die Bemühungen erfolgreich waren. Es gibt viele Länder der Dritten Welt, die ohne große Schwierigkeiten eine Bevölkerung unterstützen könnten, die wesentlich größer ist als die heutige. Aber es gibt zweifellos auch eine Reihe von Ländern, in denen die Bevölkerung bereits so groß ist, dass ein weiterer Bevölkerungsanstieg schädlich wäre. Die Notwendigkeit einer raschen Entwicklung wird zunehmend dringend, nicht zuletzt, um ein reduziertes Bevölkerungswachstum zu ermöglichen. Die traurige Wahrheit ist, dass in diesen Ländern so wenig Entwicklung stattfindet. Ohne soziale und wirtschaftliche Entwicklung wird der aktuelle rasante Bevölkerungswachstum in den Ländern, in denen es bereits eine übermäßig dichte Bevölkerung gibt, fortgesetzt.
Ausbildung des nackten Arztes in der Volksrepublik China: von der Prävention bis zum Heildienst. Unter den Veränderungen, die in der Gesundheitsversorgung in der Volksrepublik China eingeführt wurden, war die Einführung des nackten Arztes eine der wichtigsten und wirksamsten Möglichkeiten, die die Regierung entwickelt hat, um das Konzept der Gesundheitsversorgung radikal zu verändern. Durch die enge Identifizierung mit der Gemeinschaft in Bezug auf Rekrutierung, Ausbildung und Praxis ist der barfußarzt eine konkrete Manifestation der ideologischen Prinzipien, der Massenlinie zu folgen und selbstbewusst zu sein. Das Papier konzentriert sich auf den Aufbau ländlicher Gesundheitsdienste, mit besonderer Bezugnahme auf die Ausbildung des nackten Arztes als erste Ansprechperson in der Grundversorgung in den Gemeinden. Es beschreibt die Ausbildungsprogramme in einer Schule der öffentlichen Gesundheit und die Karriere-Mobilität möglich für den nackten Arzt in den Reihen der medizinischen Praktiker.
Wirkung des Beta-Rezeptorblockers Visken auf die Wirkung von Cumarin. In einer doppelblinden Studie wurde der Einfluss von Visken auf die Wirkung der antikoagulanten Therapie mit Marcoumar untersucht. Im Vergleich zu einer Placebo-Gruppe konnte weder ein Einfluss auf die Quick-Zeit noch eine erhöhte Tendenz zur Blutung nachgewiesen werden.
Untersuchungen der Ausscheidung von Gamma-Glutamil-Transpeptidase in den Urin. Die Ausscheidung des Enzyms gamma-glutamil-transpeptidase und seiner Isoenzyme in den Urin wurde bei Patienten mit Nierenerkrankungen untersucht und mit der Ausscheidung der Enzyme Leucin-Aminopeptidase und Laktat-Dehydrogenase verglichen. In Tierversuchen wurde eine erhöhte Ausscheidung dieser Enzyme nach der Autotransplantation festgestellt. Eine erhöhte Ausscheidung von Gamma-Glutamil-Transpeptidase wurde auch bei Patienten mit Glomerulonephritis und in der polyurischen Phase der akuten tubulären Nekrose beobachtet, jedoch nicht bei Pyelonephritis und in der oligurischen Phase der akuten tubulären Nekrose. Die Veränderungen des Isoenzymmusters bei Erkrankungen mit erhöhter Enzymsekretion entsprechen der Hypothese, dass die Enzyme aus dem Nierengewebe in den Urin freigesetzt werden und nur eine Minderheit aus dem Blut stammt. Die Untersuchung der Ausscheidung von Gamma-Glutamil-Transpeptidase und ihren Isoenzymen im Urin scheint sowohl wissenschaftlich als auch klinisch von Interesse zu sein.
Interaktion von adrenergen Antagonisten mit Prostaglandin E2 und Tetrahydrocannabinol im Auge. Sowohl alpha- als auch beta-adrenerge Antagonisten wurden in einem Versuch verwendet, den Wirkungsort von Prostaglandin (PG) und Tetrahydrocannabinol (THC) im Auge zu unterscheiden. Sowohl alpha- als auch beta-adrenerge Antagonisten (Alpha-Antagonisten, Phentolamin und Phenoxybenzamin; Beta-Antagonisten, Propranolol und Sotalol) führten zu einer dosisabhängigen Senkung des Augeninnendrucks und des Blutdrucks und zu einer erhöhten Gesamtabflussfähigkeit. Die Ergebnisse stimmen mit dem Konzept überein, dass sowohl alpha- als auch beta-adrenerge Rezeptoren in der vorderen Uvea vorhanden sind und dass der vasomotorische Ton für die Aufrechterhaltung eines normalen Augeninnendrucks unerlässlich ist. Kein Antagonist reduzierte die PG-induzierte Erhöhung des Augeninnendrucks, es sei denn, der Blutdruck wurde stark gesenkt. Alle Antagonisten hemmen den normalen PG-induzierten Anstieg der Gesamtabflussanlage, was darauf hinweist, dass diese Wirkstoffe die Blut-Wasserbarriere vor dem Zerfall schützen, ohne die vasodilatorische Reaktion auf PG zu verändern. Alle Antagonisten reduzierten den Rückgang des von THC produzierten Augeninnendrucks um etwa 50 Prozent, mit Ausnahme von Sotalol, das den Rückgang des Augeninnendrucks vollständig aufgehoben hat. Nur die alpha-adrenergen Antagonisten verhinderten die THC-induzierte Erhöhung der Gesamtabflussanlage. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass die wahre Ausflussanlage möglicherweise ausschließlich durch Alpha-Rezeptoren reguliert wird. Die Daten stimmen mit der Wirkung von THC überein, da es sich in erster Linie um eine Vasodilation der efferenten Blutgefäße der vorderen Uvea handelt. Die teilweise Hemmung durch alpha-adrenerge Antagonisten kann auch auf eine geringere Rolle von THC in den afferenten Gefäßen hindeuten.
Induktion der Abstoßung des Hornhauttransplantats durch passive Zelltransfer. Ein experimentelles Modell wird vorgestellt, das zeigt, dass penetrierende Hornhauttransplantate beim Kaninchen durch passive Übertragung in die Vorderkammer von spezifisch sensitierten Lymphzellen abgelehnt werden können. Die Zerstörung des histo-inkompatiblen Hornhautendotheliums ist immer durch die Bildung von fokalen Taschenähnlichen Schädigungsgebieten in diesem System gekennzeichnet, anstatt durch die typische bewegliche Linie der Abstoßung des Endotheliums, die normalerweise in der spontanen Transplantationsabstoßung zu sehen ist. Wo die übertragenen lymphatischen Zellen mit den Geweben des Transplantationsempfängers kompatibel sind, ist das Bild eines schwer betroffenen Transplantats auf einem Feld des nicht beteiligten Empfänger Hornhautendotheliums. Wo die lymphatischen Zellen mit dem Transplantat und nicht mit den Geweben des Empfängers kompatibel sind, sieht man ein klares Hornhauttransplantat, das auf einem Feld der endothelialen Zerstörung am Empfängerbett überlebt. Die Spezifität dieser Reaktionen wird in Bezug auf die Histokompatibilitätsbeziehungen zwischen Hornhautspender, Transplantatempfänger und Spender der empfindlichen lymphatischen Zellen illustriert.
akute tubuläre Nekrose. Ein experimentelles Modell, das die biochemischen Ereignisse beschreibt, die Nierenschäden und Genesung begleiten. Männliche Charles River Mäuse, in Kontroll- oder experimentelle Gruppen unterteilt, erhielten am Tag 0 entweder sterile 0,3 MNaHCO3 in 0,9 Prozent Salz (pH7.4) intraperitoneale Injektion oder pteroylglutamische Säure (200 Schuppen pro Körpergewicht), ähnlich auf pH7.6 buffert und wurden am Tage 0, 1/4, 1/2, 1,2, 3,4,7 und 14 geopfert. Die experimentellen Nieren zeigten intratubuläre Ablagerungen von pteroylglutamischer Säure mit Ödem zwischen Tag 1 und 4 mit kortikaler Narbenbildung am Tag 14. Die experimentellen Nieren erreichten maximale Gewichtszunahme (+90 Prozent) am 2. Tag, RNA (+61 Prozent, Protein (+67 Prozent) am 3. Tag und DNA (+25 Prozent) am 4. Tag, bevor sie am 14. Tag unter die Kontrolle fielen. Die kontrollierten Nieren zeigten die allmähliche incrementelle Zunahme des normalen Nierenwachstums während dieser Zeit. Keine Veränderung der Nierengröße, des Proteins, der RNA oder der DNA konnte bei den Tieren nachgewiesen werden, die keine Nierentubuläre Schädigung nachweisen konnten. Es wird postuliert, dass die Reaktion der Nieren auf die Verabreichung von Folsäure eine reparative Reaktion ist und nicht eine Reaktion, die auf ein beschleunigtes Nierenwachstum gerichtet ist.
Eigenschaften des 3-o-Methyl-D-Glucose-Transportsystems in Acholeplasma laidlawii. Der Transport von 3-O-Methyl-D-Glucose (3-O-MG) durch Acholeplasma laidlawii Zellen wurde untersucht. Das 3-O-MG-Transportsystem schien in Zellen, die auf 3-O-MG und Glukose gezüchtet wurden, konstitutiv zu sein; der Transportprozess hängt von der Konzentration des verwendeten Substrats ab und zeigte typische Sättigungskinetik mit einem offensichtlichen Km von 4,6 muM. 3-O-MG wurde als freier Kohlenhydrat transportiert und wurde nicht weiter in der Zelle metabolisiert. Die Abhängigkeit von pH und Temperatur und die Ergebnisse von Ausfluss- und "Counterflow" -Experimenten zeigten den Trägercharakter des Transportsystems. 6-Deoxyglucose und Glukose hemmen wettbewerbsfähig den 3-O-MG-Transport, während Maltose nicht wettbewerbsfähig hemmt. p-Chloromercuribenzoat, p-Chloromercuribenzensulfonat, N-Ethylmaleimid und Iodoacetat hemmen den Transport von 3-O-MG. Die Zellen konnten 3-O-MG gegen einen Konzentrationsgradienten ansammeln. Einige Elektronentransferhemmer (Rotenon und Amytal), Arsenat, Dicyclohexylcarbodiimide und Protonleitungen wie 2,4-Dinitrophenol, Carbonylcyanid, M-Chlorophenylhydrazon, Pentachlorophenol und Tetrachlorotrifluoromethylbenzimidazol hemmten diesen Prozess.
Überleben von Salmonella enteritidis. Waschte Zellen von Salmonella enteritidis, die während des logarithmischen Wachstums aus einem definierten Medium geerntet wurden, wurden bei pH 7 Phosphatpuffer bei 37 ° C verhungert. Die Überlebensdauer von Zellsuspensionen, die 1 bis 10 mg (trocken wt)/ml entsprechen, wurde durch kryptisches Wachstum beeinflusst. Die Geschwindigkeit des kryptischen Wachstums, bewertet durch Plattenzahlen, stieg mit der Zelldichte und konnte nicht durch Hunger mit Dialyse gelindert werden. Die Dialyse der verhungernden Kultur verlangsamte zwar den Beginn des kryptischen Wachstums, beseitigte es aber nicht, was darauf hindeutet, dass die wichtigsten Substrate für das Wiederaufwachsen relativ große zelluläre Komponenten waren. Im Phosphatpuffer erlaubten 6,7 homologe thermisch getötete Zellen die Verdoppelung einer S. enteritidis-Zelle. Kryptisches Wachstum wurde nicht beobachtet, wenn Zellen auf der Oberfläche von Membranfiltern oder in Suspensionen von 20 Mücken (trockenem Wt)/ml (105 Zellen/ml) verhungert wurden. Ähnliche Halbwertszeiten wurden für beide Populationen berechnet, aber die Form ihrer Überlebenskurven unterschied sich signifikant. Diese Unterschiede wurden Stressfaktoren zugeschrieben, die während der Zellvorbereitung und während des Hungers aufgetreten sind. Die Halbwertszeit von S. enteritidis verhungert bei 20 mug (trocken wt)/ml betrug 140 h in Phosphatpuffer, 82 h in 3,6-endomethylene-1,2,3,-6-tetrahydrophthalic Säurepuffer und 77 h in tris(hydroxymethyl)aminomethanepuffer.
Mismatch-Korrektur bei Pneumokokkentransformation: Spenderlänge und hexabhängige Marker-Effizienz. Eine Hypothese, dass die bevorzugte Ablehnung von Spendermarkern durch das Hexensystem von Pneumokokken auf tödliche Doppelstrangbrüche zurückzuführen ist, wurde in Bezug auf seine Auswirkungen auf den Umfang der erforderlichen Excision untersucht. Experimente, die hier berichtet wurden, waren darauf ausgerichtet, zu fragen, ob die hexabhängige Marker-Effizienz von der Länge der Spender-Deoxyribonukleinsäure (DNA) abhängt. In Abwesenheit eines intrazellulären Wettbewerbs für die Hexfunktion gab es keine nachweisbare Wirkung der DNA-Größe auf die hexabhängige Marker-Effizienz, da die Spender-DNA von mehr als 1 x 107 Daltons auf 3,6 x 105 Daltons geschnitten wurde. Die letztere DNA wurde durch zwei aufeinanderfolgende Geschwindigkeitsfraktionen gereinigt, um sicherzustellen, dass die beobachtete Aktivität repräsentativ für DNA dieser Größe war. Quantitative Untersuchung des Systems zeigt, dass, um die Hypothese des tödlichen Ereignisses wahr zu sein, der Ausscheidungsschritt durchschnittlich 7.000 bis 10.000 Nukleotide entfernen muss. Diese Zahl ist so viel größer als die in anderen Excision-Prozessen zu sehen, dass alternative Hypothesen berücksichtigt werden sollten. Die derzeit bekannten Eigenschaften des Hexensystems können durch ein Modell erklärt werden, das auf die Migrationsmerkmale von Typ I Restriktionsenzymen beruht.
Mikrokalorimetrische Untersuchung des anaeroben Wachstums von Escherichia coli: Wachstumsthermogramm in einem synthetischen Medium. Eine mikrokalorimetrische Technik wurde verwendet, um das Wachstum von Escherichia coli während der Anaerobiose zu untersuchen. Die erhaltenen Wachstums-Thermogramme sind komplex und die Form der Kurven hängt von der Wasserstoffliaseaktivität der Zellen ab. Fermentationsbilanzen werden für verschiedene Kulturbedingungen gegeben, und einfache Wachstums-Thermogramms werden erhalten, wenn die Wasserstoffliase-Aktivität hemmt.
Physiologische Studie von Ergot: Induktion der Alkaloid-Synthese durch Tryptophan auf der enzymatischen Ebene. Die Erhöhung der Ergot-Alkaloid-Produktion durch Tryptophan und seine Analoga in normalen und hochphosphatischen Kulturen ist mehr direkt mit einer erhöhten Dimethylallyltryptophan-Synthetase-Aktivität (DMAT) verbunden als mit einer fehlenden Regulierung der tryptophan-biosynthetischen Enzyme. Thiotryptophan [beta-(1-benzo-thien-3-yl)-Alanin] ist eher ineffektiv bei der Endproduktregulierung der Tryptophan-Biosynthese, während Tryptophan und 5-Methyltryptophan potente Effektoren sind. Das Vorhandensein von erhöhten DMAT-Synthetasen in Ergotkulturen, die mit Tryptophan oder Thiotryptophan ergänzt wurden, und in geringerem Maße mit 5-Methyltryptophan, deutet darauf hin, dass die Induktionseffekt de novo Synthese des Enzyms beinhaltet. Thiotryptophan und Tryptophan, aber nicht 5-Methyltryptophan können den Block der Alkaloid-Synthese durch anorganisches Phosphat überwinden. Die Ergebnisse mit Thiotryptophan deuten darauf hin, dass die Phosphatwirkung nicht bloß auf der Grundlage eines Blocks der Tryptophan-Synthese erklärt werden kann.
Mikrokalorimetrische Untersuchung des anaeroben Wachstums von Escherichia coli: Messungen der Affinität von ganzen Zellen zu verschiedenen Energiesubstraten. Mikrokalorimetrie wurde verwendet, um die Affinität von ganzen Zellen von Escherichia coli für Glukose, Galaktose, Fruktose und Laktose zu bestimmen. Anaerobe Wachstumsthermogramme wurden analysiert, und die Km- und Vmax-Werte für diese Energiesubstraten wurden bei pH 7,8 gemessen. Ergebnisse, die mit dieser Technik mit verschiedenen Organismen, die anaerob auf verschiedenen Zuckern wachsen, erhalten wurden, werden verglichen. Dieser Vergleich zeigt, dass in praktisch allen Fällen die Zellrate der katabolischen Aktivität eine hyperbolische Funktion der Energiesubstratkonzentrationen bei niedrigen Zuckerkonzentrationen ist. In einigen Fällen ermöglicht diese Technik auch die Bestimmung der Kinetik bei hohen Zuckerkonzentrationen.
Reinigung und Eigenschaften der Polyoldehydrogenase aus Cephalosporium chrysogenus. Eine Polyoldehydrogenase von breiter Spezifität wurde 178-fach aus Extrakten des filamentösen Pilzes Cephalosporium chrysogenum gereinigt. Es wurde festgestellt, dass das Enzym als Oxido-Reduktase in zwei Substrat-Coenzym-Systemen wirkt: D-Sorbitol (oder Xylitol)-Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid (NAD) und D-Mannitol-Nicotinamid-Adenin-Dinukleotidphosphat (NADP). Die Dehydrogenase bestand aus fünf Isozymen, die als Mischung diese Eigenschaften aufwiesen: Km bis D-Sorbitol und D-mannitol, 7,15 bis 10(-2) M; PH optimum, 9 bis 10; Molekulargewicht, 300.000 Untereinheiten Gewicht, 29.000; PI, 5,8 bis 7,5. Die mit NADP verknüpfte Aktivität war für die Behandlung mit Hitze oder Ethylenediaminetrazätsäure geeignet. Gemischte Substratanalysen unterstützen die Hypothese, dass sowohl NAD-, als auch NADP-bezogene Aktivitäten mit Isozymen einer einzelnen Dehydrogenase assoziiert sind.
Wirkung von Alkali auf die Struktur der Zellumschläge von Chlamydia psittaci elementaren Körpern. Suspensionen von isolierten Zellumschlägen von infektiösen Elementarkörpern (EB) von Chlamydia psittaci bei alkalischem pH zeigten eine schnelle, weitreichende Abnahme der Absorption, begleitet von der Freisetzung einer Zellumschlagkomponente in einer sedimentären Form. Dieses Phänomen wurde sowohl bei 0 °C als auch bei Umschlägen beobachtet, die zuvor auf 100 °C erhitzt worden waren. monovalente und divalente Kationen hemmten effektiv den Turbiditätsverlust, während Ethylenediaminetetraacetat (EDTA) eine beschleunigte Abnahme der Turbidität verursachte. Der nach der Inkubation der Umschläge bei alkalischem pH beobachtete Turbiditätsverlust könnte durch Dialyse gegen destilliertes Wasser mit Mg2+ auf das Niveau des Ausgangswerts umgekehrt werden. Thin-Section-Elektron-Photomikrografen von gereinigtem EB, der alkalischem Puffer mit EDTA ausgesetzt war, zeigten den Verlust des inneren Inhalts der Zellen, aber diese Zellen behielten immer noch ihre runde Form. Die Zelloberfläche der behandelten EB erschien in negativ gefärbten Zubereitungen gefärbt, während intakte EB eine glatte Oberfläche hatte. Elektronmikroskopische Studien auf negativ gefärbten Präparaten des klaren Supernatants, die nach der Behandlung des Umschlages mit alkalischem Puffer mit EDTA erhalten wurden, zeigten das Vorhandensein von kugelförmigen Partikeln mit einem Durchmesser von etwa 6 bis 7 nm und stachelartigen Partikeln, die aus zwei oder mehr kugelförmigen Partikeln bestehen schienen.
Protein-Kohlenhydrat-Lipid-Komplex aus den Zellumschlägen von Chlamydia psittaci in alkalischem Puffer und Ethylenediaminetetraacetat isoliert. Die Exposition von isolierten Zellumschlägen aus reinigtem infektiösem Elementar (EB) von Chlamydia psittaci gegenüber dem Natriumkarbonat-Bicarbonat-Buffer bei pH 10 plus Ethylenediaminetetraacetat (EDTA) führt zu einer teilweisen Auflösung des Gesamtproteins. Die freigesetzten Materialien repräsentieren 20% des trockenen Gewichts, 16% des Gesamtproteins, 40% des Gesamtkohlenhydrates und 9% des Gesamtlipids der Zellumschläge. Die Saccharose-Dichte-Gradient-Zentrifugation und die Sephadex G-200, Sepharose 4B oder die Diethylaminoethyl-Cellulose-Spaltenchromatographie zeigen einen Protein-Kohlenhydrat-Lipid-Komplex von mehreren hunderttausend Molekulargewicht, der 50% Protein enthält. Die Elektrophorese des natrium-dodecyl-sulfat-polyacrylamide-Gel der isolierten EB-Zellumschläge enthüllt zwei große Proteinbänder, A und B, mit geschätzten Molekularmassen von etwa 85.000 und 53,000, die beide auch Flecken für das Vorhandensein von Kohlenhydraten und Lipiden. Die Gel-Elektrophorese des Protein-Kohlenhydrat-Lipid-Komplexes zeigt zwei Proteinbänder, C und D, mit geschätzten Molekulargewichten von etwa 17.000 und 13.000, die Lipide und eine geringe Menge Kohlenhydrate enthalten; Bänder A und B sind im Komplex nicht vorhanden. Die Gel-Elektrophorese der Rückstände der Zellumhülle nach der Extraktion des Komplexes mit Alkali und EDTA zeigt eine einzige Hauptband, die der Position der Band B entspricht, die Eiweiß, Kohlenhydrate und Lipide enthält; Band A fehlt vollständig. B und A werden als Bestandteile des Komplexes angesehen, das auf alkalische Auflösung in zwei Untereinheiten aufgeteilt wird.
Reinigung und Eigenschaften von Beta-N-Acetylglucosaminidase aus Escherichia coli. Beta-N-Acetylglucosaminidase (EC 3.2.1.30) wurde von Escherichia coli K-12 zu nahe Homogenität auf der Grundlage von Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese sowohl in 0,5% Natrium-Dodecyl-Sulfat und in 6 M Urea bei pH 8.5 gereinigt. Das gereinigte Enzym zeigt einen pH-Optimum von 7,7 und der Km für p-nitrophenyl-beta-D-2-acetamido-2-deoxyglucopyranoside beträgt 0,43 mM. Das Molekulargewicht dieses Enzyms, das sowohl durch Sephadex-Gel-Filtration als auch durch Natrium-Dodecyl-Sulfat-Gel-Elektrophorese bestimmt wird, entspricht 36.000. Es ist ein lösliches cytoplasmatisches Enzym. Studien über die Substratspezifiten des gereinigten Enzyms deuten darauf hin, dass dieses Enzym eine Exo-Beta-N-Acetylglucosaminidase ist.
Säureprotease-Aktivität während der Keimung von Mikrozysten des Zellschleims Polysphondylium pallidum. Extrakte aus schlafenden Mikrozysten von Polysphondylium pallidum zeigen den optimalen pH-Wert für die Hydrolyse von Casein bei 3,5 und 6,0. Während der Keimung ändert sich der intrazelluläre pH 6,0 Caseinolytic-spezifische Aktivität nicht signifikant. Die pH 6,0 Protease ist auch auf azo-albumin aktiv, was das gleiche Entwicklungsmuster mit diesem Substrat zeigt. Beide Säureproteaseaktivitäten werden während des Keimprozesses ausgeschieden. Die Zugabe von gereinigter nicht-spezifischer Protease zu Kulturen beschleunigt die Keimung, was darauf hindeutet, dass die ausgeschiedenen Protease eine Rolle bei der Entfernung der Mikrozystwand spielen kann. Wenn Cycloheximid zu Kulturen hinzugefügt wird, wird die vollständige Keimung (Emergenz) gestoppt, während sich die pH 6,0 Proteaseaktivität immer noch zwischen 50 und 60% der maximalen Kontrollaktivität ansammelt. Obwohl dies darauf hindeutet, dass post-translational-Kontrollen die Anhäufung eines Teils des pH-Wertes von 6,0-Protease-Anstieg vermitteln könnten, Mischen und Verdünnen Experimente mit Zellextrakten zeigen nicht die Differentialpräsenz von löslichen Aktivatoren oder Inhibitoren dieser Aktivität in verschiedenen Entwicklungsstadien. Das Vorhandensein eng gebundener Enzym-Inhibitor-Komplexe für Protease B in schlafenden Mikrozysten wurde nicht ausgeschlossen und wird derzeit untersucht.
Veränderte Ernährungsanforderungen im Zusammenhang mit Mutationen, die die Strukturen der Ribonukleinsäure-Polymerase in Lactobacillus casei beeinflussen. Rifampin-resistente Mutanten wurden von Lactobacillus casei S1 isoliert und auf mögliche gleichzeitige Veränderung der Nährstoff-Eigenschaften untersucht. Von den 36 Mutanten, die entweder spontan oder nach der Mutagenese mit 2-Aminopurin erhalten wurden, wurden 22 in Bezug auf die spezifischen Wachstumsanforderungen verändert. Die Mehrheit (20 von 22) der letzteren Mutanten erwies sich als L-Glutamin zusätzlich zu den Nährstoffen, die der elterliche Stamm für das maximale Wachstum benötigte, während die übrigen Mutanten anscheinend den Bedarf an L-Aspartat verloren hatten. Weitere Studien mit einem der Glutamin-bedürftigen Mutanten zeigten, dass die Rifampin-Resistenz dieses Stammes auf die Resistenz der Ribonukleinsäure-Polymerase selbst zurückzuführen ist und dass eine einzige Mutation für sowohl die Rifampin-Resistenz als auch die Glutamin-Anforderung verantwortlich ist. Diese Ergebnisse deuten stark darauf hin, dass eine strukturelle Veränderung der Ribonukleinsäure-Polymerase durch die Rifampin-Resistenzmutation irgendwie den Glutaminstoffwechsel beeinflusst hat, möglicherweise durch Veränderung der selektiven Transkription der beteiligten Gene.
Zubereitungen und Eigenschaften von Ribonukleinsäure-Polymerase aus Acinetobacter calcoaceticus. Deoxyribonukleinsäure (DNA)-abhängige Ribonukleinsäure (RNA) Polymerase (EC 2.7.7.6) von Acinetobacter calcoaceticus wurde zu offensichtlicher Homogenität gereinigt und seine Eigenschaften mit denen des Enzyms Escherichia coli B verglichen. Die Molekulargewichte der beiden nativen aktiven Enzyme sowie ihrer Alpha- und Beta-Untereinheiten schienen ähnlich zu sein. Keine Untereinheit, die dem Sigma von E. coli entspricht, wurde gefunden, und darüber hinaus konnte keine Trennung zwischen den Beta-Untereinheiten durch Gel-Elektrophorese nachgewiesen werden. Eine Reihe verschiedener DNA wurden durch das Enzym von A. calcoaceticus transkribiert. Die maximale RNA-Synthese fand bei pH 8,7, 10 mM Mg2+ oder 0,3 mM Mn2+ und bei einer Gesamtionenstärke von 0,1 statt. Höhere ionische Stärken führten zu einer erhöhten Hemmung der Transkription und bei mu = 0,4 wurde eine vollständige Hemmung beobachtet. Der Mechanismus der Salzhemmung war nicht mit dem Initiationsereignis verbunden, wie es bei der T4-Kern-RNA-Polymerase beobachtet wurde (R.Kleppe, 1975). In einem Versuch, den Mechanismus der Hemmung durch Salz zu verstehen, wurde die Wirkung der Ionenstärke auf die Sedimentationseigenschaften des Enzyms untersucht. Bei niedriger Ionenstärke waren Enzymarten mit Sedimentationskoeffizienten s20,w, von 5,8S, 12,4S und 19,3S vorhanden. In Puffern mit höheren Ionenstärken verringerten sich die relativen Mengen der 12,4S-Arten. Es wird daher vorgeschlagen, dass die Hemmung der Aktivität bei höheren Salzkonzentrationen durch eine Abnahme der Konzentration der aktiven Enzymarten verursacht wird.
Urea-hydrolysierende Aktivität eines T-Stamm Mycoplasma: Ureaplasma urealyticum. Die Urea-hydrolysierende Aktivität eines T-Stamm-Mykoplasmas wurde in Experimenten mit ganzen Zellen und zellfreien Enzympräparaten untersucht, indem die Freisetzung von 14CO2 aus [14C]Urea gemessen wurde. Unter den verwendeten Bedingungen beträgt die optimale Harnstoffkonzentration etwa 5,6 x 10(-3) M Harnstoff. Die Aktivität ist löslich und nicht membranbunden. Es ist bei -70 ° C für mehrere Wochen stabil, ist aber bei höheren Temperaturen leichter. Der optimale pH-Wert liegt zwischen 5,0 und 6,0. Die Wirkung mehrerer Inhibitoren auf die Aktivität wurde getestet und ergab Ähnlichkeiten sowie Unterschiede zwischen der Aktivität von T-Stamm Mycoplasma Urease und der Ureaseaktivität anderer Organismen und Pflanzen.
Arginine Decarboxylase aus einer Pseudomonas-Spezies. Eine Arginin-Dekarboxylase wurde von einer Pseudomonas-Spezies isoliert. Das Enzym ist konstitutiv und schien nicht durch eine Vielzahl von Kohlenstoffquellen unterdrückt zu werden. Nach einer ungefähr 40-fachen Reinigung erschien das Enzym in seinen Eigenschaften der biosynthetischen Arginin-Decarboxylase von Escherichia coli ähnlicher als dem induzierbaren (biodegradierenden) Enzym von E. coli. Die Pseudomonas Arginin Decarboxylase zeigte einen optimalen pH-Wert von 8,1 und einen absoluten Bedarf an Mg2+ und Pyridoxalphosphat und wurde bei niedrigeren Mg2+-Konzentrationen durch die Polyaminen Putrescin, Spermidin und Cadaverin signifikant gehemmt. Der Km für L-Arginin betrug bei pH 8,1 und 7,2 etwa 0,25 mM. Das Enzym wurde vollständig durch P-Chloromercuribenzoat gehemmt. Die Hemmung wurde durch Dithiothreitol verhindert, ein Merkmal, das die Beteiligung einer -SH-Gruppe vorschlägt. Von einer Vielzahl von getesteten Aminosäuren wurden nur L-Arginin, aber nicht D-Arginin dekarboxyliert. D-Arginin war ein starker Inhibitor der Arginin-Dekarboxylase mit einem Ki von 3,2 muM.
Depression bestimmter aromatischer Aminosäuren biosynthetische Enzyme von Escherichia coli K-12 durch Wachstum in Fe3+-mangelnden Medium. 3-Deoxy-arabino-heptulosonic Säure 7-Phosphat-Synthase, Prephenat-Dehydratase, Tryptophan-Synthase und 2,3-Dihydroxybenzoylserin-Synthase-Enzymaktivitäten werden in Wild-Typ Escherichia coli K-12-Zellen, die auf Fe3+-mangelnden Medium gezüchtet werden, derepressed. Diese Drepression wird umgekehrt, wenn FeSO4 dem Wachstumsmedium hinzugefügt wird. Die Hinzufügung von Shikimic-Säure zum Fe3+-defizierten Wachstumsmedium verursachte eine Unterdrückung der ersten drei Enzymaktivitäten, aber nicht der 2,3-Dihydroxybenzoylserinsynthase-Aktivität. Die Zugabe von 2,3-Dihydroxybenzoinsäure zum Fe3+-mangelnden Wachstumsmedium wirkt sich nicht auf die oben genannten Enzymaktivitäten aus. Die Fe3+-Mangel-vermittelte Depression der 3-Deoxyarabino-Heptulosonsäure 7-Phosphat-Synthase-Aktivität ist auf eine Erhöhung des tyrosin-empfindlichen Isoenzyms zurückzuführen; das phenylalanin-empfindliche Isoenzym wird unter diesen Bedingungen nicht deprimiert.
Kontrolle der Differenzierung bei Streptomyceten: Beteiligung von extrachromosomaler Deoxyribonukleinsäure und Glucoseunterdrückung bei der Entwicklung von Myzelien in der Luft. Als Streptomyces alboniger-Sporen in Hickey-Tresner-Suppe mit 5 mM Ethidiumbromid angebaut wurden, wurde eine hohe Häufigkeit dauerhaft geheiler mycelia-negativer (am-) Kolonien in der Luft wiederhergestellt. Das Auftreten einer Kolonie war zeitabhängig: eine sehr niedrige Frequenz (0,3%) bei Nullzeit, ein Maximum (9 bis 21%) nach 2 bis 5 Tagen des Wachstums und ein Rückgang wieder zu niedrigen Frequenzen später im Wachstumszyklus. Auf agar produzierten geheilte am-kolonien von s. alboniger immer noch puromycin. Die Entwicklung von Aerial Mycelia bei S. alboniger, S. scabies und S. coelicolor war auch empfindlich auf die Glukoseunterdrückung. Kolonien auf Hickey-Tresner-Agar, die 2% Glukose enthielten, blieben phenotypisch am- während der Beobachtungszeit. Adenin (2.5 mM oder mehr) und in geringerem Maße Adenosin und Guanosin, speziell umgekehrt die Unterdrückung. Die Anhäufung von ungesonderten organischen Säuren scheint an der Glukoseunterdrückung der Luftmyzelienbildung beteiligt zu sein. Dies scheint jedoch bei der Produktion von Puromycin in S. alboniger nicht der Fall zu sein; Glukoseunterdrückung wurde im pH-Bereich von 5.0 bis 7,5 beobachtet.
Serumstimulation der Aufnahme von Phosphat in 3T3-Zellen. Die Stimulation durch Kalkserum der Phosphataufnahme in 3T3-Zellen resultiert aus einer Änderung der maximalen Geschwindigkeit des Transportprozesses ohne Änderung der Michaelis-Konstante. Nur Arsenat unter einer Reihe anorganischer struktureller Analoga von Phosphat hemmte die Phosphataufnahme, was auf eine hohe Spezifität für den Prozess hinweist. Die Arsenat-Hemmung war von Natur aus wettbewerbsfähig. Papaverin, Theophyllin und Protaglandin E1, Medikamente, die dafür bekannt sind, hohe intrazelluläre CAMP-Werte aufrechtzuerhalten, hatten wenig Wirkung auf die serumstimulierte Phosphataufnahme. Der Phosphataufnahme stimulierende Faktor(en) im Serum konnte von den 3T3-Zellüberlebens- und Migrationsfaktoren durch Stabilitätsmerkmale unterschieden werden, aber dieser Faktor(en) konnte nicht vollständig von einer Uridinaufnahme stimulierenden Aktivität oder Wachstumsfördernden Aktivität durch eine Vielzahl von Serumfraktionierungsverfahren getrennt werden. Nur teilweise Stimulation des Aufnahmeprozesses wurde mit einer einzelnen Serumfraktion erreicht, die darauf hindeutet, dass eine Vielzahl von Serumkomponenten wahrscheinlich an diesem Prozess beteiligt ist. Aufgrund der Geschwindigkeit der Serumaktivierung der Phosphataufnahme und ihrer offensichtlichen Unabhängigkeit von den intrazellulären zyklischen Nukleotidspiegeln wird vorgeschlagen, dass Serumfaktoren die Phosphataufnahme stimulieren können, indem sie strukturelle Veränderungen im Phosphatträger-System hervorrufen.
Dinoflagellate Biolumineszenz: eine vergleichende Studie der Invitro-Komponenten. In vitro wurden die Biolumineszenzkomponenten der Dinoflagellate Gonyaulax polyedra, G. tamarensis, Dissodinium lunual und Pyrocystis noctiluca untersucht. Die Luziferasen und Luziferine der vier Arten kreuzreagieren in allen Kombinationen. Alle diese Arten besitzen hochmolekulare Luziferasen (200.000 bis 400.000 Daltonen) mit ähnlichen pH-Aktivitätsprofilen. Die aktiven einzelnen Ketten von Luziferasen der Gonyaulax-Arten haben eine MW von 130.000, während diejenigen von P. noctiluca und D. lunula eine MW von 60.000 haben. Die Aktivität der extrahierbaren Luziferase variiert mit der Tageszeit bei den beiden Gonyaulax-Arten, aber nicht bei den anderen beiden. Ein Luciferin-bindendes Protein (LBP) kann leicht aus den beiden Gonyaulax-Arten (MW ca. 120.000 Daltons) extrahiert werden, aber keines konnte in Extrakten von D. lunula oder P. noctiluca nachgewiesen werden. Scintillons können aus allen vier Arten extrahiert werden, aber sie variieren in der Dichte und dem Grad, in dem die Aktivität durch Hinzufügen von Luciferin erhöht werden kann. Obwohl die Biochemie der Biolumineszenz in diesen Dinoflagellaten im Allgemeinen ähnlich ist, die Beobachtungen, dass D. lunula und P. noctiluca scheinbar LBP fehlen und Luciferasen mit niedrigen MW Einzelketten haben, erfordern weitere Klärung.
Wirkung von lumbaler sympathischer Blockade und chlorpromazin-induzierter adrenerger Alpha-Rezeptor-Blockade auf die Hauttemperatur bei peripheren Arterienerkrankungen. Die Temperaturänderungen nach der Abkühlung der Zehen nach einer lumbalen sympathischen Blockade und nach der intramuskulären Verabreichung eines adrenergen Alpha-Rezeptorblocks (Chlorpromazin) wurden bei 14 Patienten mit bevorstehender Gangrän infolge peripherer arterieller Insuffizienz untersucht. Der Temperaturanstieg nach der Abkühlung war nach sympathischer Blockade und Chlorpromazin-Verabreichung ähnlich und unterscheidet sich signifikant von den Basaltemperaturänderungen nach der Abkühlung. Es wird geschlossen, dass die Verabreichung eines adrenergen Alpha-Rezeptor-Blockers bei Patienten mit arterieller Erkrankung genauso gut ist wie die lumbale sympathische Blockade bei der Beurteilung eines verbleibenden sympathischen vasomotorischen Tonus.
Kontrolle der Phenylalanin-Hydroxylase-Synthese in der Gewebekultur durch Serum und Insulin. Stationäre Phase, minimale Abweichung Hepatom H4-II-E-C3 Zellkulturen, die Serum-entbehrt reagieren mit einem biphasischen Zeitverlauf der Phenylalanin-Hydroxylase-Induktion, wenn dialysiertes fetales Kalfserum oder Insulin hinzugefügt wird. Diese beiden Wirkstoffe induzieren Phenylalanin-Hydroxylase additiv, sowohl während der ersten 3-Stunden- als auch der verzögerten 24-Stunden-Phasen. Die anfängliche Phase der Induktion durch Insulin wird durch Cycloheximid, aber nicht durch Actinomycin D. Die verzögerte Induktion sowohl durch dialysiertes fetales Kalfserum als auch durch Insulin wird durch 10(-6) M Cycloheximid und 0,20 mug/ml Actinomycin D. H4-II-E-C3-Zellen in der Kultur synthetisieren den Faktor(en) im Serum nicht, der Phenylalanin-Hydroxylase induziert.
Hochgeschwindigkeits-Ionenpaar-Partitionskromatographie in der pharmazeutischen Analyse. Die Ionen-Paar-Chromatographie bietet attraktive Möglichkeiten in der pharmazeutischen Analyse. Die Spezifität der Trennsysteme kann über ein breites Spektrum hinweg durch geeignete Auswahl der stationären Phase variiert werden. Die Wahl eines geeigneten Gegenionen kann auch die Detektionsgrenze drastisch verbessern, was die Bestimmung von Arzneimitteln in niedriger Dosierung und möglicherweise von Nebenprodukten oder Abbauprodukten ermöglicht. Die Ionen-Paar-Chromatographie der Tropan- und Ergot-Alkaloide wurde unter Verwendung von Picrat als Gegen-Ionen untersucht. Alumina, Kieselguhr und verschiedene Arten von Silica-Gel wurden als Stütze getestet. Die in einem Batchverfahren untersuchten Partitionseigenschaften wurden mit den tatsächlichen chromatographischen Bedingungen verglichen. Spalten (10 cm) gefüllt mit Silikagel (Partikelgröße, 5 mum; Porengröße, 1000 A) zeigen die beste Leistung bei der Trennung von Hyoscyamin, Scopolamin und Ergotamin als Picrat-Ionenpaare. Eine enge Kontrolle von pH und Temperatur ist für reproduzierbare Trennungen unerlässlich. Verbesserungen der Erkennungsgrenzen zwischen 100 und 300 Mal wurden bei diesen Systemen beobachtet. Ion-Paar-Extraktionen dieser Alkaloide aus Dosierungsformen können für die Probenvorbereitung vor der Injektion auf die Spalte verwendet werden. Dies sorgt für einen zusätzlichen Grad an Selektivität und Sensibilität.
Analytische Trennung von Aminosäuren auf einem mit M-Divinylbenzen gekreuzten Kation-Austauschharz. Die Elusionsbänder der sauren und neutralen Aminosäuren von Proteinhydrolysaten, die aus der Spalte eines mit reinem m-divinylbenzen gekreuzten Kationsaustauschharzes hervorgehen, sind enger als diejenigen aus einem Harz, das aus Styrien und technischem divinylbenzen hergestellt wurde. Als Ergebnis dieser engeren Bänder wird eine vollständigere Auflösung der kritischen Paare Threonin-Serin, Glycin-Alanin und Tyrosin-Phenylalanin erhalten. Der wahrscheinlichste Grund für die engeren Elusionsspitzen ist die schnellere Diffusion der ausgetauschten Komponenten durch den Großteil des Harzes infolge einer regelmäßigeren Anordnung von Kreuzbindungen in der aus M-Divinylbenzen hergestellten Kation-Austauschharze.
[Template-Chromatographie auf immobilisierten Oligonukleotiden. Synthese und Anwendung von Oligodeoxyadenosin-5'-Phosphat--DEAE-Cellulose (Autor's transl)]. Oligomere der Deoxyadenylsäure, die durch Polykondensation gewonnen wurden, waren kovalent an Polyvinylalkohol gebunden. Diese mit Polymeren verbundenen Oligonukleotiden unterliegen einer sehr starken Adsorption auf DEAE-Cellulose, so dass bei neutralem pH und bei 1 M NaCl eine teilweise Desorption nur über 60 Grad auftritt. Die Verwendung dieser PV(pA)n-DEAE-Cellulose für die Spaltenchromatographische Trennung von Deoxythymidylsäure-Oligomeren, die durch Polykondensation erhalten werden, nach dem Prinzip der Basenpaarung, wird diskutiert. Lineare Oligomere und auch Pyrophosphatderivate von Thymidylsäure, die mehr als fünf Monomereinheiten enthalten, unterliegen unter Bedingungen der Basenpaarung einer starken Verzögerung. Zyklische Oligonukleotide zeigen keine merkliche Wechselwirkung mit der stationären Phase. So ist es durch die Verwendung eines Temperaturgradienten möglich, das Polykondensat fraktioniert zu trennen, was einen durchschnittlichen Grad der Polymerisierung von 6--10 verleiht.
Ein schnelles und umfassendes System für die routinemäßige Identifizierung von Arzneimitteln in biologischem Material basierend auf Mikrophasen-Extraktion und Arzneimittelfarbprofile. Die Trennung von basischen, sauren und neutralen Arzneimitteln aus Propanol-2-Extrakten von Serum-, Urin- und Gewebehomogenaten bei verschiedenen pH-Werten unter Verwendung einer Mikrophasen-Extraktionstechnik wird beschrieben. Nach der vorläufigen Screening werden die verschiedenen enthaltenen Arzneimittelfraktionen durch zweidimensionale Dünnschichtchromatographie weiter untersucht. Die vorhandenen Arzneimittel werden mit Bezugnahme auf dokumentierte Standards mit Hilfe eines Arzneimittelfarbprofil-Systems und RF-Werte in Bezug auf drei verschiedene Referenzstandards identifiziert. Durch die gaschromatografische Analyse derselben Extrakte können in vielen Fällen halbquantitative Schätzungen der vorhandenen Arzneimittelmengen vorgenommen werden, die für klinische Notfälle hinreichend genau sind. Die Hauptvorteile des Systems sind „saubere“ Extrakte mit einem Minimum an Hintergrundinterferenz, Schnelligkeit (4-6 h für eine vollständige Analyse) und systematisch dokumentiertes und visuell dargestelltes Verhalten von Arzneimitteln nach Spray mit verschiedenen chromogenen und fluorogenen Reagenzien, was die systematische Identifizierung unbekannter Substanzen ermöglicht.
Chromatographisches Verhalten von Alkaloiden auf dünnen Schichten von Anion- und Kation-Exhangern. I. AG 1-X4 und cellex D. Das chromatografische Verhalten von 48 Alkaloiden wurde auf Bio-Rad AG 1-X4, Cellex D und mikrokristalline Cellulose untersucht, die mit Lösungen mit unterschiedlichem pH, aber konstanten Ionenstärke (0,5) elutiert wurde. Viele interessante Trennungen wurden sowohl auf den AG 1-X4- als auch auf den Cellex D-Lagen vorgenommen. Der Einfluss des pH auf das chromatografische Verhalten der Alkaloide wurde quantitativ untersucht und eine Gleichung wurde verwendet, die das Verhalten der Alkaloide sowohl auf AG 1-X4 (AcO-) als auch auf mikrokristalliner Cellulose-Schicht ausdrückt. Die Nichtanwendbarkeit dieser Gleichung auf Cellex D-Schicht wird diskutiert.
Bestimmung von Trimethylsilyl-Methyl-Nukleinsäure-Basen im Urin mittels Gas-flüssiger Chromatographie. Es wurde eine Methode zur Bestimmung des Urin-Exkretionsniveaus von methylierten Nukleinsäure-Basen mittels Gas-flüssiger Chromatographie (GLC) entwickelt. Ein Reinigungsverfahren vor der GLC-Analyse bestand aus Hydrolyse, Filtration, Adsorption von Kohle und Austausch von Anionen. Es wurden Studien durchgeführt, um optimale Derivatierungsbedingungen für die Umwandlung der methylierten Basen in ihre Trimethylsil-Derivate zu bestimmen und GLC-Parameter und -Spalten zu bewerten, um die beste Trennung zu erzielen. Die Anwendung der Methode wurde durch Bestimmung der Ausscheidungswerte von methylierten Basen im Urin der normalen Kontrollen und von Patienten mit verschiedenen Arten von Malignität gezeigt.
Hochauflösende flüssige chromatografische Analyse von methylierten Purin- und Pyrimidin-Basen in Transfer-RNA. Methylierte und große Purin- und Pyrimidin-Basen wurden durch hochauflösende flüssige Chromatographie nach der Hydrolyse von Transfer-Ribonukleinsäuren (tRNAs) getrennt und quantifiziert. Die Trennung wurde durch Elutation der hydrolysierten Proben aus einer Anion-Austausch-Spalte mit einem Konzentrationsgradienten von Ammoniumacetat bei pH 9,2 erreicht. Isolierte Proben von tRNA wurden zu den freien Basen mit einer Mischung aus Trifluoroacetinsäure und Forminsäure von 200 Grad hydrolysiert. Detektionsgrenzen von 100-200 ng/ml wurden für die methylierten Basen gemessen; analytische Daten werden für zehn methylierte Basen plus die vier Hauptbasen der Kalb- und Rattenleber tRNA gemeldet.
Eine neue gaschromatografische Methode zur Schätzung von Reserpin und Rescinamin. Unter den Bedingungen, die für die alkalische Hydrolyse von Reserpin und Rescinamin in absoluten und wässrigen Methanol beschrieben wurden, und nach der Esterifizierung (mit Diazomethan) der resultierenden Säurefraktion wurde Methyl 3,4,5-Trimethoxybenzoat quantitativ wiederhergestellt, während Methyltrans-3,4,5-Trimethoxycinnamat unter normalen Beleuchtungsbedingungen entweder teilweise zu Methyl-Cis-Trimethoxycinnamat isomerisiert wurde oder ein adduct mit einem Molekül von Methanol gebildet wurde, was Methyl 3-Methoxy-3-(3,4,5-Trimethoxyphenyl)propionat ergibt. Die Strukturen der Produkte wurden durch Synthese, nukleare Magnetresonanzstudien und Massenspektrometrie festgestellt. Diese Untersuchung der hydrolytischen Bedingungen ermöglichte eine zuverlässige und schnelle gaschromatografische Bestimmung von Reserpin und/oder Rescinamin in Mengen bis zu 500 bzw. 2000 Schuppen.
Spezifische Ionenaustauschchromatographie und fluorimetrische Analyse für Urin 3-O-Methyldopamin. Eine Technik zur selektiven Extraktion von 3-O-Methyldopamin, Normetanephrin und Metanefrin aus einer einzigen Urinprobe wurde untersucht. Nach der Hydrolyse der Konjugate wird die verdünnte Mischung durch eine Dowex 50W-X2-Spalte geleitet und die methoxylierten Aminen werden durch konzentriertes Ammoniak elliptisiert. Das Eluat, das Metanefrin, Normetanephrin und 3-O-Methyldopamin enthält, wird verdampft, und eine Lösung des Rückstands im Boratpuffer wird unter streng kontrollierten Bedingungen auf einer Amberlite CG-50-Spalte fraktioniert. Die drei so getrennten Aminen werden durch spezifische fluorimetrische Methoden geschätzt. Die Extraktionswiederherstellung beträgt 80 +/- 3% für reine Lösungen und 78 +/- 4% für 3-O-Methyldopamin, das in den Urin hinzugefügt wurde. Das fluorimetrische Verfahren, das unter gut definierten Bedingungen durchgeführt wird, ermöglicht die Schätzung von 10 ng von 3-O-Methyldopamin. Die Spektraleigenschaften des fluoreszierenden Derivats sind denen, die mit Dopamin erhalten werden, ähnlich, so dass man davon ausgehen kann, dass die Jod-Oxidation von 3-O-Methyldopamin diese Verbindung demethyliert und das resultierende Dopamin in den Dopaminfluorophor (5,6-Dihydroxy-Indol) oxidiert. Von den Verbindungen, die das fluorimetrische Verfahren stören könnten, werden Dopamin, DOPA und Alpha-Methyl-DOPA durch die Ammoniak-Elution aus der Dowex-Spalte zerstört und 3-O-Methyl-DOPA wird aus der Amberlite-Spalte aus dem Abfluss entfernt. Die Beseitigung von interferierenden Verbindungen und die verbesserte Trennung auf Amberlite gewährleisten eine hohe Spezifität für dieses Verfahren. Wir haben die Methode auf normalen Urin und auf pathologischen Urin von Patienten mit adrenergen Tumoren oder unbehandelten und behandelten Parkinson-Patienten angewendet; wichtige Informationen über die Prognose von adrenergen Tumoren wurden erhalten. Das Vorhandensein großer Mengen an Dopamin, Normetanephrin und/oder Metanefrin wirkt sich nicht auf den Test für 3-O-Methyldopamin aus. Die Methode ist auch auf Ratten- und Hundeurin anwendbar und kann mit wenig Modifikation auf Gewebe-Extrakte angewendet werden.
Analyse der Radioimmunanalyse für Gonadotropinfreisetzendes Hormon (GnRH): Studien zur Wirkung von radioiodiertem GnRH. Wenn GnRH durch die Chloramin-T-Methode radioiodisiert wird, werden zwei immunreaktive markierte Arten bei pH 6.5 mit einem Chloramin-T: GnRH-Molarverhältnis von 11:1 gebildet, während vier Bänder (I, IIa, IIb und III) durch Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese getrennt werden, wenn das Hormon bei pH 7.5 in einem System mit einem 97:1 Molarverhältnis von Chloramin-T:GnRH iodisiert wird. Da sie stabiler und immunreaktiver waren als die anderen Produkte, wurden Band I und Band IIa aus dem letzteren System separat als Tracers mit Niswender-Antiserum R-42 in Radioimmunoanalysen für GnRH verwendet. Die Standardkurven jedes Trackers sind unterschiedlich: Bei der Analyse nach der Log-Logit-Transformation hatte die Band I-Kurve eine durchschnittliche Neigung von -3,31 +/- 0,2 (SE) und ein 50% B/Bt-Niveau von 9 +/- 0,8 pg (n=8) synthetischer GnRH, während die Band IIa-Standardkurve eine Neigung von -2,30 +/- 0,6 und einen 50% B/Bt-Wert von 20 +/- 0,9 pg (n=11) hatte. Die Empfindlichkeit beider Assays beträgt ungefähr 2,0 pg. Die Gn-RH-Konzentrationen in Plasma- und Serumproben, die mit Band I getestet wurden, waren konsequent höher als die mit Band IIa getesteten. Normale erwachsene männliche Plasmawerte, die mit Band I getestet wurden, waren 21 +/- 0,9 pg/ml, während Band IIa-Werte 8 +/- 0,4 pg/ml waren. Es wurden keine Unterschiede zwischen Plasma und Serum festgestellt, und es gab keine Unterschiede zwischen erwachsenen Männern, erwachsenen Frauen, präpubertalen Kindern, hypogonadalen Patienten oder hypopituitarischen Patienten mit beiden Tests. Die Plasmakonzentrationen von GnRH waren auch in jugulären und vena cava Proben von intakten und kastrierten männlichen Ratten ähnlich. Da viele der Proben bei oder unter der Empfindlichkeit des Band IIa-Assays waren, wurden sie nach der Extraktion mit entweder Methanol oder Säure-Ethanol konzentriert. Endogene immunreaktive GnRH konnte jedoch nicht durch diese Extraktionsverfahren konzentriert werden. Wie in der Band IIa-Analyse gemessen, enthielten hypothalamische Extrakte von kontrollierten erwachsenen männlichen Ratten 3,1 +/- 0,4 ng, während Hypothalamien von kastrierten Ratten 1,4 +/- 0,1 ng enthielten. Ähnliche, aber etwas niedrigere Werte wurden mit Band I. Im Gegensatz dazu war der GnRH-Gehalt von Pinealdrüsen von unberührten und kastrierten männlichen Ratten ähnlich (etwa 150 pg), wenn in beiden Tests bestimmt. Diese Studien betonen, dass: 1) die Eigenschaften des radioiodierten Hormons die Quantität von GnRH beeinflussen können; und 2) endogene Plasmakonzentrationen von GnRH viel niedriger sind als zuvor berichtet.
Kontraimmunoelektrophorese von Pneumokokkenantigenen: verbesserte Empfindlichkeit für die Erkennung von Typen VII und XIV. Die schnelle Identifizierung von Streptococcus pneumoniae wurde mithilfe der Kontraimmunoelektrophoresis für die Detektion spezifischer kapselförmiger Antigene im Serum, in der Zerebrospinalflüssigkeit und im Urin berichtet. In früheren klinischen Studien konnte das Pneumokokkenantigen Typ VII oder XIV nicht nachgewiesen werden. Diese beiden Typen machen jedoch einen signifikanten Teil der Pneumokokkenerkrankung aus. Die Einbeziehung eines sulfonierten Derivats der Phenylboronsäure in das Puffersystem bietet eine Methode zur sensiblen Erkennung dieser Typen in künstlichen Mischungen, ohne die Empfindlichkeit für die Erkennung anderer Pneumokokkentypen erheblich zu verringern. Ein Problem mit falschen positiven Ergebnissen, das mit Humanserum und Barbitalbuffer aufgetreten ist, wurde durch die Verwendung von Puffer reduziert, der sulfonierte Phenylboronsäure enthält.
Isolierung von Streptokokken-Nuklease B durch Batch-Adsorption. Es wurde eine Methode für die Zubereitung von Streptokokken-Nuklease B durch Batch-Adsorpton zu Diethylaminoethyl-Cellulose entwickelt. Das Enzym ist homogen in Bezug auf die Nukleaseaktivität und ist für die Verwendung als Antigen bei der Messung von Anti-Deoxyribonuclease-B-Spiegeln in Serum geeignet.
Schnelle Screening von Veillonella durch ultraviolette Fluoreszenz. Unter 51 anaeroben gram-negativen Kokkenstämmen der Familie Veillonellaceae zeigten alle Veillonella-Stämme (V. parvula und V. alcalescens) rote Fluoreszenz unter Langwellen (366 nm) ultraviolettem Licht, während keine Acidaminococcus oder Megasphaera Fluoreszenz zeigten. Im Gegensatz zu Bacteroides melaninogenicus erfordert das Wachstum von Veillonella kein Hemin und Menadion, und die Blütezeit geht bei der Exposition gegenüber Luft schnell verloren. Die fluoreszierende Komponente eines untersuchten Stammes von V. parvula konnte nicht in einer Lösung mit Wasser, Äther, Methanol oder Chloroform extrahiert werden, wurde aber leicht mit 0,4 N NaOH extrahiert. Spektrophotofluorometrisch war das Fluoreszenzmaximum dieses Extrakts 660 nm mit einem Erregungsmaximum von 300 nm, wenn bei pH 7,2 und 25 C gemessen.
Retention von Quecksilber-Konservierungsstoffen in getrockneten biologischen Produkten. Eine Vielzahl von Bakterien, Impfstoffen und Antisera behielten nach der Lyophilisation mehr als 90% ihres ursprünglichen Quecksilber-Konservierungsgehalts, und dies könnte bestimmte Verwendungen dieser Produkte beeinflussen.
Verteilung und Entfernung von Quecksilber in Milch. Verteilungsmuster von zugesetztem Quecksilber in roher Vollmilch nach Ausgewogenheit für 30 min und 2 h bei 37 ° C zeigten eine Verteilung zwischen Säure-Casein, Whey-Proteine, Fettblutmembran und lösliche Fettblutmembran von 33, 28, 16 und 2%. Basierend auf dem Eiweißgehalt hatte die Fettglobulembran die höchste Menge an Quecksilber. Quecksilber wurde der Milch hinzugefügt, da Quecksilberchlorid durch Behandlung mit thiolierten Aminoethylzellulose entfernt wurde und das menschliche Haar reduziert wurde. In einer 5-minütigen Behandlung wurden 70, 43 und 41% des Quecksilbers durch thiosuccinylierte Aminoethyl-Cellulose, thionitrocarboxyphenylierte Aminoethyl-Cellulose und reduzierte menschliche Haare, bzw. aus Vollmilch entfernt, die zunächst 1 ppm Quecksilber enthielt und 2 Stunden bei 37 C vor der Behandlung ausgeglichen wurde. Nach einer 60-minütigen Behandlung wurden 82, 52 und 64% des Quecksilbers durch thiosuccinilierte Aminoethylzellulose, thionitrocarboxyphenylierte Aminoethylzellulose und reduzierte Haare entfernt. Die zunehmende Inkubationstemperatur und die Zeit vor der Behandlung verringerten jedoch die Entfernungseffizienz. Thiosuccinilierte Aminoethylzellulose und reduzierte menschliche Haare zeigten eine erhöhte Effizienz direkt mit pH, während thionitrocarboxyphenylated Aminoethylzellulose die entgegengesetzte Wirkung zeigte und eine höhere Affinität für Quecksilber bei pH 5.5 als bei pH 7.5 hatte. Darüber hinaus war die Entfernung von Quecksilber bei 4 °C im Vergleich zu 37 °C viel langsamer. Die Entfernung von Quecksilber aus löslichen Kasein und löslichen Molkeproteinen war effizienter als aus micellarem Kasein. Protein, Laktose-Gehalt und pH-Wert der Milch wurden durch die Polymerbehandlungen nicht verändert.
Demonstration eines nichtadrenergen hemmenden Nervensystems in der Trachea des Guinea-Schweines. Ein nonadrenergisches hemmende Nervensystem wurde in der Schweine Guinea Trachea nachgewiesen. Die elektrische Feldstimulation dieses Systems, in Gegenwart von adrenergischer und cholinergischer Blockade, führte zur Entspannung der durch die Mediatoren der unmittelbaren Überempfindlichkeit oder Histamin kontrahierten Trachealringe. Die Entspannung wurde durch Tetrodotoxin blockiert, was darauf hindeutet, dass die Nervenstimulation für die Entspannung verantwortlich war. Der Magen-Darm-Trakt, der einen ähnlichen embryologischen Ursprung wie die Atemwege hat, hat auch ein nicht-adrenerges Hemmungssystem. Im Magen-Darm-Trakt wird angenommen, dass dieses System für die Entspannungsphase der Peristaltik verantwortlich ist, und das Fehlen dieses Systems, im Dickdarm und im Rektum, wird als eine Erklärung für den spastischen Darm bei der Hirschsprung-Krankheit angesehen. Es ist möglich, dass eine Anomalie des respiratorischen nonadrenergen Hemmsystems bei Asthma bei der Pathogenese der hyperreaktiven Atemwege eine Rolle spielen kann. Die Atemwege, aufgrund eines Mangels an Hemmung, kann entweder teilweise geschrumpft oder nicht in der Lage zu entspannen, und so erscheinen hyperreaktiv auf Reize.
Nichtspezifische alkalische Phosphomonoesterasen von acht Arten von digestiven Trematoden. Alkaline Phosphatasen aus verschiedenen Trematoden, die denselben Lebensraum besetzen, haben identische pH-Otima, aber unterschiedliche Enzymaktivitätsniveaus. Isoparorchis hypselobagri, aus dem Fisch Wallago attu, zeigt vier bis sechs Mal mehr Enzymaktivität als Fasciolopsis buski, Gastrodiscoides hominis und Echinostoma malayanum, aus dem Schwein Sus scrofa, und Fasciola gigantica, Gigantocotyle explanatum, Cotylophoron cotylophorum und Gastrothylax crumenifer, aus dem Büffel Bubalus bubalis. Mindestens zwei Aktivitätsspitzen bei unterschiedlichen pH-Werten wurden für jede untersuchte Trematode erzielt. Sowohl die Enzyme Gastrodiscoides hominis als auch Isoparorchis hypselobagri hatten drei Spitzen der alkalischen Phosphataseaktivität. Die optimale Temperatur für die maximale Enzymaktivität betrug 40 Grad C, über denen eine schnelle Inaktivierung aufgetreten ist. Bei Temperaturen unter 40 Grad C verhielten sich die Enzyme von Fischen und Säugetieren nicht ähnlich; I. das Enzym hypselobagri war über einen breiteren Temperaturbereich (20 Grad-40 Grad C. Verschiedene Konzentrationen von KCN und Arsenat hemmten die Enzymaktivität proportional. NaF hatte keinen signifikanten Einfluss auf die Enzymaktivität, während Mg++ und Co++ als Aktivatoren wirken. Der Grad der Hemmung oder Aktivierung der Enzymaktivität verschiedener Trematoden variierte, wahrscheinlich aufgrund von Artenunterschieden. Sowohl die Hemmung als auch die Aktivierung des I. hypselobagri-Enzyms waren höher als bei anderen Trematoden.
Die Wirkung der neonatalen Ratten-Graft-VS-Host-Krankheit (GVHD) auf Fc-Rezeptor-Lymphozyten. Das Niveau der Fc-Rezeptor-Rosette-bildenden Lymphozyten (Fc-RFL) wurde in der Milz- und Lymphknotenzellensuspension von neugeborenen DA- und BN-Ratten untersucht, die innerhalb von 24 Stunden nach der Geburt mit entweder allogenen L- (experimentellen) oder syngenen (kontrollierten) Lymphozytenzellen eingeimpft wurden. Darüber hinaus wurden diese Werte mit fetalen und neugeborenen Tieren verglichen, die keine Injektion erhielten. Die Indikatorzellen (EA) waren Erythrozyten von Schafen, die mit einer halben Konzentration der höchsten Verdünnung des Kaninchen-Anti- Schaf-Erythrozyten-IgG(A) sensibilisiert wurden, die eine gleiche Menge von 1% Suspension von E agglutinierten. Die Milz von 19-tägigen DA fetalen Ratten zeigte ein Niveau von 19,3% Fc-RFL, ähnlich dem von Tieren, die bei der Geburt erwachsene syngenetische Zellen erhalten hatten (40,0%) am 7. Tag. Danach unterschied sich der Fc-RFL-Spiegel zwischen diesen beiden Gruppen nicht deutlich. Bereits 2 Tage nach der Impfung gab es jedoch eine signifikant größere Anzahl von Fc-RFL in der Milz von experimentellen DA Neugeborenen im Vergleich zu Kontrollen. Die Lymphknoten von experimentellen Tieren zeigten bis zum 6. Tag keine signifikant größere Anzahl von Fc-RFL, wobei beide Gewebeabschnitte am 10. Tag ihren Höhepunkt erreichten und bis zum Tod deutlich höher blieben als die Kontrollen. Bei neugeborenen BN-Tieren waren signifikant höhere Fc-RFL-Werte bei experimentellen Tieren nicht so früh sichtbar und erreichten einen Spitzenwert später (Tag 12) in beiden Gewebepartements, aber erneut blieben diese Unterschiede bis zum Tod bestehen. Cytotoxic alloantisera zeigte, dass an den Tagen 6, 10 und 12 die meisten, wenn nicht alle, der Fc-RFL ursprünglich in DA und BN GVHD gehostet wurden, mit einer sehr signifikanten Wirtplasma-Zellreaktion bei solchen GVHD-Tieren. Ein-Mikron-Gewebe-Abschnitt zeigte das Vorhandensein einer großen Anzahl von Plasmacellen besonders prominent in der Medulla der Lymphknoten mit dem Kortex der Lymphknoten und weiße Pulpe der Milz markant erschöpft von Lymphozyten, die auf Zytotoxizität hinweisen.
Kinetik der Antikörperreaktion gegen Typ III Pneumokokkenpolysaccharide (SSS-III). I. Verwendung von 125I-labelten SSS-III zur Untersuchung der Antikörperwerte im Serum sowie der Verteilung und Ausscheidung von Antigenen nach der Immunisierung. Eine einfache Methode wurde für die Herstellung von 125I-labeled Typ III neumokokken Polysaccharid (SSS-III) mit einer hohen spezifischen Radioaktivität beschrieben, die die physikalischen und immunologischen Eigenschaften der nativen SSS-III beibehalten. SSS-III wurde verwendet, um die Serum- und Gewebespiegel des Antigens sowie seine Ausscheidung nach der i.p. Injektion zu untersuchen. Wenn eine optimale immunogene Dosis (0,5 Mose) des Antigens verabreicht wurde, wurde mehr als 90% des injizierten Antigens in den ersten 3 Tagen nach der Injektion ausgeschieden; jedoch wurde nach Tag 3 das in jeder Maus verbleibende SSS-III fest an verschiedene Gewebe gebunden und weniger als 5 ng SSS-III wurden täglich in den Kreislauf freigesetzt. SSS-III wurde auch in einem Farr-Test verwendet, um Serum-Antikörperniveaus zu messen; die Kinetik für das Auftreten von PFC / Milz und Serum-Antikörperniveaus wurden in 24-Stunden-Intervallen nach Immunisierung mit 0,5 Mücken des Antigens gemessen. Die maximale PFC/Schuppenwerte wurden am 4. Tag nach der Immunisierung beobachtet, während die Spitzenwerte der Serum-Antikörper am 5. Tag beobachtet wurden. Der Zerfall des Serum-Antikörperniveaus von seinem Höchstwert war viel langsamer als der des PFC/Schleim. Die Daten zur In-vivo-Verteilung von SSS-III und zur Messung der Antikörperspiegel im Serum zeigten, dass die Neutralisierung des Laufbandes kein Faktor bei der Bestimmung der Antikörperspiegel im Serum nach der Immunisierung mit einer optimalen immunogenen Dosis von SSS-III war.
Kinetik der Antikörperreaktion gegen Typ III Pneumokokkenpolysaccharide. Faktoren, die die Antikörperspiegel im Serum nach der Immunisierung mit einer optimalen immunogenen Dosis des Antigens beeinflussen. Wenn die Anzahl der in der Milz vorhandenen PFCs in 24-Stunden-Intervallen nach der Immunisierung mit einer optimal immunogenen Dosis von Pneumokokkenpolysaccharid Typ III (SSS-III) gemessen wurde, wurde die maximale Anzahl der PFCs 4 Tage nach der Immunisierung erreicht; danach verringerte sich die Anzahl der PFCs schnell. Im Gegensatz dazu erreichten die Antikörperwerte im Serum, die bei den gleichen Mäusen mit einem Farr-Test gemessen wurden, Spitzenwerte 5 Tage nach der Immunisierung und sinken dann viel langsamer als die Anzahl der PFCs. Es wurden zwei Faktoren gefunden, die zu dieser Ungleichheit beitragen. Erstens zeigten Experimente mit splenektomierten Mäusen, dass die Synthese von extrasplenischen Antikörpern, die zwischen den Tagen 3 und 4 nach der Immunisierung begann und an den Tagen 6 bis 7 ihren Höhepunkt hatte, fast ein Drittel der Gesamtmenge der produzierten Serumantikörper ausmachte. Zweitens stieg die durchschnittliche Geschwindigkeit der Antikörpersynthese durch PFC bis zum 6. Tag nach der Immunisierung und ging dann zurück. Antigen-Antikörper-Dissoziationstests zeigten, dass die Avidität des Serum-Antikörpers, das 4 bis 7 Tage nach der Immunisierung erhalten wurde, gleich war. Darüber hinaus gehörten während des gleichen Intervalls alle durch den Farr-Test nachgewiesenen Antikörper zur IgM-Klasse. Eine Änderung der Eifersucht oder der Klasse von Immunoglobulin nach Tag 5 machte also die beobachtete Ungleichheit nicht aus. Die Clearance-Rate von Antikörpern, die intravenös in nichtimmune und immunisierte Mäuse injiziert wurden, wurde untersucht. Die erhaltenen Daten zeigten, dass vor Tag 3 nach der Immunisierung eine beschleunigte Antikörperclearance aufgetreten war; nach Tag 3 war die Antikörperclearance jedoch konstant und war die gleiche wie bei der Injektion von Antikörpern in nichtimmune Mäuse. Diese Ergebnisse bestätigten die Ergebnisse früherer Studien, die zeigten, dass die Treadmill-Neutralisierung bei der Bestimmung der nach der Immunisierung mit einer optimalen immunogenen Dosis von SSS-III vorhandenen Antikörperspiegel nicht wichtig war.
Maus epidermale arylhydrocarbon hydroxylase. Maushaut enthält eine NADPH-abhängige, arylcarbon hydroxylase (AHH), die durch polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe induzierbar ist. Im Allgemeinen verursachten unersetzte polyzyklische Kohlenwasserstoffe eine größere Induktion der epidermalen AHH als ersetzte (1,2,3,4-dibenzanthracene größer als 1,2,5,6-dibenzanthracene größer als benz (a)anthracene gleich 3-methylcholanthrene größer als 7,12-dimethlbenz (a)anthracene), was nicht mit ihrer Fähigkeit korrelierte, Tumore in der Haut von Mäusen zu initiieren. Zwei verschiedene Techniken wurden verwendet, um die Epidermis zu isolieren und ähnliche Ergebnisse wurden mit beiden erhalten. Die Technik der Isolierung der Epidermis mit einer milden Wärmebehandlung erforderte jedoch, dass die Temperatur bei 52 Grad C für 30 Sekunden gehalten wird. Wenn die Temperatur auf 54 Grad Celsius oder höher erhöht wurde, kam es zu einer großen Abnahme der AHH-Aktivität. Isolierte Epidermis hat 4 bis 5 mal die AHH-Aktivität als Dermis und etwa doppelt so viel wie die gesamte Haut. Dies galt für Kontrollmäuse oder Mäuse, bei denen AHH durch Vorbehandlung mit Benz(a)anthracen induziert wurde.
Defekte in der Biochemie von Kollagen bei Erkrankungen des Bindegewebes. Die Kollagen sind die wichtigsten strukturellen Glykoproteine der Bindegewebe. Eine einzigartige Primärstruktur und eine Vielzahl posttranslationaler Modifikationsreaktionen sind für die normale Fibrilogenese erforderlich. Die post-translationalen Modifikationen umfassen die Hydroxylation von Prolyl- und Lysylrückständen, die Glycosylation, das Falten des Moleküls in eine triple-Helikale Konformation, die proteolytische Konvertierung des Vorläufers Prokolagen in Kollagen und die oxidative Deamination bestimmter Lysyl- und Hydroxylrückstände. Jeder Defekt in den normalen Mechanismen, die für die Synthese und Sekretion von Kollagenmolekülen oder die Ablagerung dieser Moleküle in extrazelluläre Fasern verantwortlich sind, könnte zu abnormaler Fibrilogenese führen; solche Defekte könnten zu einer Bindegewebserkrankung führen. In jüngster Zeit wurden bei erblichen Erkrankungen des Bindegewebes Mängel in der Regulation der synthetisierten Kollagenarten und in den Enzymen, die an den posttranslationalen Modifikationen beteiligt sind, gefunden. Bisher gehören zu den primären erblichen Störungen des Kollagenstoffwechsels beim Menschen lysylhydroxylase-Mangel bei Ehlers-Danlos-Syndrom Typ VI, p-Collagen-Peptidase-Mangel bei Ehlers-Danlos-Syndrom Typ VII, verminderte Synthese von Typ III-Collagen bei Ehlers-Danlos-Syndrom Typ IV, lysyloxidase-Mangel bei S-linked cutis laxa und Ehlers-Danlos-Syndrom Typ V und verminderte Synthese von Typ I-Collagen bei Osteogenese imperfecta.
Einige Eigenschaften der Proteolyse durch polymorphonukleare Leukozyten-Granulenextrakte. Die Extrakte von Granulaten menschlicher polymorphonuclear Leukozyten hydrolysiert eine Vielzahl von Proteinen, einschließlich menschliches und Rindeshämoglobin, menschliches Fibrinogen, menschliches und Rindeserumalbumin, Rindelastin und Casein. Die Hydrolyse aller Proteine mit Ausnahme von Fibrinogen und Elastin wurde durch die Zugabe von Harnstoff erhöht. Verschiedene Inhibitoren von Trypsin, Kalikrein, Plasmin, Clr, Cls und anderen proteolytischen Enzymen hatten keine hemmende Wirkung. Leichte Hemmung wurde bei Polyanethol Sulfonat und starke Hemmung bei normalem menschlichem Serum beobachtet. Serum von Patienten mit erblichem angioneurotischem Ödem ohne funktionellen C1-Esterase-Inhibitor war genauso wirksam bei der Hemmung der Proteolyse wie normales Serum. Der Inhibitor wurde in 4S-Fraktionen des normalen Serums lokalisiert, die auf Sephadex G-200 fraktioniert wurden. Die Fraktionierung des normalen Serums durch Ammoniumsulfatabfälle, Sephadex G-200-Filtration und CM-Sephadex-Chromatographie führte nicht zum Auftreten einer hemmenden Aktivität bei mehr als einem Eiweißspitzen, was darauf hindeutet, dass nur ein Inhibitor verantwortlich sein könnte. Da alle Fraktionen, die den Inhibitor der Proteolyse enthielten, auch Alpha1-Antitrypsin enthielten, da das Serum von Patienten mit niedrigen Alpha1-Antitrypsin-Spiegeln weniger hemmende Aktivität enthielt und da Antikörper gegen Alpha1-Antitrypsin die Hemmung von normalem Serum umkehrten, kann die Hemmung der Proteolyse auf Alpha1-Antitrypsin zurückzuführen sein.
Hemmung der antibakteriellen Aktivität von Gentamicin im Urin. Urinwerte von Antibiotika bestimmen das Ergebnis der Behandlung der meisten Harnwegsinfektionen. Die antibakterielle Wirkung von Gentamicin gegen Escherichia coli und Pseudomonas aeruginosa im Urin wurde untersucht. Bei der Verwendung von Urinbestandteilen in Konzentrationen, die normalerweise im menschlichen Urin vorkommen, wurde gezeigt, dass Urin eine hemmende Wirkung hat, die von der Säure und der Gesamtosmolalität des Urins sowie vom Vorhandensein einzelner Lösungsmittel abhängt. Bis zu 40-mal so viel Gentamicin kann benötigt werden, um das Wachstum von E. coli oder P. aeruginosa im konzentrierten, sauren menschlichen Urin zu verhindern, wie es in der Brühe erforderlich ist. Diese hemmende Wirkung kann besonders wichtig sein, wenn die Konzentrationen von Gentamicin im Urin entweder aufgrund einer Dosisreduktion oder aufgrund einer verminderten Ausscheidung aufgrund von Niereninsuffizienz reduziert werden.
Die Polysaccharidkapsel von Bacteroides fragilis Unterarten fragilis: immunochemische und morphologische Definition. Ein Kapselpolysaccharid mit großem Molekulargewicht wurde aus Stämmen der Unterart Bacteroides fragilis fragilis isoliert. Durch Elektronenmikroskopie und Färbung mit Rutheniumrot wurde auch die dicke Polysaccharidkapsel visualisiert. Bei der Verwendung eines radioaktiven Antigenbindungsanalyses wurden Antikörper gegen dieses kapselförmige Polysaccharid bei Kaninchen vorbereiteten Antiseren gegen jeden der acht Stämme von B. fragilis fragilis nachgewiesen. Antikörper ähnlicher Spezifität wurden nicht in Antisera vorbereitet Bacteroides melaninogenicus oder zu Stämmen von Bacteroides fragilis Unterarten vulgatus und Bacteroides fragilis Unterarten distasonis gefunden; ein solches Antikörper wurde in Antisera nur zu einem von zwei Stämmen von Bacteroides fragilis Unterarten thetaiotaomicron gefunden. Der radioaktive Antigenbindungstest ist ein sensibler Test zur Erkennung von Antikörpern gegen kapselförmige Polysaccharide. Dieses Polysaccharidenantigen kann die Grundlage für ein Serogruppsystem für B. fragilis bilden.
Radioanalyse für Serum und Folat der roten Zellen. Eine einfache, zuverlässige Analyse für Serum und Folat der roten Zellen wird beschrieben. Es verwendet einfache unbehandelte Flüssigkeit oder Milchpulver, die keine spezielle Handhabung oder Reinigung erfordert, als Bindemittel. Eine solche Milch macht es möglich, endogene Serum-Folatbindemittel zu ignorieren, da rohe (aber nicht gereinigte) Milch einen Faktor enthält, der Folat aus dem Serum-Bindemittel freisetzt. Es vereinfacht die Zählung der Radioaktivität, indem ein Gamma-emittierendes Isotop von Pteroylglutaminesäure (PGA) verwendet wird, nämlich das 125I-Tyramid von PGA. Wie die 3H-PGA-Analyse von Givas und Gutcho erlaubt es die Verwendung von stabilem PGA anstelle von instabilen Methyltetrahydrofolinsäure (MeTHFA) Standards, da es bei pH 9,3 durchgeführt wird, bei dem der Milchfolatbindstoff nicht in der Lage ist, PGA von MeTHFA zu unterscheiden, das das Folat im menschlichen Gewebe vorherrscht. Die für die Durchführung der Funkuntersuchung erforderliche Ausrüstung ist in den meisten diagnostischen Chemie-Labors vorhanden. Die Ergebnisse sind im Wesentlichen identisch mit der allgemein akzeptierten Lactobacillus casel mikrobiologischen Methode der Folat-Analyse, mit der Ausnahme, dass falsch niedrige Ergebnisse werden nicht in der Radio-Analyse von Antibiotika, Beruhigungsmitteln und chemotherapeutischen Mitteln produziert. Drei Warnungen bei seiner Verwendung sind die relative Instabilität von 125I-PGA im Vergleich zu 3H-PGA, die Tatsache, dass verschiedene pulverisierte Milch in der Folatbindungskapazität weit unterscheiden, und dass nur etwa 60 Prozent der kommerziell erhaltenen Skim oder pulverisierten Milchpräparate enthalten scheinen, die Substanz, die Folat vom Serum-Bindemittel trennt.
Die Wirkung des UmweltpH auf den Glycosaminoglycan-Metabolismus durch normale menschliche Chondrozyten. Die Synthese und Freisetzung von sulfierten Glycosaminoglykanen durch normale menschliche Chondrozyten in der Kultur werden durch den pH-Wert der Umgebung stark beeinflusst. Die biosynthetische Rate wird verdreifacht, wenn der pH-Wert des Wachstumsmediums von 7,0 auf 8,0 erhöht wird. Dies fällt mit einer entsprechenden Erhöhung des Gesamtproteins und des Zellwachstums zusammen. Die Freisetzungsrate von neu synthetisierten sulfierten Glycosaminoglykanen aus der Zellschicht sowie ihre Verteilung zwischen intra- und extrazellulärer Lokalisierung in der Zellschicht wird ebenfalls durch den UmweltpH moduliert. Bei pH 8 findet sich 35 Prozent innerhalb der Zellen, bei pH 7 wird dieser Wert auf 13 Prozent reduziert. Experimente mit Pulse-Chain zeigten, dass zuvor eingebettete sulfierte Proteoglykane bei pH 7 schneller freigesetzt wurden als bei pH 8. Die Daten deuten darauf hin, dass Protonkonzentrationen die Biosynthese und die Verteilung von neu synthetisierten sulfierten Glycosaminoglykanen beeinflussen.
Wirkung von PGA1, PGE2, Diazoxid auf die kontraktile Kraft des Myokards. Experimente wurden an betäubten Hunden durchgeführt, die die Auswirkungen von PGA1, PGE2 und Diazoxid auf die kontraktile Kraft des Myokards (MC) vergleichen. Die drei Wirkstoffe wurden in aufeinanderfolgenden Bolus-Injektionen intravenös in Equidepressor-Dosen verabreicht und die Myokardkontraktionskraft wurde mithilfe eines auf den rechten Ventrikel gesetzten Spannungsmessers gemessen. Die Medikamente wurden vor und während der Ganglion (Hexamethonium) und Beta-Blockade (Practolol) verabreicht. Sowohl PGA1 als auch PGE2 verursachten einen markanten Anstieg der MC, 24 und 20 Prozent, jeweils, vor der Blockade und 10 und 11 Prozent während der Blockade. Diazoxid verursachte vor der Blockade nur einen minimalen Anstieg von 0,9 Prozent und während der Blockade einen markanten Rückgang von 27 Prozent. Die Verabreichung von Diazoxid während des linken Ventrikular-Bypasses deutet darauf hin, dass die Verringerung des MC nicht das direkte Ergebnis von Veränderungen bei der Vor- oder Nachbelastung ist. Es wird vorgeschlagen, dass hypertensive Patienten, die mit autonomen blockierenden Mitteln behandelt werden, als Reaktion auf die Diazoxid-Therapie anfälliger für Herzversagen sein können.
Peptidbindende Makromoleküle im Blut von schwer kranken oder geistig retardierten Patienten. Dieser Bericht beschreibt Makromoleküle, die sich binden (des-asparaginsäure1)-Angiotensin II, der des-asparaginsäure1-Derivat von Angiotensin I, und mehrere biologisch aktive und inaktive Analoga dieser Polypeptide. Die Makromoleküle wurden im Plasma von etwa 2 Prozent der ambulanten Erwachsenen und Krankenhauskindern und 32 Prozent der Patienten in zwei Einrichtungen für geistige Behinderte gefunden. Die Bindungseigenschaften dieser Makromolekülen wurden untersucht, indem sie mit 125-Jod-labelten Peptiden inkubiert und gebundene von freie-labelte Peptide mithilfe kleiner Gelfiltrationssäulen getrennt wurden. Die Peptid-bindenden Makromolekülen von mehreren Patienten wurden verglichen. Sie zeigten eine sehr ähnliche Spezifität für eine Gruppe von Arginylpeptiden der Des-Aspartyl1-Angiotensin-Sequenz. Die Plasma-Bindemittel unterschieden sich voneinander in ihrem optimalen pH-Wert und ihrer Mobilität in elektrophoretischen Feldern. Diejenigen mit mehr sauerem pH optima zeigten eine schnellere elektrophoretische Mobilität. Die Bindemittel fielen in zwei Klassen basierend auf offensichtlichem Molekulargewicht, ungefähr 140.000 und 250.000. Diejenigen mit dem höheren offensichtlichen Molekulargewicht enthielten einen großen Anteil an Bindemittel, der mit Antiserum auf menschliches IgA verabreicht werden konnte. Kinetische Messungen zeigten, dass die Plasmabindstoffe in Bezug auf die Affinität für (des-asp1)-Angiotensin etwas heterogen waren, wobei die offensichtlichen Assoziationskonstanten von 10(7) bis 10(8) M-1 reichen. Bindungsaktivität war labil für Wärme und für die Behandlung mit Pepsin oder Trypsin. Es wurde durch Kalzium, Protamin, Streptomycin und einige andere kationische Verbindungen gehemmt. Die Plasma-Peptidbindung unterschied sich in Spezifität und Molekulargewicht von löslichen Angiotensin-bindenden Molekülen, die aus Geweben extrahiert wurden, und von den erwarteten Eigenschaften eines Angiotensin-Rezeptors. Diese Makromoleküle können nützliche Reagenzien für die Messung von (des-asp1)-Angiotensinen sein. Ihre Anwesenheit in Plasmaproben kann unter bestimmten Umständen mit Angiotensin-Analysen interferieren.
Die Übertragung von Impulsen im ectodermalen langsamen Leitungssystem der Meeresanemone Calliactis parasitica (Couch). Die SS 1 ermüdet sich als Reaktion auf wiederholte elektrische Stimulation. Diese Müdigkeit manifestiert sich durch eine erhöhte Leitungsverzögerung und eine verminderte SS 1-Pulsamplitude. Kontinuierliche wiederholte Stimulation führt zum Versagen des Systems. Die Wiederherstellung kann mehrere Sekunden dauern. Schmale Streifen der Spalte scheitern schneller als breite Streifen. Die erhöhte Leitungsverzögerung wird in Bezug auf eine Abnahme der Population von Spiking-Zellen erklärt. Ein Computermodell wird beschrieben und analysiert. Es legt nahe, dass die Leitung zwischen elektrisch gekoppelten Ektodermzellen die Grundlage für die SS1 sein könnte. Die SS 1 kann Eigenschaften haben, die bisher nicht experimentell nachgewiesen wurden; zum Beispiel könnte sie sich unter bestimmten Bedingungen wie ein lokales System verhalten.
Koloniale Leitungssysteme in den Anthozoen: Octocorallia. Die Octocorals Alcyonium digitatum, Pennatula phosphorea und Virgularia mirabilis haben jeweils ein durchführendes Nervennetz. Das elektrophysiologisch nachgewiesene Nervennetz kann gut das gleiche sein wie das, was zuvor durch die Verwendung histologischer Techniken gezeigt wurde. Es zeigt sowohl Erleichterung als auch Entlastung in der Leitungsrate der Impulse. Die Entfernung der Ausbreitung der Nervennetzaktivität ist nicht durch die Anzahl der angewandten Reize begrenzt. Das Nervennetz kontrolliert schnelle Muskelkontraktionen; die Häufigkeit der Impulse ist wichtig bei der Bestimmung, welche Muskeln zusammenziehen und in welcher Sequenz. Das Nervennetz ist „spontane“ aktiv. Ein zuvor nicht beschriebenes langsames System wurde in Pennatula identifiziert. Es hat viele der Eigenschaften von langsamen Systemen in Meeresanemonen und kann gut ectodermal sein. Es wird vorgeschlagen, dass mehrere Leitungssysteme in den Anthozoen häufig vorkommen.
Wasserregulierung durch ein vermutliches Hormon, das in der identifizierten neurosekretorischen Zelle R15 von Aplysia enthalten ist. Die Injektion eines Homogenats des identifizierten Neurons R15 in das Hämocele von Aplysia führte innerhalb von 90 Minuten zu einer Gewichtszunahme von 3-10%. Die Gewichtszunahme ereignete sich auch, wenn die Tiere in 5% hyperosmotischem Meerwasser gehalten wurden. Die Aktivität des R15 Homogenats wurde nach der Versauerung auf pH 2 und Erwärmung auf 100 Grad C beibehalten; aber die Aktivität wurde durch die proteolytische Verdauung mit Pronase zerstört. Dialyse in Cellulose-Dialyse-Tubing führte zu einem signifikanten Verlust von Aion auf Sephadex G-50 (nominale Ausschlussgrenzen 1500-30.000 Daltons), Aktivität war in den teilweise enthaltenen Volumina vorhanden, aber war in den vollständig ausgeschlossenen oder vollständig enthaltenen Volumina abwesend. Die Daten unterstützen die Vorstellung, dass R15 ein oder mehrere Hormone enthält, die an der Ionenregulierung oder dem Wasserhaushalt beteiligt sind. Die Ergebnisse von Bioassays von R15-Extrakten, die verschiedenen Behandlungen unterzogen wurden, stimmen mit der Hypothese überein, dass die Aktivität auf ein oder mehrere stabile Polypeptide mit relativ geringem Molekulargewicht zurückzuführen ist.
Intracelluläre pH-Übergangsstoffe in squid-riesen Axonen, die durch CO2, NH3 und metabolische Inhibitoren verursacht werden. Der intrazelluläre pH (pHi) von squid-riesen-axonen wurde mithilfe von glas-pH-mikroelektroden gemessen. Der ruhende pHi im künstlichen Meerwasser (ASW) (pH 7,6-7,8) bei 23 °C betrug 7,32 +/- 0,02 (7,28 bei Korrektur des Flüssigkeitsverbindungspotenzials). Die Exposition des Axons gegenüber 5% CO2 bei konstantem äußeren pH verursachte eine starke Abnahme des pHi, während die anschließende Entfernung des Gases dazu führte, dass der pHi seinen Anfangswert überschritt. Wenn die Exposition gegenüber CO2 verlängert wurde, wurden zwei zusätzliche Effekte beobachtet: (a) während der Exposition folgte der schnelle anfängliche Rückgang des pHi durch einen langsamen Anstieg, und (b) nach der Exposition wurde der Überschuss stark übertrieben. Die Anwendung externer NH4Cl verursachte einen starken Anstieg des pHi; die Rückkehr zum normalen ASW verursachte die Rückkehr des pHi zu einem Wert unterhalb seines ursprünglichen. Wenn die Exposition gegenüber NH4Cl verlängert war, wurden zwei zusätzliche Effekte beobachtet: a) während der Exposition wurde der schnelle Anfangsanstieg des pHi gefolgt von einem langsamen Rückgang und b) nach der Exposition wurde der Unterschuss stark übertrieben. Die Exposition gegenüber mehreren schwachen Säure-Metabolisierungsinhibitoren verursachte einen Rückgang des pHi, dessen Umkehrbarkeit von der Dauer der Exposition abhängte. Die Umkehrung des elektrochemischen Gradients für H+ mit 100 mM K-ASW hatte keine Auswirkungen auf pHi-Veränderungen, die sich aus der kurzfristigen Exposition gegenüber Azid ergaben. Ein mathematisches Modell erklärt die pHi-Veränderungen, die durch NH4Cl auf der Grundlage passiver Bewegungen von NH3 und NH4+ verursacht werden. Die gleichzeitigen passiven Bewegungen von CO2 und HCO3 können die Ergebnisse der CO2-Experimente nicht erklären; diese Daten erfordern die Postulation eines aktiven Proton-Extrudierungs- und/oder Sequestrationsmechanismus.
Analyse eines L-Histidinol-nutzenden Mutants von Pseudomonas aeruginosa. Die Transduktionsanalyse wurde auf den Pseudomonas aeruginosa-Mutanten PAO14 (hnc-1) angewendet. Dieser Mutant kann L-Histidinol als einzige Quelle von Kohlenstoff und Stickstoff nutzen und hat einen 60-fachen erhöhten Histidinol-Dehydrogenase-Gehalt (HDH) (Dhawale, Creaser & Loper, 1972). Die Transduktionsanalyse wurde mit 18 Histidin-erforderlichen Mutanten durchgeführt, um zu sehen, wo der Hnc-1-Lokus in Bezug auf die strukturellen Gene der Histidin-Biosynthese kartet. Der hnc-1-Marker wurde mit Gruppen IV-Genen bei 97 bis 100 % und überhaupt nicht mit Gruppe I übertragen, von der bekannt ist, dass es sich um das strukturelle Gen für HDH handelt. Die in den Studien von Km (Histidinol) und Km (NAD) erhaltenen Daten sowie die Wirkung von pH und Temperatur auf die HDH-Aktivität von PAO1 und PAO14 stimmen voll und ganz mit den genetischen Daten überein, dass die hnc-1-Mutation nicht im strukturellen Gen für HDH vorkommt. Es wird vorgeschlagen, dass hnc-1 eine Mutation in einem regulatorischen Gen sein kann, das die HDH-Synthese in PAO14 beeinflusst und in der Nähe seines IV sein kann, dessen Funktion in der Histidin-Biosynthese nicht bekannt ist.
Untersuchungen auf der rumen flagellate Neocallimastix frontalis. Die enorme Zunahme der Bevölkerungsdichte des Rumenflagellates Neocallimastix frontalis kurz nach Beginn der Ernährung des Tieres wird durch die Stimulation eines Fortpflanzungsorganismus in einer vegetativen Phase des Organismus verursacht, um die Flagellate zu differenzieren und zu befreien. Das Stimulans ist ein Bestandteil der Ernährung des Gastgebers. Das vegetative Stadium von N. frontalis trägt eine starke morphologische Ähnlichkeit mit dem von bestimmten Arten von aquatischen Phycomycete-Pilzen und besteht aus einem Fortpflanzungsorganismus, das auf einem einzelnen, viel verzweigten Rhizoid getragen wird. Die in vivo freigesetzten Flagellate verlieren innerhalb von 15 bis 45 Minuten nach der Fütterung ihre Beweglichkeit und entwickeln sich in die vegetative Phase, wodurch eine schnelle Abnahme der Bevölkerungsdichte der Flagellate entsteht. Die Bedingungen für die maximale Flagellatproduktion ähneln denen, die im Rumen vorkommen: pH 6-5, 39 Grad C, Abwesenheit von O2, Anwesenheit von CO2. Die Differenzierung des Fortpflanzungsorganismus wird durch Verbindungen gehemmt, die die Membranstruktur und -funktion beeinflussen, aber nicht durch Inhibitoren der Proteinsynthese. Der Organismus wurde in vitro in einem undefinierten Medium in Abwesenheit von Bakterien oder anderen Flagellaten kultiviert.
Eigenschaften einiger Bakteriozine, die von Rhizobium trifolii produziert werden. Bakteriozine, die von sechs Stämmen von Rhizobium trifolii produziert wurden, waren relativ geringes Molekulargewicht, nicht-Phage-Typ. Die Molekulargewichte reichten von ungefähr 1-8 X 105 bis 2-0 X 105. Alle waren von Proteinzusammensetzung, wie durch die Dichte der Blüte (1-32 bis 1-34 g/cm3) in CsC1 und durch Empfindlichkeit gegenüber proteolytischen Enzymen angegeben. Sie waren resistent gegen RNAase, aber empfindlich gegen DNAase. Die sechs Bakteriozine könnten weiter in zwei Untergruppen unterteilt werden, basierend auf der Empfindlichkeit gegenüber extremen pH-Werten, der Bindung an Filtermembranen, dem Wirkungsspektrum auf empfindlichen Stämmen von R. trifolii und möglicherweise der Wirkungsweise auf empfindliche Bakterien. Die Bakteriozinproduktion fand spontan während der frühen bis mittleren exponentiellen Phase des Bakterienwachstums in der Brühe-Kultur statt.
Produktion und Reinigung des Gamma-Hämolysins von Staphylococcus aureus 'Smith 5R'. Das Gamma-Hämolyzin von Staphylococcus aureus 'Smith 5R' wurde auf Dolman-Wilson-Agar-Overlain mit Cellophan produziert. Maximale Erträge von Rohlysin mit Titern von 2000 bis 4000 hämolytischen Einheiten/ml wurden innerhalb von 24 Stunden bei 37 Grad C in 10% (v/v) CO2 in der Luft, auf einem Medium, der auf pH 7-0 angepasst wurde, erreicht. Das rohe Lysin wurde 2700-fach (mit 75% Erholung) durch Ultrafiltration, Gelfiltration und Ammoniumsulfatfraktionation gereinigt. Die spezifische Aktivität des Lysins betrug 10(5) haemolytische Einheiten/mg Protein, nachdem das dialysierte aktive Niederschlag mit NaCl extrahiert und mit Ammoniumsulfat verabreicht wurde. Reinigtes Gamma-Lysin war durch Disc Electrophoresis und Immunoelektrophoresis homogen.
Basischer und neutraler Aminosäuretransport in Aspergillus nidulans. Der Transport von Arginin und Methionin durch Aspergillus nidulans mycelium wurde untersucht. Ein einziges Absorptionssystem ist für den Transport von Arginin, Lysin und Ornithin verantwortlich. Der Transport ist energieabhängig und spezifisch für diese grundlegenden Aminosäuren. Der Km-Wert für Arginin ist 1 X 10(-5) M, und Vmax ist 2-8 nmol/mg trocken wt/min; Km für Lysin ist 8 X 10(-6) M; Kt für Lysin als Inhibitor der Argininaufnahme ist 12 muM, und Ki für Ornithin ist mM. Auf einem minimalen Medium wird Methionin mit einem Km von 0-I mM und Vmax um I nmol/mg trocken wt/min transportiert; Transport wird durch Azid gehemmt. Neutrale Amniensäuren wie Serin, Phenylalanin und Leucin werden wahrscheinlich durch dasselbe System transportiert, wie durch ihre Hemmung der Methioninaufnahme und das Vorhandensein eines speziell gestörten Mutants in ihrem Transport angezeigt wird. Der recessive Mutant nap3, der keine neutralen Aminosäuren transportieren konnte, wurde als resistent gegen Selenomethionin und P-Fluorphenylanin isoliert. Dieser Mutant hat den unveränderten Transport von Methionin durch allgemeine und spezifische Schwefelregulierte Permeasen.
Polyaminsäure induzierte die Aphidübertragung von Pflanzenviren. Aphids übertragen Poly-L-Ornithin (PLO)-behandelt Tabak-Mosaik-Virus (TMV) bei gegebenen Akquisition und Impfung Zugangsperioden so kurz wie 30 s und 2 min, bzw. die Fähigkeit zu übertragen wurde innerhalb von 90 min verloren. Die Übertragung ist ähnlich wie bei nicht persistierenden Viren. Das Verhältnis von Virus zu Polyaminsäure sowie die KCl-Konzentration beeinflussten die Übertragung deutlich. Die Übertragung war am besten aus Mischungen, die 250 mug/ml TMV, 2-5 MUG/ML PLO (mol. wt. 120000) und 0-6 M-KCl enthielten. Eine ähnliche Mischung förderte die Übertragung, wenn Poly-L-Lysin (mol. wt. 85000) für PLO ersetzt wurde, aber mit Poly-L-Lysin (mol. wt. 30 000) war es notwendig, den KCl auf 0-3 M zu senken, um Übertragung zu erhalten. Weniger KCl (0-08 bis 0-24 M) förderte auch die Aphidübertragung von PLO-behandeltem Kartoffelvirus X und Tabakräutervirus. PLO-behandeltes TMV ultracentrifugiert in Gegenwart von, und resuspendiert in, 0-6 M-KCl blieb aphid übertragbar, während PLO-behandeltes Virus in 2 M-DCl, die eine größere Dissoziation des Virus-PLO-Komplexes begünstigt, war weder vor noch nach Sedimentation durch ultracentrifugieren und resuspendieren in 0-6 M-KCl übertragbar. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Übertragbarkeit nicht auf eine dauerhafte Veränderung des Virus durch PLO zurückzuführen ist und deuten darauf hin, dass die Bildung eines TMV-PLO-Komplexes für die Übertragung erforderlich ist. Sequentielle Erwerbsexperimente deuten darauf hin, dass PLO durch Bindung von TMV an Rezeptor-Sites in Aphiden wirken kann. Die Möglichkeit, dass PLO den Infektionsprozess beeinflusst, wurde jedoch nicht ausgeschlossen.
Störung des Vi-Bakteriofag III und Lokalisierung seiner Deacetylase-Aktivität. Es wurde gezeigt, dass Partikel von Vi-Bakteriofag III die Deacetylierung von O-Acetylpektinsäure (polygalacturonic) katalysieren, einem strukturellen Analogon von Vi-Polysaccharid (Vi-Antigen). Mit diesem Substrat und der Bestimmung der durch Gas-Flüssigkeitschromatographie freigesetzten Essigsäure wurde eine Methode zur Schätzung der Vi-Phage-Deacetylase-Aktivität entwickelt. Reinigte Partikel von Vi Phage III wurden einer Vielzahl von mild dissociativen Reagenzien und Bedingungen ausgesetzt und dann auf Plaque-Bildung und für Deacetylase-Aktivität getestet. Sie wurden auch unter dem Elektronenmikroskop untersucht. Osmotischer Schock und Inkubation in Anwesenheit von Ethylenediamin tetraacetic Säure (größer als oder gleich 0-01 M), oder von L-Arginin (0-25 M), wurde festgestellt, dass die Zersetzung der Virionen in leere Kopfkappen, Deoxyribonukleinsäure und Basisplatten, die noch die Spikes tragen, verursachen. Die Mischungen von Virusfragmenten zeigten eine erhöhte Deacetylaseaktivität. Mithilfe von zonaler Sedimentation und Ionen-Austausch-Chromatographie wurden die durch Behandlung mit Ethylenediaminetetraazätsäure erhaltenen Phage-Fragmente fraktioniert und die Basisplatten isoliert. Unter den viralen Komponenten zeigten diese Strukturen die höchste spezifische Deacetylase-Aktivität. Sie hatten die Form von sechseckigen Sternen (etwa 9-5 nm innerer und 14-5 nm äußerer Durchmesser). mit einem zentralen Loch oder Plug (etwa 3 nm), mit sechs Spikes, ungefähr zylindrischen Organellen von etwa 11 x 4 nm, einer an jedem der Punkte. Von den Polypeptiden von sechs Größen (P.1, etwa 153.000 Daltons; P.2, 91.000; P.3, 71.000; P.4 56,500; P.6, 22.000), die in den gesamten Vi Phage III Virionen durch Natrium-Dodecyl-Sulfat-Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese nachgewiesen wurden, wurden nur zwei, P.2 und P.3 in den Basisplatten gefunden.
Ein Modell, um psychiatrische Krankenhäuser zu ersetzen. Ein umfassendes System der Gemeinschaftsbehandlung im Südwesten von Denver hat den Bedarf an erwachsenen psychiatrischen Krankenbetten auf weniger als 1/100.000 der Bevölkerung reduziert. Sechs kleine, auf der Gemeinschaft basierende therapeutische Umgebungen, Krisenintervention, Hausbehandlung, Intervention sozialer Systeme und schnelle Beruhigung bilden die wesentlichen Bestandteile dieses Gesamt-Gemeinschaftspflege-Systems. Das System funktioniert im Rahmen von Bürgerbeteiligung und Community-Kontrolle, der Beseitigung von formalen Personalbüros und einem Fokus auf der Arbeit in der realen Umgebung des Kunden und seiner Familie. Um die Wirksamkeit der Gemeinschaftsversorgung zu bewerten, wurden Patienten, die in den Krankenhaus eingeliefert werden sollten, zufällig in ein psychiatrisches Krankenhaus oder in eine alternative Gemeinschaftsbehandlung zugewiesen. Ausgangsmaßnahmen bei Entlassung und bei der Folgemaßnahme, die der Patient selbst, das Behandlungspersonal und Familienmitglieder abgeschlossen haben, deuten darauf hin, dass die Gemeinschaftsbehandlung wirksamer war als die psychiatrische Krankenhausaufnahme.
Dynamische Veränderungen des regionalen CBF, des intraventrikulären Drucks, des pH-Wertes von CSF und der Laktatspiegel während der akuten Phase der Kopfverletzung. Die Autoren messen regionalen Gehirn 133xenon (133Xe) Blutfluss (rCBF), intraventrikulären Druck (IVP), Zerebrospinalflüssigkeit (CSF) pH und Laktat, systemischen arteriellen Blutdruck (SAP), und arterielle Blutgase während der akuten Phase bei 23 Komatose-Patienten mit schweren Kopfverletzungen. Die IVP wurde unter 45 mm Hg gehalten. Der rCBF wurde wiederholt gemessen und die Reaktion auf induzierte Hypertonie und Hyperventilation wurde getestet. Die meisten Patienten hatten rCBF reduziert. Es wurde keine Korrelation zwischen dem durchschnittlichen CBF und dem klinischen Zustand gefunden, und weder die globale noch die regionale Ischämie trug signifikant zur verminderten Gehirnfunktion bei. Es wurde keine Korrelation zwischen CBF und IVP oder CBF und cerebral perfusion pressure (CPP) gefunden. Das CSF-Laktat wurde bei Patienten mit Hirnstammläsionen signifikant erhöht, aber nicht bei Patienten mit "reinen" Kortikalläsionen. Die 133Xe-Clearance-Kurven aus Gebieten mit schweren Kortikalverletzungen hatten sehr schnelle Anfangskomponenten, die als Gewebespitzen bezeichnet werden. Die Gewebepickbereiche korrelieren mit Bereichen der frühen Venen in den Angiogramms, was auf einen Zustand der relativen Hyperämie hinweist, die als Gewebepick-Hyperämie bezeichnet wird. Tissue-peak-Hyperämie wurde bei allen Patienten mit Kortikallazeration oder schwerer Kontusion, aber nicht bei Patienten mit Hirnstammläsionen ohne solche Kortikalläsionen festgestellt. Die Spitzen stiegen während der klinischen Verschlechterung und verschwanden während der Verbesserung. Sie könnten durch induzierte Hypertonie ausgelöst und während der Hyperventilation verschwunden sein. Die Veränderungen in den Gewebepickgebieten schienen mit dem klinischen Verlauf der Kortikalläsion zusammenhängend zu sein.
Pflege Dekanen als Führungskräfte in Collegiate Gesundheitsberufen. Dekane der Pflege, die sich für Administratoren der Gesundheitswissenschaften entscheiden, können die Pflegeprogramme sehr gut verbessern, indem sie der Pflegefakultät erleichtern, Führungskräfte zu werden, indem sie Dienstleistungskurse in der Gesundheit anbieten, können dadurch helfen, die hohen Kosten für die Pflegeausbildung zu senken, und können einen Beitrag zu anderen Gesundheitsfachhändlern leisten, indem sie ihre Fachkenntnisse in der Gesundheitstheorie teilen.
Studien über die Wirkung von Diätcholesterin auf die Proteinsynthese der Leber, reduzierte Glutathionspiegel und Serin-Dehydratase-Aktivität bei Ratten. Eine basale Diät oder eine basale Diät plus 1% Cholesterin und 0,33% Cholsäure wurden Ratten über unterschiedliche Zeiträume gefüttert und (1) die Aktivitäten der Leberphosphoenolpyruvate-Carboksynase (PEP-CK), Tyrosin-Transaminase (TT) und Serin-Dehydratase (SD); (2) die Geschwindigkeit der gesamten Leberprotein-Synthese und (3) die Konzentration von reduziertem Leberglutathion (GSH) wurden quantifiziert. Die spezifische Aktivität von PEP-CK wurde durch Cholinsäure und Cholinsäure signifikant unterdrückt, während die spezifische Aktivität von TT unverändert blieb. Es wurde keine signifikante Wirkung von Diät-Cholesterin plus Cholsäure auf die gesamte Leberaktivität gefunden. Im Gegensatz dazu wurde die SD-spezifische Aktivität um das Dreifache erhöht. Die Geschwindigkeit der (U-14C)-L-Leucin-Inkorporation in das gesamte TCA-Abfälleprotein nach der Einnahme von Cholesterin plus Säure wurde signifikant reduziert, wenn die Daten als dpm (U-14C)-L-Leucin/mg-Protein ausgedrückt wurden. Nach der Korrektur dieses Ausdrucks für die spezifische Radioaktivität des Lebergewebe-freien Leucin-Pools gab es keine signifikante Wirkung von Diät-Cholesterin plus Cholsäure auf die Proteinsynthese der Leber. Tatsächlich war die Menge an 14C-Leucin, die in Protein auf einer Gesamtleberbasis eingebunden wurde, für die Cholesterin-Gruppe 50% größer. Auf einem Gramm Leberbasis wurde die Konzentration von GSH in der Leber von Ratten, die mit einer Cholesterin-Plus-Cholensäure-Diät gefüttert wurden, signifikant verringert. Unter Berücksichtigung der Lebervergrößerung bei Ratten, die mit Cholesterin und Cholsäure gefüttert wurden, wurde festgestellt, dass der Gesamtorgan-GSH signifikant größer war als bei Ratten, die mit einer Basaldiät gefüttert wurden.
Thiamin-Triphosphatase-Aktivität von Myosin und beschleunigende Wirkung von Thiamin-di- und Triphosphaten auf die Überschwemmung von Actomyosin. TTP beschleunigte die ATP-induzierte Überschwemmung von Actomyosin in einer Konzentration von bis zu 30 mM und verringerte die Lichtverschleierung durch Actomyosin. Diese Effekte könnten auch auf die gleiche Weise beobachtet werden, aber in geringerem Maße, zusätzlich zu TDP. Myosin war in der Lage, TTP zu TDP zu hydrolysieren, aber einige wichtige Unterschiede wurden zwischen Myosin TTPase und ATPase bestätigt. Myosin TTPase wurde durch Actin gehemmt und zeigte eine viel größere Km als die von ATPase. TTP signifikant hemmt Myosin B ATPase und ATP stark hemmt Myosin B TTPase. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die beschleunigende Wirkung von TDP und TTP möglicherweise auf die Bindung von Thiaminphosphat an die regulatorische Stelle von Myosin zurückzuführen ist, gefolgt von einer Veränderung seiner physikalischen chemischen Eigenschaften, anstatt auf die wettbewerbsfähige Bindung von Thiaminphosphat an die katalytische Aktivitätsstelle von Myosin.
Die Bedeutung der Leydig-Zelle in Bezug auf die Ätiologie des Kryptorchidismus: Eine experimentelle elektronmikroskopische Studie. In unseren elektronmikroskopischen Studien von Hodenbiopsien, sowohl normalen als auch kryptorchiden, fanden wir eine einfache Atrophie der Leydig-Zelle im kryptorchiden Hoden. Basierend auf Experimenten von Raynaud1,2 und Jean3 an schwangeren Mäusen haben wir versucht, den Grund für Veränderungen in der Leydig-Zelle zu finden, die mit der Ätiologie des Kryptorchidismus zusammenhängen. Wir fanden bei der elektronmikroskopischen Untersuchung der Hoden bei den Nachkommen schwangerer Mäuse, die mit Östrogen behandelt wurden, dieselbe Atrophie der Leydig-Zelle wie bei menschlichem Kryptorchidismus. Diese Veränderungen sind nicht offensichtlich, wenn Östrogen und HCG zusammen verabreicht werden. Aus diesem Experiment können wir schließen, dass ein Mangel an Gonadotropinstimulation zur Atrophie der Leydig-Zellen führt. Diese Atrophie produziert dann einen Mangel an Androgen, das für Kryptorchidismus verantwortlich sein könnte.
Die in vitro Adsorption von Arzneimitteln aus Pferdeserum auf Kohlenstoff, das mit einem Acryl-Hydrogel beschichtet ist. In-vitro-Studien haben gezeigt, dass unbeschichteter Kohlenstoff und Kohlenstoff, die mit einem Acryl-Hydrogel beschichtet sind, in der Lage sind, Medikamente aus Pferdeserum bei 37 Grad zu adsorbieren. Eine Erhöhung des Beschichtungsgewichts von 2 bis 4% verringerte die Adsorptionsrate, aber nicht die Gesamtkapazität. In vivo-Daten unterstützen das Konzept der Kohlenstoffhämoperfusion zur Behandlung von Medikamentenüberdosierung.
Die Wechselwirkung von Antihistaminika mit Lecithin-Monolagern. Die Wechselwirkung einer Reihe von Antihistaminika mit Monolagern von L-Alpha-Dipalmitoyl-Lezithin wurde untersucht. Eine Erhöhung des Oberflächendrucks in der Einlagerung wurde bei Monolagen beobachtet, die sich auf die Antihistamin-Lösungen ausbreiteten, was auf die Penetration des Films durch Arzneimittelmoleküle hindeutet. Bei hohem Oberflächendruck gab es eine scheinbare Ausstoßung von Medikamentenmolekülen aus dem Film. Die Fähigkeit der Antihistaminika, den Oberflächendruck zu erhöhen, war mit ihrer Oberflächenaktivität an der Luft-Lösung-Schnittstelle korreliert. Die Wirkung der Arzneimittelkonzentration auf die Größe des Oberflächendrucks wurde für Diphenhydramin-Hydrochlorid untersucht. Die Anwendung der Gibbs-Adsorptionsgleichung bei niedrigen Oberflächenkompressionen zeigte eine ungefähre Fläche pro Molekül für Diphenhydramin in der Folie, die mit dem zuvor bei der Luft-Lösung-Schnittstelle erhaltenen Wert gut übereinstimmte. Vorläufige Messungen zeigten, dass der Oberflächendruckanstieg bei Phosphatpuffer bei pH 6-8 größer war. Es war nicht klar, ob dieser Effekt durch die Pufferkomponenten verursacht wurde oder ein pH-Effekt war.